牛脑钙调素的分离纯化、鉴定及其免疫原制备

周旋; 包晓玮; 马生军; 曹锐; 夏圣宝; 王颖

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牛脑钙调素的分离纯化、鉴定及其免疫原制备

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[目的]从牛脑中分离纯化钙调素(CaM),并进行生化鉴定,同时用碳二亚胺法制备CaM偶联免疫原.[方法]以phenyl-Sepharose层析法从牛脑中分离纯化CaM,用PDE法检测其活性,以SDS-PAGE、PAGE检测其分子量并观察CaM有无Ca~(2+)结合时的电泳行为,检测其紫外扫描光谱,同时用交联剂碳二亚胺制备CaM偶联抗原进行动物免疫,并用间接Elisa法检测动物血清免疫效价.[结果]纯化后的CaM对PDE有明显的激活作用,电泳结果显示为均一条带,分子量约为17.3 kDa,在SDS-PAGE中,CaM结合Ca~(2+)时比未结合Ca2+时迁移率快;而在PAGE中,迁移率在结合Ca~(2+)比未结合Ca~(2+)时慢;紫外光谱扫描显示约在251、260、267、272 和283 nm有5个吸收峰,动物血清免疫效价为1∶800.[结论]用phenyl-Sepharose层析法纯化CaM和用碳二亚胺法制备CaM偶联抗原是成功的.

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来源
《新疆农业科学》 |2009年第6期|1322-1326|共5页
作者
周旋; 包晓玮; 马生军; 曹锐; 夏圣宝; 王颖;
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作者单位

新疆农业大学药学院;

乌鲁木齐;

830052;

新疆农业大学药学院;

乌鲁木齐;

830052;

新疆农业大学药学院;

乌鲁木齐;

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乌鲁木齐;

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新疆农业大学药学院;

乌鲁木齐;

830052;

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乌鲁木齐;

830052;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类家畜产品及其综合利用;
关键词
CaM; phenyl-Sepharose; 碳二亚胺; 免疫原;

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