首页>
外文期刊>Биоорганическая химия
>ТЕХНОЛОГИЧНЫЙ МЕТОД ВЫДЕЛЕНИЯ α-ФЕТОПРОТЕИНА ЧЕЛОВЕКА. ОЦЕНКА СТАТУСА СВОБОДНЫХ СУЛЬФГИДРИЛЬНЫХ И АМИНОГРУПП В ОЧИЩЕННОМ ПРЕПАРАТЕ
【24h】
ТЕХНОЛОГИЧНЫЙ МЕТОД ВЫДЕЛЕНИЯ α-ФЕТОПРОТЕИНА ЧЕЛОВЕКА. ОЦЕНКА СТАТУСА СВОБОДНЫХ СУЛЬФГИДРИЛЬНЫХ И АМИНОГРУПП В ОЧИЩЕННОМ ПРЕПАРАТЕ
Описан новый технологичный метод выделения α-фетопротеина человека (АФП) из сыворотки крови пуповины человека. Метод включает осаждениевысокомолекулярных соединений полиэти-ленгликолем, аффинную, ионообменную и гель-проникающую хроматографию и позволяет проводить быстрое (48 ч) препаративное выделение индивидуального белка с высоким выходом (до нескольких десятков миллиграмм за цикл) и сохранением нативной структуры (данные иммунохимического анализа). Показано, что в очищенном АФП отсутствуют доступные свободные сульфгидрильные группы; восстановление АФП дитиотреитом цри 4°С приводит к образованию двух сульфгидриль-ных групп, предположительно принадлежащих остаткам Cys в положениях 18 и 67 домена I молекулы белка. В полученном белке для модификации в мягких условиях N-оксисукцинимидным эфиром 3-(2-пиридилдитио)пропионовой кислоты доступны до 10 свободных аминогрупп.
展开▼
