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【24h】

混合糞便からの直接PCRによる食中毒菌核酸検査に向けた検討

机译:通过直接PCR检测混合粪便中的食物中毒细菌核酸测试

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摘要

混合糞便検体からの直接PCRで食中毒3菌種(ベロ毒素産生菌,サルモネラ属菌,赤痢菌)の同時検出 を試みた.蒸留水で約2,5%の濃度に調製した検便懸濁液を95°C5分間熱処理した後の遠心上清5muLを45muLのPCR master mixtureに添加してPCRを実施し,MCA (Melting Curve Analysis)で検出した.その結果.50混合糞便検体に混入させた1つの食中毒菌陽性翼便を個別培養法と同等の検出感度で検出すること ができた.本方法は大量の糞便検体から迅速,確実,さらに感度良く腸管系病原菌検出が行える方法である ので,食品取り扱い従事者からの検便検査など一度に大量の検体を処理しなければならない検査においては極めて有用な方法と考えられた.
机译:通过直接PCR从混合粪便样品中同时检测3种食物中毒菌株(产生维毒素的细菌,沙门氏菌和腹泻),制备了用蒸馏水制备浓度约为2.5%的粪便测试悬浮液。在95°C热处理5分钟后,将5μL离心上清液加入到45μLPCR主混合物中,并通过MCA(熔融曲线分析)进行PCR检测,结果将其混合在50个粪便样品中。我们能够以与单个培养方法相同的检测灵敏度来检测食物中毒细菌阳性的翼状粪便,该方法可以从大量粪便样本中快速,可靠且灵敏地检测肠道病原体。对于需要一次处理大量样品的测试(例如来自工人的粪便测试),这被认为是一种非常有用的方法。

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