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阳离子铝酞菁红区荧光探针在纳克级RNA定量分析中的应用

         

摘要

荷正电的四取代三甲基碘化铵铝酞菁(Tetra(trimethylammionio) aluminum phthalocyanine,TT-MAAlPc)是新近出现的、很有应用潜力的新型红区荧光化合物.研究表明,弱碱性条件,RNA对TTMAAl-Pc的荧光具有高效猝灭作用,且猝灭程度与RNA含量呈线性正相关.据此发现建立了可测定纳克级RNA的高灵敏定量分析新方法,并对原理进行了讨论.考察了pH、缓冲体系、反应时间、温度、TTMAAlPc浓度的影响,确定了最佳反应条件(pH 8.0的广泛缓冲液、反应5 min、室温、浓度为2×10-6 mol·L-1的TTMAAlPc).在最佳条件下,方法的线性回归方程为y=-15.0+0.51x,相关系数r=0.998 6,线性范围7.71~1 705.57 ng·mL-1,检测限为1.55 ng·mL-1.本法灵敏度高、线性范围宽、对RNA测定常见干扰物质包括阴、阳离子、表面活性剂和维生素等的抗干扰能力强,且操作简便.该法应用于实际样品RNA含量的测定,取得了满意的结果.还以参比法首次测定了不同pH下TTMAAlPc的荧光量子产率,结果显示TTMAAlPc具有较高的荧光量子产率,且对大范围的酸度稳定,表明TTMAAlPc是极具应用潜力的新型红色荧光探针,值得深入研究,开拓其应用.

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