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肠出血性大肠杆菌O157毒力及黏附相关基因的PCR检测和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析

         

摘要

目的 了解大肠杆菌O157分离菌株携带毒力及黏附相关基因的情况及菌株的多态性.方法 用聚合酶链式反应扩增stxl、stx2、eaeA、ehxA、EspA和Tccp基因.选用限制性内切酶Hincl和EcoRll对分离的O157:H7菌株eaeA基因进行酶切.选用限制性内切酶HaeⅢ、HinfⅠ、EcoRⅡ和RsaⅠ对分离的O157:H7菌株ehxA基因进行酶切,最后对这两个基因进行PCR-RFLP分析.结果 所有O157:H7菌株扩增出eaeA、ehxA、EspA和Tccp基因,但没有扩增出stxl和stx2基因;4株O157:H1菌株,均没有扩增出stx2、eaeA、ehxA、EspA和Tccp基因,且只有1株扩增出stx1基因.所有分离菌株的eaeA基因和ehxA基因选用限制性内切酶酶切之后所得酶切片段数目和大小与标准菌株的eaeA基因和ehxA基因选用限制性内切酶酶切之后所得酶切片段数目和大小相同.结论 由于所有菌株缺失stx2基因,其致病力相对较低,且在基因水平较为保守,多态性较为单一.

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