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首页> 外文期刊>Epigenetics & Chromatin >Locus-specific biochemical epigenetics/chromatin biochemistry by insertional chromatin immnoprecipitation (iChIP)
【24h】

Locus-specific biochemical epigenetics/chromatin biochemistry by insertional chromatin immnoprecipitation (iChIP)

机译：通过插入染色质免疫沉淀（iChIP）进行的特定位点生化表观遗传学/染色质生化

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Comprehensive understanding of mechanisms of epigeneticregulation requires identification of molecules boundto genomic regions of interest in vivo. However, nonbiasedmethods to identify molecules bound to specificgenomic loci in vivo are limited. To perform biochemicaland molecular biological analysis of specific genomicregions, we developed the insertional chromatin immunoprecipitation(iChIP) technology to purify the genomicregions of interest [1]. The scheme of iChIP is as follows:(i) A repeat of the recognition sequence of an exogenousDNA-binding protein such as LexA is inserted intothe genomic region of interest in the cell to be analyzed.(ii) The DNA-binding domain (DNA DB) of the exogenousDNA-binding protein is fused with a tag(s) and anuclear localization signal(s) and expressed into the cellto be analyzed.
机译：对表观遗传调控机制的全面理解要求鉴定体内结合至目的基因组区域的分子。但是，用于鉴定与体内特定基因组位点结合的分子的无偏方法是有限的。为了进行特定基因组区域的生化和分子生物学分析，我们开发了插入染色质免疫沉淀（iChIP）技术来纯化目标基因组区域[1]。 iChIP的方案如下：（i）将外源DNA结合蛋白（例如LexA）的识别序列重复插入待分析细胞的目标基因组区域。（ii）DNA结合域（DNA外源DNA结合蛋白的DB）与标签和核定位信号融合，并表达到待分析的细胞中。

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