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低氧对小鼠视网膜神经节细胞-5中根蛋白表达的影响

         
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摘要

目的 观察低氧对视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGC)-5中根蛋白(radixin,RDX)表达的影响,探讨低氧损伤中RGC的损伤机制和可能的保护途径.方法 常规培养RGC-5,用RGC特异表面标记性抗原Thy-1鉴定;CoCl2法建立低氧模型,以含终浓度为100 μmol·L-1CoCl2培养基培养RGC-5 3 h、6h、12 h、24h、48 h,采用Real-time RT-PCR和Western blot检测RDX mRNA及其蛋白在RGC-5中的表达情况,采用免疫荧光观察RDX在RGC-5细胞中的表达及定位.结果 体外培养的RGC-5呈梭形或多边形,特异性表面标记性抗原Thy-1反应阳性.Real-time RT-PCR结果显示,低氧组RDX mRNA表达呈进行性增强,于低氧6h达到高峰后开始下降;正常对照组RDX mRNA的相对表达量为1.00±0.11,低氧3h、6h、12 h、24h、48 h分别为1.37±0.18、1.75±0.32、1.21±0.23、0.91±0.19、0.63±0.26,总体比较差异有统计学意义(F=813.717,P=0.000).Western blot结果 显示,不同培养条件下RGC-5细胞中RDX蛋白的总体比较差异有统计学意义(F=1.279,P=0.000).低氧3h、6h、12 h、24h组RDX/GAPDHA值均高于正常对照组,差异均有统计学意义(t=55.301,P=0.000;t=139.986,P=0.000;t =37.552,P=0.000;t=4.183,P=0.014);低氧48 h组RDX/GAPDH A值(0.24±0.03)低于正常对照组(0.33±0.02),差异有统计学意义(t=38.889,P=0.000).在低氧组内不同时间点比较,RDX/GAPDHA值随时间的延长呈逐渐上升趋势,于低氧6h达高峰,然后开始下降,差异有统计学意义(P＜0.05).免疫荧光观察发现RDX蛋白阳性表达在RGC-5细胞中,与正常对照组相比,低氧组RDX的表达先增强(6h)后减弱.结论 低氧条件下小鼠RGC-5细胞中RDX表达水平先升高后降低,可能与视网膜新生血管疾病中RGC凋亡相关.

著录项

  • 来源
    《眼科新进展》 |2014年第5期|433-437|共5页
  • 作者

    闫琳; 王龙梅; 杨侠; 董晓光; 徐海峰;

  • 作者单位

    261053 山东省潍坊市,潍坊医学院、山东省眼科研究所;

    261053 山东省潍坊市,潍坊医学院、山东省眼科研究所;

    266071 山东省青岛市,山东省眼科研究所、青岛眼科医院;

    266071 山东省青岛市,山东省眼科研究所、青岛眼科医院;

    266071 山东省青岛市,山东省眼科研究所、青岛眼科医院;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类
  • 关键词

    根蛋白; 视网膜神经节细胞-5; 缺氧; 细胞活力;

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