TAT-E4orf4融合蛋白对胃癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响

殷洁烽; 徐统球; 张喆; 孙元水

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TAT-E4orf4融合蛋白对胃癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响

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目的分析TAT-E4orf4融合蛋白对胃癌AGS细胞凋亡的影响及其作用机制.方法 PCR法构建pET28-his-TAT-E4orf4表达载体,经PCR酶切鉴定后,诱导表达.并分别用pET28、pET28-his-E4orf4和pET28-his-TAT-E4orf4处理胃癌AGS细胞,分别采用MTT法和Transwell小室检测TAT-E4orf4对胃癌细胞增殖和迁移的影响,以流式细胞仪检测刺激后胃癌细胞的凋亡,以Western blot检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspases)和酪氨酸激酶(Src)信号轴上关键蛋白表达的变化.结果 PCR和Western blot实验结果证实成功构建pET28-TAT-E4orf4表达载体,MTT法显示pET28-his-E4orf4和pET28-his-TAT-E4orf4刺激后,胃癌AGS细胞增殖活性较空白对照组(1.01±0.12)分别下降至(0.69±0.44)和(0.41±0.06),且后者下降更为明显(P0.05),而Src-ERK-AKT信号轴相关蛋白的表达在TAT-E4orf4融合蛋白干预后出现明显下调,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 TAT-E4orf4融合蛋白能抑制胃癌细胞增殖和迁移,促进胃癌细胞凋亡,与Caspase途径无关,主要依赖对Src-ERK-AKT信号通路的调控.

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来源
《浙江中西医结合杂志》 |2021年第2期|111-115124|共6页
作者
殷洁烽; 徐统球; 张喆; 孙元水;
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作者单位

浙江省立同德医院普外科杭州310012;

浙江省仙居县中医院肛肠外科台州 317300;

浙江省立同德医院普外科杭州310012;

浙江省立同德医院普外科杭州310012;

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正文语种 chi
中图分类
关键词
胃癌; 凋亡; 细胞穿膜肽; 腺病毒早期区4第4编码蛋白; 迁移;

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