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Visualisation de l'expression d'un gène: la stratégie antisens

机译：基因表达的可视化：反义策略

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L'utilisation d'oligonucléotides antisens radiomarquéspour cibler les ARNm est une méthode très prometteuse d'étude de l'expression génique in vivo. Cette méthode d'imagerie moléculaire a pour but de mettre en évidence des modifications cellulaires à des stades précoces des maladies, par hybridation de l'oligonuclétotide antisens avec les ARNm cytoplasmiques. Depuis une décennie, les études publiées d'imagerie tumorale spécifique in vivo par des oligonucléotides antisens sont peu nombreuses, du fait des nombreuses barrières biologiques. En effet, les oligonucléotides dont la séquence est spécifique d'un gène donné vont devoir être modifiés chimiquement pour accroître leur résistance aux nucléases et permettre leur marquage avec un radio-nucléide. Pour être utilisé comme agent radiopharmaceutique, un bon oligonucléotide antisens radiomarqué devra être stable in vivo, pouvoir franchir la membrane cellulaire et avoir une cinétique de fixation durable et dépendante du niveau d'expression du gène. Ces difficultés ne sont pas insurmontables et vont être illustrées à partir de notre expérience sur l'imagerie de la chimio-résistance avec des oligonucléotides antisens ciblant h-mdr1, in vitro et in vivo.%Using radiolabelled antisense oligonucleotides to target mRNAs is a very promising method to study gene expression in vivo. This molecular imaging technique has the aim to identify cellular modifications in a very early stage of disease. During the last ten years, the number of published studies concerning in vivo tumor specific imaging is small. This fact depends on numerous biological challenges. In fact, gene specific oligonucleotides must be chemically modified to increase nuclease resistance and permit labelling with radionuclide. To be used as imaging radiopharmaceutical agent, a good antisense oligonucleotide need to valid a lot of steps : in vivo stability, cell membrane passage and durable hybridisation to mRNA to obtain a kinetic which depends directly on gene expression level. We can get over these difficulties, we will illustrate with our experience on chemoresistance imaging with antisense oligonucleotides which target h-mdr1, in vitro and in vivo.
机译：使用放射性标记的反义寡核苷酸靶向mRNA是研究体内基因表达的非常有前途的方法。该分子成像方法的目的是通过反义寡核苷酸与细胞质mRNA的杂交来证明疾病早期的细胞修饰。十年来，由于许多生物学障碍，很少有已发表的研究使用反义寡核苷酸体内特异性肿瘤成像的研究。实际上，对于给定基因具有序列特异性的寡核苷酸必须进行化学修饰以增加其对核酸酶的抗性并允许其用放射性核素标记。要用作放射性药物，好的放射性标记的反义寡核苷酸必须在体内稳定，能够穿过细胞膜并具有持久的结合动力学，这取决于基因的表达水平。这些困难并非无法克服，将通过我们在体外和体内用靶向h-mdr1的反义寡核苷酸对化学耐药性成像的经验加以说明。％使用放射性标记的反义寡核苷酸靶向mRNA研究体内基因表达的有前途的方法。这种分子成像技术的目的是在疾病的早期阶段鉴定细胞的修饰。在最近十年中，关于体内肿瘤特异性成像的已发表研究数量很少。这个事实取决于许多生物学挑战。实际上，必须对基因特异性寡核苷酸进行化学修饰以增加核酸酶的抗性并允许使用放射性核素进行标记。一个好的反义寡核苷酸要用作成像放射药物，需要验证许多步骤：体内稳定性，细胞膜通过和与mRNA的持久杂交以获得直接取决于基因表达水平的动力学。我们可以克服这些困难，我们将利用我们在体外和体内靶向h-mdr1的反义寡核苷酸的化学抗性成像经验来说明。

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