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抗癌胚抗原纳米抗体展示文库的构建与筛选

         

摘要

利用噬菌体展示技术进行纳米抗体库的构建和筛选,获得抗癌胚抗原(CEACAM5)的高亲和力、强特异性纳米抗体,为相关癌症诊断及靶向治疗的应用奠定基础.使用重组CEACAM5抗原免疫羊驼,分离免疫后羊驼的外周血淋巴细胞,提取总RNA后通过RT-PCR技术扩增羊驼重链抗体可变区(VHH)片段,构建纳米抗体文库.采用噬菌体展示技术和固相淘选方法,筛选得到强阳性克隆,经大肠杆菌表达和镍离子亲和层析获得纳米抗体,最终利用Biacore分析其亲和力和特异性.通过3轮的淘选,获得一株纳米抗体亲和力达到2.6×10-10 mol·L-1,对同源性蛋白CEACAM-1、-3、-6、-8及肿瘤蛋白AFP均无交叉反应性.利用噬菌体展示技术成功获得了抗癌胚抗原(CEACAM5)的高亲和力、强特异性纳米抗体,可用于后续相关癌症诊断和靶向治疗.

著录项

  • 来源
    《科学技术与工程》 |2018年第28期|189-194|共6页
  • 作者单位

    长春理工大学生命科学技术学院 ,长春130022;

    长春理工大学生命科学技术学院 ,长春130022;

    长春理工大学生命科学技术学院 ,长春130022;

    吉林亚泰生物药业股份有限公司 ,长春130033;

    吉林亚泰生物药业股份有限公司 ,长春130033;

    吉林亚泰生物药业股份有限公司 ,长春130033;

    吉林亚泰生物药业股份有限公司 ,长春130033;

    长春力太生物技术有限公司 ,长春130000;

    长春理工大学生命科学技术学院 ,长春130022;

    长春力太生物技术有限公司 ,长春130000;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 Q816;
  • 关键词

    癌胚抗原; 纳米抗体; 噬菌体展示; 亲和力; 特异性;

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