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霍乱弧菌小川型在人胆汁中存活和变异及其血清型别转换的分子生物学研究

         

摘要

目的追踪观察霍乱弧菌小川型流行株在离体人胆汁样本中的存活和L型变异状况;探索小川型在其抗体作用下对转换为稻叶型的发生频度和对Ctx基因的影响.方法对保存染菌胆汁样本进行细菌和L型测数、鉴定.以抗体软琼脂法诱导血清型别转换;以蔗糖半固体平板检测细菌趋化性.用PCR和测序法比较转型前后的肠毒素基因改变.结果在2份染菌人胆汁中,发现1份存活达22年,其总菌数为2.5×103个/ml,其中L型构成比为32%.3株小川型流行株在人胆汁及抗体作用下,转换为稻叶型发生频度为2%~ 6%;酶切电泳显示转型前后其Ctx基因图型相似,经CtxAB测序后,差异≤7Nt(7/1226),显示有一定的变异.3株转型前后细菌的化学趋化性未见显著改变.结论为霍乱弧菌在某些患者胆囊中长期存活而成为慢性带菌者提供了实验依据.为阐明霍乱弧菌可在患者体内发生血清型别转换充实了科学数据.

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