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短链脂肪酸的梯度高效液相色谱法分析研究

         
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目的:探讨测定甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、琥珀酸、戊酸、乳酸的分离条件,为检测细菌终末代谢酸奠定基础.方法:采用反相梯度高效液相色谱技术对同时分离7种短链脂肪酸所需的检测波长、流动相及梯度洗脱程序等条件进行研究.结果:高效液相色谱技术在流速1.0～2.0 ml/min,检测波长217 nm,流动相为60% 0.2 mol/L磷酸盐甲醇溶液pH 2.8的条件下,采用线性梯度洗脱,能同时分离甲酸、乳酸、乙酸、琥珀酸、丙酸、丁酸、戊酸,其保留时间分别为:3.54、4.31、4.61、5.82、6.50、14.72、24.75 min.此方法的相对标准差(RSD)为1.8%,平均回收率为92%,重复性变异系数小于4%.结论:反相梯度高效液相色谱技术可测定同一标本中的乳酸、甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、琥珀酸、戊酸7种短链脂肪酸,这一结果为测定细菌终末代谢酸提供了重要的手段.

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