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miR-223对肺结核大鼠肺泡巨噬细胞吞噬能力的影响及其机制

         
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目的 观察miR-223对肺结核大鼠肺泡巨噬细胞(AM)吞噬能力的影响,并探讨其可能的机制.方法 将40只雄性SD大鼠随机分为miR-223组、模型组、阴性对照组和正常对照组,每组10只.miR-223组、模型组、阴性对照组建立肺结核模型(胸腔注射结核分枝杆菌悬液0.2 mL),正常对照组注射等量生理盐水;建模成功后,miR-223组、阴性对照组分别经尾静脉注射miR-223 mimics及其阴性对照质粒2 mg/kg,模型组、正常对照组注射等量生理盐水.各组继续喂养6周后分离AM,采用流式细胞术检测AM吞噬能力[平均荧光强度(MFI)和吞噬FITC-E.coli的阳性细胞百分比(简称吞噬阳性细胞百分比)],HE染色观察细胞形态变化,实时荧光定量PCR法检测miR-223、STAT3 mRNA表达,Western blotting法检测STAT3蛋白表达.结果 与正常对照组比较,miR-223组、模型组MFI、阴性对照组、吞噬阳性细胞百分比、miR-223相对表达量均降低,STAT3 mRNA及蛋白相对表达量均升高,且模型组、阴性对照组变化更明显(P均0.05).正常对照组AM细胞质状态及细胞形态完整,细胞核居中较多,未见吞噬颗粒聚集;miR-223组AM细胞质状态及细胞形态较好,细胞核居中或偏移,少量吞食颗粒聚集;阴性对照组、模型组AM细胞吞噬颗粒聚集,细胞核偏移较为严重.结论 肺结核大鼠AM中miR-223表达降低,过表达miR-223可增强AM的吞噬能力,其机制可能与抑制STAT3信号通路有关.

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