抗诺氟沙星单克隆抗体的制备及其性质的研究

徐田丽; 苏国成; 江晓颖; 孙雪珂; 江峰

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为了监测诺氟沙星抗生素的滥用,我们开发了一种基于单克隆抗体的酶联免疫方法.将小分子抗原诺氟沙星NOR通过碳二亚胺法与载体蛋白BSA、OVA进行偶联.得到完全抗原NOR-BSA和NOR-OVA.用NOR-BSA对3只雌性小鼠进行免疫后,利用细胞融合技术制备杂交瘤细胞,用间接ELISA法和间接竞争ELISA法筛选阳性细胞进行克隆,得到3株稳定分泌抗体的单克隆细胞株,分别命名为7C4,8G3,11G7.检测细胞的上清液和纯化后的腹水效价,分别为1∶512,1∶1024,1∶1024和1∶128000,1∶128000,1∶128000.对三株细胞的亚型鉴定为IgG2b,IgG2b,IgG1.建立的标准竞争曲线计算得IC50值为31.225 ng,其检测线性范围为5.011-630.95 ng/mL,最低检出量为2.75 ng.亲和力常数Kaff为4.6 ×108.诺氟沙星单克隆抗体与环丙沙星(27.22％)、恩诺沙星(11.29％)、奥比沙星(11.03％)、氧氟沙星(9.73％)、达氟沙星(7.38％)、沙拉沙星(2.57％)、二氟沙星(0.61％)几种抗菌药有较低的交叉反应率.

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来源
《科技风》 |2017年第12期|238-241|共4页
作者
徐田丽; 苏国成; 江晓颖; 孙雪珂; 江峰;
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作者单位

集美大学食品与生物工程学院福建厦门361021;

集美大学食品与生物工程学院福建厦门361021;

厦门中集信检测技术有限公司福建厦门361021;

厦门中集信检测技术有限公司福建厦门361021;

厦门中集信检测技术有限公司福建厦门361021;

厦门中集信检测技术有限公司福建厦门361021;

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正文语种 chi
中图分类
关键词
诺氟沙星; 单克隆抗体; 间接竞争酶联免疫吸附试验; 性质;

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