重组牛精核糖核酸水解酶基因的克隆、表达及纯化

周兴涛; 李敏

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牛精细胞核糖水解酶(BS-RNase A)是一种在精细胞中大量表达并且对肿瘤细胞有毒性的蛋白,可以用来抗肿瘤.为降低成本,提高安全性因此计划通过基因工程的手段,在原核生物中克隆、表达BS-RNase A基因并进一步的纯化目的蛋白.利用PCR技术扩增得到牛RNA水解酶基因,将其克隆到原核表达载体pGEX-CS,进行酶切和测序验证,然后利用IPTG诱导表达该重组子,并纯化目的蛋白.SDS-PAGE图谱显示在42kd处有明显的诱导,表明牛RNA水解酶基因获得高效表达.用GST试剂盒纯化目的蛋白然后再用SDS-PAGE检测,结果显示目的蛋白得到了有效的纯化.综上结果说明牛精细胞RNA水解酶的成功克隆、表达并纯化,为今后进一步研究其生物学活性及抗肿瘤打下基础.

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来源
《科技经济市场》 |2007年第12期|161|共1页
作者
周兴涛; 李敏;
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作者单位

南昌大学生命科学学院,江西,南昌,330047;

南昌大学生命科学学院,江西,南昌,330047;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂;
关键词
牛RNA水解酶基因; GST融合蛋白; 表达; 纯化;

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