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siRNA干扰立早蛋白ICP4对HSV-1病毒复制能力的影响

         

摘要

目的 观察siRNA作用于HSV-1病毒的ICP4后对HSV-1复制能力的影响.方法 设计两段靶向HSV-1 ICP4的siRNA和一段阴性对照序列,酶切连接法构建重组质粒pLKO-puror-hU6-siRNA/CON;脂质体法包装重组慢病毒pLKO-puror-hU6-siRNA/CON;嘌呤霉素筛选法建立抗ICP4的siRNA单克隆细胞系(VERO115、VERO3604、VERO115+3604、VERO-CON);TCID50法检测siRNA对HSV-1的病毒复制能力的影响.结果 成功构建重组质粒pLKO-puror-hU6-siRNA/CON;获得重组慢病毒pLKO-puror-hU6-siRNA/CON;成功构建四个抗ICP4的siRNA单克隆细胞系;BAC-HSV-1-GFP病毒感染单克隆细胞系,siRNA作用后野生型VERO细胞的细胞病变效应(CPE)及绿色荧光蛋白(GFP)表达率均近100%,VERO-CON细胞达90%以上.siRNA VERO115及VERO3604的CPE及GFP表达率明显高于VERO115+3604细胞,P<0.05.且不同位点联合干扰对病毒的抑制作用强于单一位点干扰,低于VERO115和VERO3604,P<0.05.结论 抗ICP4的siRNA对HSV-1的复制有明显的抑制作用,且不同位点siRNA联合干扰对病毒的复制有协同抑制效果.

著录项

  • 来源
    《山东医药》 |2010年第19期|76-78|共3页
  • 作者单位

    河南大学淮河医院,开封,475000;

    郑州大学第一附属医院;

    河南大学淮河医院,开封,475000;

    郑州大学第一附属医院;

    河南大学淮河医院,开封,475000;

    郑州大学第一附属医院;

    河南大学淮河医院,开封,475000;

    郑州大学第一附属医院;

    河南大学淮河医院,开封,475000;

    郑州大学第一附属医院;

    河南大学淮河医院,开封,475000;

    郑州大学第一附属医院;

    河南大学淮河医院,开封,475000;

    郑州大学第一附属医院;

    河南大学淮河医院,开封,475000;

    郑州大学第一附属医院;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 乳腺肿瘤;
  • 关键词

    RNA,小分子干扰; ICP4; 疱疹病毒1型,人; 病毒复制;

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