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Live-Cell Imaging and Analysis withMultiple Genetically Encoded Reporters

机译:具有多种遗传编码记者的活细胞成像和分析

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摘要

Genetically encoded live-cell reporters measure signaling pathway activity atthe cellular level with high temporal resolution, often revealing a high degreeof cell-to-cell heterogeneity. By using multiple spectrally distinct reporterswithin the same cell, signal transmission from one node to another withina signaling pathway can be analyzed to quantify factors such as signalingefciency and delay. With other reporter congurations, correlation betweendifferent signaling pathways can be quantied. Such analyses can be used toestablish the mechanisms and consequences of cell-to-cell heterogeneity andcan inform new models of the functional properties of signaling pathways.In this unit, we describe an approach for designing and executing live-cellmultiplexed reporter experiments. We also describe approaches for analyzingthe resulting time-course data to quantify correlations and trends between themeasured parameters at the single-cell level.
机译:遗传编码的活小组记者测量具有高颞率的细胞水平的信号通路活性,通常揭示高度的细胞 - 细胞异质性。 通过使用多个频道不同的报道,可以分析来自一个节点到另一个内部信令路径的信号传输,以量化诸如信号通知和延迟的因素。 对于其他记者锥体,可以量化信号传导途径之间的相关性。 这种分析可以使用本机通知信令途径功能特性的新模型的这种分析。在本机中,我们描述了一种设计和执行活性细胞的报告实验的方法。 我们还描述了用于分析所产生的时间课程数据的方法,以量化单个小区级别的关键率参数之间的相关性和趋势。

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