钠-氢交换蛋白调节细胞内环境酸化并激活肝癌细胞焦亡的作用及相关机制

顾艳玲; 王瑾; 李文燕; 盛泳佳; 韩晨阳

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钠-氢交换蛋白调节细胞内环境酸化并激活肝癌细胞焦亡的作用及相关机制

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目的探讨钠-氢交换蛋白1(NHE1)调节细胞内环境酸化并激活肝癌细胞焦亡的作用及相关机制.方法采用Western blot和RT-qPCR法检测4株肝癌细胞中NHE1蛋白及mRNA表达水平,选出表达最高的MHCC97细胞株进行实验.小干扰RNA(siRNA)技术沉默MHCC97细胞中NHE1,将常规培养的MHCC97细胞作分为对照组、NHE1无关对照的序列转染的细胞作为siRNA-NC组、NHE1转染的细胞株作为siRNA-NHE1组,检测3组细胞活性,细胞凋亡情况,细胞中半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、炎性小体(NLRP3)、消皮素D(GSDMD)表达水平,培养基中IL-1β、IL-18水平以及细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出水平,观察NHE1沉默对细胞焦亡的影响.另取NHE1沉默后细胞设立NHE1沉默组和Caspase-1抑制组(用Caspase-1抑制剂AC-YVAD-CMK干预),观察阻断Caspase-1对细胞焦亡的影响.结果 NHE1沉默后的MHCC97细胞活性下降(P<0.05),凋亡增多;细胞Caspase-1、NLRP3表达水平,培养基IL-1β、IL-18水平及LDH漏出水平升高,GSDMD表达水平降低,差异均有统计学意义(均P<0.05).阻断Caspase-1后细胞活性增强(P<0.05),凋亡减少;细胞Caspase-1、NLRP3表达水平,培养基IL-1β、IL-18水平及LDH漏出水平降低,GSDMD表达水平升高,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 NHE1沉默会造成细胞内酸化,同时激活细胞焦亡,这是NHE1在肝癌中的作用机制之一;阻断Caspase-1可以抑制细胞焦亡.

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来源
《浙江医学》 |2020年第13期|1354-13581363后插2|共7页
作者
顾艳玲; 王瑾; 李文燕; 盛泳佳; 韩晨阳;
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作者单位

314001 嘉兴市第二医院药学部;

314001 嘉兴市第二医院药学部;

314001 嘉兴市第二医院药学部;

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正文语种 chi
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关键词
钠-氢交换蛋白; 肝癌; 细胞焦亡; 酸碱度;

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