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生肌玉红膏对血栓性脉管炎大鼠血管平滑肌细胞凋亡、炎性因子表达的影响及机制

         

摘要

目的探究生肌玉红膏对血栓性脉管炎大鼠血管平滑肌细胞凋亡、炎性因子表达的影响及机制。方法取40只大鼠,随机分为正常组、模型组、血管内皮祖细胞(EPC)干预组、生肌玉红膏组,每组10只,除正常组外,均建立血栓性脉管炎模型,正常组与模型组尾静脉每天1次输注1 mL生理盐水,EPC干预组输注数量为5×105个EPC细胞后创面外敷生肌玉红膏,生肌玉红膏组创面外敷生肌玉红膏。将EPC细胞培养后观察细胞形态,检测IL-6、IL-8、TNF-α、TGF-β1表达,采用免疫荧光法检测CD34、CD133,TUNEL法检测平滑肌细胞凋亡率,免疫印迹法检测内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)蛋白表达。结果模型组大鼠血清中IL-6、IL-8、TNF-α、TGF-β1水平及平滑肌细胞数高于正常组(P均<0.05),EPC干预组以上指标均低于模型组(P均<0.05),生肌玉红膏组以上指标均高于EPC干预组(P均<0.05)。模型组大鼠血管组织中CD34、CD133及血管组织中VEGF、bFGF蛋白表达低于正常组(P均<0.05),EPC干预组以上指标高于模型组(P均<0.05),生肌玉红膏组以上指标低于EPC干预组(P均<0.05)。正常组大鼠生长良好;模型组大鼠血栓显著,可见大量炎性细胞浸润;EPC干预组血栓变化缓解,伴随少量炎性细胞,血管平滑肌细胞排列趋于整齐;生肌玉红膏组少量血栓,血管平滑肌细胞排列略显紊乱。模型组大鼠血管组织中CD34、CD133表达低于正常组(P均<0.05),EPC干预组以上指标高于模型组(P均<0.05),生肌玉红膏组CD34、CD133指标低于EPC干预组(P均<0.05)。与正常组比较,模型组血管组织中平滑肌细胞凋亡率高(P<0.05);与模型组比较,EPC干预组血管组织中平滑肌细胞凋亡率高(P均<0.05);与EPC干预组比较,生肌玉红膏组平滑肌细胞凋亡率较低(P均<0.05)。模型组大鼠血管组织中VEGF、bFGF蛋白表达低于正常组(P均<0.05),EPC干预组VEGF、bFGF蛋白表达高于模型组,生肌玉红膏组VEGF、bFGF蛋白表达低于EPC干预组(P均P<0.05)。结论生肌玉红膏可促进血栓性脉管炎大鼠平滑肌细胞凋亡,降低炎性因子表达,激活VEGF与bF⁃GF蛋白表达,发挥血管保护作用;其机制可能与介导EPC分化相关。

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