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Ⅳ型胶原酶模型的建立及其在中药活性成分筛选中的应用

         

摘要

目的 建立Ⅳ型胶原酶筛选模型,并运用此模型对中药活性成分进行评价.方法 利用Ⅳ型胶原酶特异性水解明胶释放的末端氨基与2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)发生显色,吸光度值可以衡量Ⅳ型胶原酶含量,优化Ⅳ型胶原酶浓度、琥珀酰凝胶浓度、显色剂用量及时间参数.结果 确定了Ⅳ型胶原酶筛选模型的条件:5.0×10-5 g/L酶溶液、20 g/L琥珀酰凝胶溶液、60μ1 0.05 %TNBS、显色30 min,阳性药盐酸四环素在1.0g/L下对该酶的抑制率是19.39%,并呈现一定的量效关系,表明成功建立该筛选模型.应用该模型筛选发现,阿魏酸和川芎嗪具有明显的抑制Ⅳ型胶原酶活性,而水杨酸和小檗碱则具有促进作用.结论 Ⅳ型胶原酶的筛选模型成功建立并应用到中药活性成分筛选中,为快速评价中药活性成分及其作用机制提供了有益参考.

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