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Immunofluorescence revealed the presence of NHE-1 in the nuclear membranes of rat cardiomyocytes and isolated nuclei of human, rabbit, and rat aortic and liver tissues

机译:免疫荧光显示大鼠心肌细胞核膜中存在NHE-1以及人,兔以及大鼠主动脉和肝脏组织的分离核

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摘要

Using immunofluorescence and 3-dimensional confocal microscopy techniques, the present study was designed to verify if NHE-1 is present at the level of the nuclear membrane in cells that are known to express this type of exchanger. Nuclei were isolated from aortic tissues of adult human, rabbit, and rats, as well as from liver tissues of human fetus, and adult rabbit and rat. In addition, cultured ventricular cardiomyocytes were isolated from 2-week-old rat. Our results showed the presence of NHE-1 in isolated nuclei of aortic vascular smooth muscle and liver of human, rabbit, and rat. NHE-1 seems to be distributed throughout the isolated nucleus and more particularly at the level of the nuclear membranes. The relative fluorescence density of NHE-1 was significantly higher (p < 0.05) in isolated liver nuclei of human, when compared with those of rabbit and rat. However, in isolated nuclei of aortic vascular smooth muscle, the relative fluorescence density of NHE-1 was significantly (p < 0.001) higher in the rabbit when compared with human and rat. In cultured rat ventricular cardiomyocytes, NHE-1 fluorescent labeling could be easily seen throughout the cell, including the nucleus, and more particularly at both the sarcolemma and the nuclear membranes. In rat cardiomyocytes, the relative fluorescence density of NHE-1 of the sarcolemma membrane, including the cytosol, was significantly lower than that of the whole nucleus (including the nuclear envelope membranes). In conclusion, our results showed that NHE-1 is present at the nuclear membranes and in the nucleoplasm and its distribution and density may depend on cell type and species used. These results suggest that nuclear membranes' NHE-1 may play a role in the modulation of intranuclear pH.Key words: NHE-1, heart, aorta, liver, nuclear membranes, nucleus.La présente étude a été conçue pour vérifier la présence de NHE-1 au niveau des membranes nucléaires des cellules qui sont connues pour exprimer ce type d'échangeur. Pour ce faire, nous avons utilisé les techniques de microscopie confocale tridimensionnelle et d'immunofluorescence. Les noyaux ont été isolés des tissus aortiques d'humains, de lapins et de rats adultes ainsi que des tissus hépatiques de ftus humains, de rats et de lapins adultes. De plus, des cardiomyocytes ventriculaires cultivés de rats âgés de 2 semaines ont été isolés. Nos résultats ont montré la présence de NHE-1 dans les noyaux isolés du muscle lisse vasculaire aortique et du foie des humains, des lapins et des rats. NHE-1 semble être distribué dans tout le noyau isolé et plus particulièrement au niveau des membranes nucléaires. Dans les noyaux hépatiques isolés, la densité de fluorescence relative de NHE-1 a été significativement plus élevée (p < 0,05) chez les humains que chez les lapins et les rats. Toutefois, dans les noyaux isolés du muscle lisse aortique, elle a été significativement plus élevée (p < 0,001) chez les lapins. Dans les cardiomyocytes ventriculaires cultivés de rats, le marquage fluorescent de NHE-1 a pu être observé dans toute la cellule, incluant le noyau, et plus particulièrement au niveau des membranes sarcolemmiques et nucléaires. Dans les cardiomyocytes de rats, la densité fluorescente relative de NHE-1 au niveau de la membrane sarcolemmique, incluant le cytosol, a été significativement plus faible que celle du noyau entier (incluant les membranes nucléaires). En conclusion, nos résultats ont montré que NHE-1 était présent au niveau des membranes nucléaires et dans le nucléoplasme, et que sa distribution et sa densité pourraient dépendre du type de cellules et de l'espèce utilisée. Ces résultats donnent à penser que le NHE-1 des membranes nucléaires pourrait jouer un rôle dans la modulation du pH intranucléaire. Mots clés : NHE-1, cur, aorte, foie, membranes nucléaires, noyau.[Traduit par la Rédaction]
机译:使用免疫荧光和3维共聚焦显微镜技术,本研究旨在验证NHE-1是否存在于已知表达此类交换子的细胞的核膜水平上。从成年人,兔和大鼠的主动脉组织,以及人胎儿,成年兔和大鼠的肝组织中分离出细胞核。另外,从2周龄的大鼠分离培养的心室心肌细胞。我们的研究结果表明,人,兔和大鼠的主动脉血管平滑肌和肝脏的分离核中均存在NHE-1。 NHE-1似乎分布在整个分离的核中,尤其是在核膜水平上。与兔和大鼠相比,人离体肝核中NHE-1的相对荧光密度显着更高(p <0.05)。然而,在主动脉血管平滑肌的分离核中,与人和大鼠相比,兔中NHE-1的相对荧光密度显着更高(p <0.001)。在培养的大鼠心室心肌细胞中,可以很容易地在整个细胞(包括细胞核),尤其是在肌膜和核膜上看到NHE-1荧光标记。在大鼠心肌细胞中,包括细胞质在内的肌膜膜NHE-1的相对荧光密度显着低于整个细胞核(包括核被膜)。总之,我们的结果表明NHE-1存在于核膜和核质中,其分布和密度可能取决于所用细胞的类型和种类。这些结果表明核膜的NHE-1可能在核内pH的调节中发挥作用。关键词:NHE-1,心脏,主动脉,肝脏,核膜,细胞核.ppésétepévérélaprésencedepésené NHE-1型连续性细胞膜,可直接注入d'échangeur型底漆。倒入微孔显微镜,共聚焦显微镜和免疫荧光技术。成年人的成年鼠,成人成年鼠和成人成年鼠成年鼠。另外,大鼠的2型心肌细胞脑室隔离。 NHE-1上的肌肉无刺激性,肌肉萎缩的血管,人的主动脉,lapins和des大鼠都没有。 NHE-1外观和外观均符合国家标准,并附有特殊的膜状核素。 NHE-1的荧光相对密度,n荧光标记为NHE-1的显着性,加上elevée(p <0,05)的老鼠和老鼠。图特瓦伊斯,丹尼尔·莱斯·诺瓦·伊索莱·迪奥·莱索·阿尔泰克,《法国人》和《西班牙舞曲》(p <0,001)。鼠类心肌细胞培养物,NHE-1荧光粉观察细胞,囊中的noyau等,以及核膜和颗粒的特殊化。鼠类心肌细胞,NHE-1膜亲密性荧光粉,包容性细胞溶质,有意义的含义以及有益的新细胞(包容性核仁)。总结而言,在NHE-1上没有以核膜和核膜为代表的新型膜,无论是在膜上的分布还是在密度上都具有很好的实用性。在pH值内核的NHE-1膜上的核不合格。主题:NHE-1,cur,aorte,鹅肝,核膜,noyau。[Traduit par laRédaction]

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