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基于过程优化探索蛋白印迹技术的实验教学设计

         

摘要

为了提高蛋白印迹实验的成功率及缩短蛋白印迹实验的周期,探索符合实验教学的过程方案,以蛋白印迹法实验操作为模板,以β-actin(48 kDa)为目的蛋白,以GAPDH(36 kDa)为标准蛋白,通过改变实验条件,计算β-actin与GAPDH显影后灰度值的比值,进行实验过程的优化。并对优化前后实验过程中在制胶、加样、电泳、转膜、封闭以及孵育等环节的成功率、离散度、所用时间等方面进行比较。结果表明,优化后的免疫印迹法能有效地提高成功率、降低离散度、缩短实验时间,β-actin与GAPDH显影后灰度值比值更接近1,达到实验教学的要求。

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