利用EBV转化人类外周血B淋巴细胞获得永生化细胞株保存人类全基因组

韦勇

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人类外周血 B 淋巴细胞可以被 ebv 在适当的体外环境中转化成具有永生化特征的 lcl。保存了各人的完整基因组，且其生化和分子生物学特征不发生变化。环孢霉素 a 法是建立珍贵样本的 lcl 的首选方法。采血12到36小时分离转化 B 淋巴细胞，转化液中添加 cysa、pha，控制转化时细胞数量在10/ml 数量级有助于提高建株率。37℃5%二氧化碳恒温培养，及时添加新鲜的rPMi 1648培养液以及全程无菌操作防止细菌真菌污染至关重要。慢冻迅速升温是冻存、复苏的关键。原代和继代之间 G 条带分析、核型对比、对常见变异位点应用 Pcr 进行质控有助于发现 lcl 的细胞变异。

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来源
《世界最新医学信息文摘（电子版）》 |2013年第29期|158-159170|共3页
作者
韦勇;
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作者单位

广西区江滨医院检验科;

广西南宁 530021;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类实验室诊断;
关键词
eBV转化; B淋巴细胞; lcl;

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