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【24h】

Analyse der DNA Stabilit?t bei Miniorgankulturen unter dem Einfluss von Refluxbestandteilen

机译:回流成分影响下微器官培养物中DNA稳定性的分析

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摘要

Zusammenfassung Einleitung: Epidemiologische Studien weisen darauf hin, dass laryngopharyngealer Reflux als Risikofaktor für die Entstehung von Larynx bzw. Hypopharynxkarzinomen wirken kann. Hierbei scheinen sowohl saure als auch bili?re Refluxbestandteile in unterschiedlichem Ausma? eine Rolle zu spielen. In unterschiedlichen in vitro Modellen wurde der Einfluss einzelner Refluxatbestandteile auf die DNA Stabilit?t ausgewachsener Epithelzellen (EpC) und Miniorgankulturen (MOC) untersucht.Methoden: Epithelzellkulturen und Miniorgankulturen mit nativem und künstlichem Magensaft bei pH 3; 4,5; 5,5; 6,5 sowie Pepsin und Gallensalzen in unterschiedlichen Konzentrationen inkubiert und anschlie?end mithilfe der Comet Assay die DNA-Sch?digung in Form von Einzelstrangbrüchen, alkalilabilen Stellen und inkompletter Exzisionsreparatur als Olive Tail Moment (OTM) quantifiziert.Ergebnisse: Sowohl nativer als auch artifizieller Magensaft verursachen DNA-Strangbrüche. Mit sinkendem pH-Wert wurden steigende OTM-Werte gefunden. Die st?rkste DNA-Fragmentierung war nach Inkubation mit nativem Magensaft messbar. Nach Analyse der Refluxatbestandteile zeigte Pepsin das gr??te Sch?digungspotential, gefolgt von Gallensalzen. Nach Hitzeinaktivierung des Enzyms, waren die Werte mit der pH-Kontrolle identisch. MOCs und EpC zeigten das gleiche Sch?digungsmuster.Schlussfolgerungen: Im in vitro Modell konnte mithilfe des Comet Assays der unterschiedliche Einfluss von Pepsin und Gallens?uren auf die DNA-Stabilit?t nachgewiesen werden. Die genauen Mechanismen sind dabei noch ungekl?rt und sollten in weiterführenden Studien untersucht werden.Unterstützt durch: BMBF FKZ 17/30
机译:简介:流行病学研究表明,喉咽反流可能是喉或下咽癌发展的危险因素。在此,酸性和胆汁反流成分的大小似乎不同。发挥作用。在各种体外模型中研究了单个回流成分对成年上皮细胞(EpC)和小器官培养物(MOC)DNA稳定性的影响。 4.5; 5.5;将6.5以及胃蛋白酶和胆汁盐以不同浓度孵育,然后在彗星试验的帮助下,以单链断裂,碱不稳定位点和不完全切除修复的形式对DNA损伤定量为Olive Tail Moment(OTM)。人造胃液会导致DNA链断裂。发现pH值降低时OTM值升高。与天然胃液一起孵育后,可以测量到最强的DNA片段。分析回流成分后,胃蛋白酶显示出最大的危害潜力,其次是胆盐。酶热灭活后,该值与pH控制相同。结论:在体外模型中,彗星试验用于证明胃蛋白酶和胆汁酸对DNA稳定性的不同影响。确切的机制尚不清楚,应进一步研究进一步研究:BMBF FKZ 17/30

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