我国木本植物致病性土壤杆菌的分子检测和比较鉴定

田国忠; 李永; 朱水芳; 贾瑞祥; 王慧敏

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根据根癌土壤杆菌Ti质粒的保守序列设计了2对引物,对我国不同木本植物上分离鉴定的10株致病性根癌土壤杆菌进行PCR,致瘤性根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)扩增出427 bp和338 bp的特异性DNA片段,而发根土壤杆菌(A.rhizogenes)仅扩增出338 bp片段,放线土壤杆菌(A.radiobacter)、丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)和泡桐丛枝病植原体(phytoplasma)皆未有特异扩增带.用CYT/CYT'引物对也可鉴定T-DNA遗传转化瘤组织,而VirD2A/VirD2E可用于工程土壤杆菌株侵染能力鉴定.从北京通州杨树苗圃和河北廊坊桃园的病树冠瘿组织和土壤中经选择培养基分离菌株,然后PCR筛选出6个致病性根癌土壤杆菌菌株,而未能从施用过抗根癌生防制剂的北京玉渊潭公园樱花根癌病园中分离和鉴定出典型的致病根癌土壤杆菌株.将杨树根癌土壤杆菌菌株(CFCC1001)异戊烯基转移酶基因(ipt)片段克隆和序列测定结果显示与A.tumefaciens Ti15955菌株的ipt基因序列同源性为83.64%.用此片段制备的ipt cRNA基因探针进行斑点杂交和Northern blot,结果显示此探针与杨树根癌土壤杆菌以及玫瑰、樱花、海棠、桃树等木本植物上分离鉴定的致病土壤杆菌菌株所扩增出的427 bp片段都有明显杂交信号,但与引起泡桐丛枝病植原体染色质和染色质外DNA均未有明显杂交信号.

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来源
《林业科学》 |2006年第2期|63-72|共10页
作者
田国忠; 李永; 朱水芳; 贾瑞祥; 王慧敏;
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作者单位

中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所,北京,100091;

中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所,北京,100091;

中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所,北京,100029;

中国农业大学植物病理系,北京,100094;

中国农业大学植物病理系,北京,100094;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类细菌;基因工程（遗传工程）;
关键词
土壤杆菌; 多聚酶链式反应; ipt和VirD2基因; 核酸杂交; 泡桐丛枝植原体;

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