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同时测定山楂叶总黄酮中6种黄酮含量及体外抗氧化活性评价

         

摘要

目的:建立HPLC方法同时测定山楂叶总黄酮(Hawthorn Leave Flavonoids,HLF)中6种主要黄酮类成分含量及验证HLF体外抗氧化活性。方法:采用CAPCELL PAK C18 MG S5(4.6×250 mm,5μm)色谱柱;乙腈-0.1%甲酸水为流动相梯度洗脱(0~12 min,11%→17%A;12~30 min,17%→18%A;30~45 min,18%→40%A;45~60 min,40%→100%A),检测波长为360 nm,流速为1 mL﹒min-1,柱温为30℃,进样量10μL。采用ABTS和DPPH试验评价体外抗氧化活性。结果:牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素、芦丁、金丝桃苷和槲皮素分别在0.6255-4.8947μg(r=0.9998)、1.5005-13.1391μg(r=0.9996)、0.0831-0.6404μg(r=0.9995)、0.0595-0.4837μg(r=0.9999)、0.0616-0.4883μg(r=0.9997)、0.0804-0.6536μg(r=0.9999)范围内线性关系良好,精密度、重复性、稳定性试验的RSD均小于3.0%,平均加样回收率分别为98.02%、96.46%、103.55%、103.42%、103.87%、96.46%,RSD分别为2.25%、1.15%、0.51%、1.06%、0.45%、0.87%(n=6)。结果表明该方法准确、简捷、可靠,可用于HLF中6种成分的含量测定。ABTS和DPPH自由基清除试验得出HLF的半数清除率(EC50)分别约为9.80、14.05μg﹒mL;。结论:建立了HPLC同时测定HLF中6种黄酮类成分的含量测定方法,对更好控制HLF质量具有重要的意义。该研究为山楂叶总黄酮的药效物质发现、质量控制和评价提供科学依据。同时,山楂叶总黄酮在体外具有较好的抗氧化活性。

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