摘要：目的:研究DEHP对细胞的氧化损伤作用以及对相关基因表达水平的影响,探讨3β-羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)在其中起的作用. 方法:分别采用浓度为0、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8mmol/L的DEHP对3β-HSD高表达细胞染毒24h,以MCF-7细胞为对照,测定细胞内氧化损伤指标MDA、SOD、GSH、GSH-PX的变化,检测DNA损伤基因hOGG1、hMTH1在基因及蛋白表达水平的改变. 结果:两种细胞经不同剂量DEHP染毒后,MCF-7细胞中,与对照组比较MDA含量升高35％～174％,SOD活力降低的13％～24％,GSH含量降低20％～48％,GSH-PX活力降低18％～72％;与同染毒剂量组的MCF-7细胞比较,3β-HSD高表达细胞中MDA含量降10％～22％,SOD活力升高10％～12％,GSH含量升高19％～25％,GSH-PX活力升高15％～19％.实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果显示,与对照组比较MCF-7细胞中hOGG1基因表达水平上调1.33～2.68倍,hMTH1基因表达水平上调1.21～2.29倍;与同染毒剂量组的MCF-7细胞比较,3β-HSD高表达细胞中hOGG1基因表达水平上调1.17～1.52倍、hMTH1基因表达水平上调1.22～1.30倍,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).蛋白免疫印迹法(western blot)实验显示,与对照组比较MCF-7细胞中hOGG1蛋白表达水平上调1.17～1.58倍,hMTH1蛋白表达水平上调1.36～1.39倍;与同染毒剂量组的MCF-7细胞比较,3β-HSD高表达细胞hOGG1蛋白相对表达水平上调1.13～1.21倍,hMTH1蛋白相对表达水平上调1.16～1.23倍,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01). 结论:DEHP可引起细胞发生氧化损伤,诱导相关基因及蛋白发生改变;3β-HSD基因高表达可增强细胞抗氧化酶活力,提高了细胞的抗氧化能力.
