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3.5A分解能でのギャップ結合チャネルの構造決定手順

机译:3.5A具有分辨率间隙耦合通道的通道结构确定程序

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摘要

膜タンパク質は,さまざまな局面において重要な役割を果たしている.その働きの仕組みを理解するためには構造が不可欠であるが,膜タンパク質の構造決定に至る道のりでいくつもの困難に遭遇するのが常である.この道程の中で最も大きな壁は結晶化である.しかし,結晶化に成功した後も結晶の回折能が不十分なために構造決定に何年もの歳月を要することは珍しいことではない.ギャップ結合チャネルでは,初めて21A分解能の回折数点を与える結晶を得た日から3年間かけて精製条件と結晶化条件を検討してきたが,その苦労と努力にもかかわらず7A分解能の回折点しか得られず原子モデル構築には至らなかった.そこで方法を少し変えて,脱水による分解能の改善を行うことによって3.5A分解能の回折を与える結晶を得た.この分解能でアミノ酸残基を同定する構造解析は容易ではない.本稿では分解能改善に至った精製の工夫と結晶の脱水操作,回折能の良くない結晶でのデータ収集の工夫そして低分解能での構造決定に焦点を当てて,構造決定までの手法を中心に述べる.ギャップ結合チャネルの構造と機能については別にまとめた.
机译:膜蛋白在各个方面发挥着重要作用。尽管结构对于了解工作系统至关重要,但总是始终遇到导致膜蛋白结构测定的路径中的许多困难。以这种方式最大的墙是结晶。然而,对于结构决定,需要几年的时间并不罕见,因为结晶成功后晶体衍射能力不足。在间隙组合通道中,从获得21A分辨率衍射点的晶体之后检查了三年的净化条件和结晶条件,但尽管他们困难和努力,但它没有获得7a分辨率衍射点,并且没有到达原子模型。因此,通过改变一点方法,通过改变由于脱水而改变分辨率而获得晶体。用这种分辨率鉴定氨基酸残基的结构分析并不容易。在本文中,我们将专注于确定具有纯化和晶体脱水操作,晶体脱水操作,晶体脱水操作和低分辨率的设计的结构决定的方法,并通过该方法描述了结构决策。。间隙耦合通道的结构和功能分别总结。

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