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七叶皂苷钠对HepG2肝癌细胞氧化应激和体内成瘤的调控作用及其机制研究

         

摘要

本研究为探究七叶皂苷钠(aescin sodium, AS)对HepG2肝癌细胞的氧化损伤作用及对Nude无胸腺裸鼠体内成瘤的调控作用及其作用机制。体内试验以Nude无胸腺裸鼠为载体,皮下接种5 106个人肝癌细胞株HepG2建立肿瘤模型。低、中和高剂量七叶皂苷钠组分别腹腔注射1 mg/kg、2.5 mg/kg及5 mg/kg的七叶皂苷钠进行治疗。体外以HepG2细胞为载体,通过CCK8试验检测七叶皂苷钠对HepG2细胞的细胞活力的影响,通过乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测七叶皂苷钠对HepG2细胞的LDH释放的影响,通过标准试剂盒检测HepG2细胞内氧化损伤因子谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)水平及丙二醛(MAD)的表达,通过荧光定量PCR(real-time PCR)试验检测小鼠肝脏及HepG2细胞内PI3K/Akt/mTOR通路基因表达。结果与Model组相比,七叶皂苷钠处理组显著降低小鼠体内瘤重及增加Nude无胸腺裸鼠体重,且2.5 mg/kg的七叶皂苷钠治疗组有最好的治疗效果。与Control组相比,七叶皂苷钠呈浓度依赖性抑制HepG2细胞的细胞活力,增加细胞内LDH释放及细胞的氧化损伤。且七叶皂苷钠在体内外下调了肝癌中PI3K/Akt/mTOR通路基因的表达。而在使用PI3K/Akt/mTOR通路的激活剂450 Y-P后,七叶皂苷钠的抗肝癌作用被显著减弱。七叶皂苷钠能诱导HepG2肝癌细胞的氧化损伤,抑制Nude无胸腺裸鼠的体内成瘤,并且其可能是通过调控机体内的PI3K/AKT/mTOR通路来实现的。表明七叶皂苷钠对原发性肝癌有一定的抑制作用,具有成为原发性肝癌治疗药物的潜力。

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