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首页> 外文期刊>Canadian Journal of Physiology and Pharmacology >Altered PKC expression and phosphorylation in response to the nature, direction, and magnitude of mechanical stretch
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Altered PKC expression and phosphorylation in response to the nature, direction, and magnitude of mechanical stretch

机译：响应于机械拉伸的性质，方向和大小，PKC表达和磷酸化改变

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Protein kinase C (PKC) isozymes have been shown to play a role in mechanotransduction in a variety of cell types. We sought to identify the PKC isozymes involved in transducing mechanical (cyclic vs. static), direction and intensity of stretch by examining changes in protein expression and phosphorylation. We used a 3-dimensional culture system with aligned neonatal rat cardiac myocytes on silastic membranes. Myocytes were subjected to either cyclic stretch at 5 cycles/min or static stretch for a period of 24 h at intensities of 0%, 2.5%, 5%, or 10% of full membrane length. Stretch was applied in perpendicular or parallel directions to myocyte alignment. PKC δ was most sensitive to stretch applied perpendicular to myocyte alignment regardless of the nature of stretch, while phospho PKC δ T505 increased in response to static-perpendicular stretch. PKC ε expression was altered by cyclic stretch but not static stretch, while phospho PKC ε S719 remained unchanged. PKC α expression was not altered by stretch; however, phospho PKC α S657 increased in a dose-dependent manner following cyclic-perpendicular stretch. Our results indicate that changes in PKC expression and phosphorylation state may be a mechanism for cardiac myocytes to discriminate between the nature, direction, and intensity of mechanical stretch.On a démontré que les isoenzymes de la protéine kinase C jouent un rôle dans la mécanotransduction de divers types de cellules. Nous avons eu pour but d'identifier les isozyme PKC participant à la transduction de la direction et de l'intensité de l'étirement mécanique (cyclique vs. statique), en examinant les modifications de l'expression et de la phosphorylation des protéines. Nous avons utilisé un système de culture tridimensionnel dans lequel les myocytes cardiaques de rats néonatals sont alignés sur des membranes en silastique. Nous avons soumis les myocytes à un étirement cyclique à raison de 5 cycles/min ou à un étirement statique pendant une période de 24 h à des intensités de 0 %, 2,5 %, 5 % ou 10 % de la longueur totale de la membrane. Nous avons appliqué l'étirement dans des directions perpendiculaires ou parallèles à l'alignement des myocytes. La PKC δ a été très sensible à l'étirement appliqué perpendiculairement à l'alignement des myocytes, sans égard à la nature de l'étirement; la phospho PKC δ T505 a augmenté en réponse à l'étirement perpendiculaire statique. L'expression de la PKC ε a été modifiée par l'étirement cyclique mais pas par l'étirement statique; la phospho PKC ε S719 est demeurée inchangée. L'expression de la PKC α n'a pas été modifiée par l'étirement; toutefois, la phospho PKC α S657 a augmenté de manière dose-dépendante après l'étirement perpendiculaire cyclique. Nos résultats indiquent que les modifications de l'expression et de l'état de phosphorylation des PKC pourraient être un mécanisme permettant aux myocytes cardiaques de différencier la nature, la direction et l'intensité de l'étirement mécanique.
机译：蛋白激酶C（PKC）同工酶已显示在多种细胞类型的机械转导中起作用。我们试图通过检查蛋白质表达和磷酸化的变化来鉴定涉及转导机械（环状与静态），拉伸方向和强度的PKC同工酶。我们使用3维培养系统，将新生大鼠心肌细胞排列在硅质膜上。心肌细胞以5个循环/分钟的周期拉伸或静态拉伸以全膜长度的0％，2.5％，5％或10％的强度进行24小时。在垂直或平行方向上对肌细胞排列进行拉伸。无论拉伸的性质如何，PKCδ对垂直于心肌细胞排列施加的拉伸最敏感，而磷PKCδT505响应于静态垂直拉伸而增加。 PKCε的表达被循环拉伸改变而不是静态拉伸，而磷酸PKCεS719保持不变。 PKCα的表达并没有改变。然而，磷酸化PKCαS657在周期垂直伸展后呈剂量依赖性增加。我们的研究结果表明，PKC表达和磷酸化状态的改变可能是心肌细胞区分机械牵张的性质，方向和强度的机制。在蛋白水解激酶上的同工酶上潜水员的类型。防止同工酶PKC参与者从方向性和强度方面进行了转导（循环与统计），对表达和蛋白化进行了修饰。普通培养动物三元性心肌细胞膜心肌干细胞的成年期。 5分钟/分钟的静止状态下的永久性单质性心肌细胞0分钟，2.5分钟，5分钟或10％时长总强度的非静态状态膜。心肌细胞的平行或平行方向的适切性PKCδ合理的垂直贴花，肌细胞排列，无自然界的正常化；磷酸PKCδT505增强了永久性医疗许可条例。 PKC表达式修正案磷酸PKCεS719估计是不变的。修改后的PKC表达式； toutefois，磷酸PKCαS657增强了周期性剂量的人体药剂量。否对表达和等位基因磷酸化修饰的PKC进行了多方面的修改，包括天然，不同方向和不同强度的心肌细胞。

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