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锁阳多糖制备过程中脱蛋白方法的研究

         

摘要

目的在锁阳多糖的提取过程中,大量的蛋白质因静电等相互作用而吸附在多糖周围而成为一种多糖的杂质,这些蛋白质会影响锁阳多糖的结构确定和活性测试。Sevag法作为实验室最常用的脱蛋白方法,需要氯仿和正丁醇两种有机试剂,不利于环境保护和工业化生产。本研究旨在探究出一种多糖保留率高、去除蛋白效果好的脱蛋白方法,为锁阳多糖的产业化生产提供依据。方法通过水提醇沉法得到锁阳粗多糖,使用考马斯亮蓝测定法和苯酚-硫酸法分别测定经尿素法、木瓜蛋白酶法、NaOH法、盐酸胍法四种方法对锁阳粗多糖除蛋白的效果及多糖保留率。结果尿素法透析前后脱蛋白率均在60%左右,透析前多糖保留率在95%以上,透析后多糖保留率在33%左右。木瓜蛋白酶法透析前后脱蛋白率均在60%左右,透析前多糖保留率在98%以上,透析后多糖保留率在33%左右。NaOH法透析前脱蛋白率为80%左右,透析后脱蛋白率约为92%,透析前后多糖保留率均在20%左右。盐酸胍法透析前后脱蛋白率均在60%以上,透析前多糖保留率为70%左右,透析后多糖保留率降低至25%左右。结论通过比较四种脱蛋白方法的蛋白脱除率和多糖保留率,证明木瓜蛋白酶法和尿素法最适合用于锁阳多糖制备过程中的脱蛋白工艺。

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