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多粘类芽孢杆菌新普鲁兰酶基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

         

摘要

为了使新普鲁兰酶基因在大肠杆菌中表达并实现高密度发酵生产,采用PCR方法从多粘类芽孢杆菌基因组DNA中扩增出新普鲁兰酶基因Npu,测序结果表明Npu基因全长2106 bp,编码515个氨基酸,与其他多粘类芽孢杆菌新普鲁兰酶基因序相似性高达99%.将Npu基因连接到质粒PMD18T上,构建了PMD18T-Npu vecter重组载体.将该重组裁体转化到大肠杆菌BL21中,该酶基因在大肠杆菌细胞中获得活性表达,并能将酶蛋白分泌到胞外.重组菌株BL21 PGEX 4T-1-Npu具有较好的遗传稳定性,连续传代培养10代,菌株所产酶总酶活性仍保持在715 U;纯化后的酶液于25℃保存6个月酶活性仍保持在5427 U,于4℃保存12个月酶活性仍保持在5390.5 U.这是首次对来源于类芽孢杆菌属(paenibacillus)的普鲁兰酶进行报道,由于Npu具有较好的水解淀粉支链的能力,因此其在淀粉加工业以及洗涤业上应用前景良好.

著录项

  • 来源
    《食品工业科技》 |2020年第15期|119-123128|共6页
  • 作者单位

    甘肃省商业科技研究所有限公司 甘肃兰州730010;

    甘肃省商业科技研究所有限公司 甘肃兰州730010;

    甘肃省商业科技研究所有限公司 甘肃兰州730010;

    甘肃省动物源性制品安全分析与检测技术重点实验室 甘肃兰州730010;

    甘肃省商业科技研究所有限公司 甘肃兰州730010;

    甘肃省商业科技研究所有限公司 甘肃兰州730010;

    甘肃省动物源性制品安全分析与检测技术重点实验室 甘肃兰州730010;

    甘肃省商业科技研究所有限公司 甘肃兰州730010;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 食品微生物学;
  • 关键词

    新普鲁兰酶; 多粘类芽孢杆菌; 大肠杆菌; 克隆和表达;

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