首页> 中文期刊> 《烟草科技》 >烟草糖基转移酶基因NtGT5a的克隆及原核表达

烟草糖基转移酶基因NtGT5a的克隆及原核表达

         

摘要

为揭示烟草糖基转移酶的活性及生物学功能,从烟草栽培品种中克隆了烟草糖基转移酶基因NtGT5a,基于GenBank的烟草糖基转移酶基因NtGT5a的核苷酸序列(GenBank登录号AB176523),设计并合成特异性引物,以红花大金元叶片总RNA为模板,通过RT-PCR方法获得了烟草糖基转移酶基因NtGT5a的cDNA片段.序列分析表明,该基因编码区为1458 bp,编码485个氨基酸残基,推测的蛋白分子量为54.21 kDa,理论等电点为5.41.通过构建重组表达载体pCold-SUMO-NtGT5a,并转化大肠杆菌BL21(DE3),在15℃下经0.2 mmol/L IPTG诱导22 h表达产生了SUMO-NtGT5a重组蛋白.重组蛋白部分以包涵体形式存在,部分以可溶性蛋白形式存在.将重组蛋白的可溶性组分经过Ni-NTA柱层析纯化和凝胶过滤层析,用SUMO蛋白酶切除SUMO标签,再用镍柱纯化获得了高纯度的NtGT5重组蛋白.

著录项

  • 来源
    《烟草科技》 |2014年第7期|69-7484|共7页
  • 作者单位

    贵州省烟草科学研究院;

    烟草行业烟草分子遗传重点实验室;

    贵州省观山湖区龙滩坝路29号 550081;

    川北医学院附属医院;

    医学研究中心;

    四川省南充市顺庆区文化路63号 637000;

    川北医学院基础医学院生物学教研室;

    四川省南充市顺庆区涪江路234号 637000;

    贵州省烟草科学研究院;

    烟草行业烟草分子遗传重点实验室;

    贵州省观山湖区龙滩坝路29号 550081;

    贵州省烟草科学研究院;

    烟草行业烟草分子遗传重点实验室;

    贵州省观山湖区龙滩坝路29号 550081;

    贵州省烟草科学研究院;

    烟草行业烟草分子遗传重点实验室;

    贵州省观山湖区龙滩坝路29号 550081;

    贵州省烟草科学研究院;

    烟草行业烟草分子遗传重点实验室;

    贵州省观山湖区龙滩坝路29号 550081;

    贵州省烟草科学研究院;

    烟草行业烟草分子遗传重点实验室;

    贵州省观山湖区龙滩坝路29号 550081;

    贵州省烟草科学研究院;

    烟草行业烟草分子遗传重点实验室;

    贵州省观山湖区龙滩坝路29号 550081;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 TS413;
  • 关键词

    烟草; 糖基转移酶; 基因; 蛋白酶;

相似文献

  • 中文文献
  • 外文文献
  • 专利
获取原文

客服邮箱:kefu@zhangqiaokeyan.com

京公网安备:11010802029741号 ICP备案号:京ICP备15016152号-6 六维联合信息科技 (北京) 有限公司©版权所有
  • 客服微信

  • 服务号