...
首页> 外文期刊>Физиология растений >ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПЛАЗМИДЫ pCTVHyg ДЛЯ ТРАНСФОРМАЦИИ КЛЕТОК МУТАНТА CW-I5 ЗЕЛЕНОЙ ВОДОРОСЛИ Chlamydomonas reinhardtii Dang.
【24h】

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПЛАЗМИДЫ pCTVHyg ДЛЯ ТРАНСФОРМАЦИИ КЛЕТОК МУТАНТА CW-I5 ЗЕЛЕНОЙ ВОДОРОСЛИ Chlamydomonas reinhardtii Dang.

机译:使用PCTVHYG质粒进行CW-I5突变体CW-I5衣原体Reinhardtiii Dang的转化。

获取原文
获取原文并翻译 | 示例
   

获取外文期刊封面封底 >>

       

摘要

Представлены результаты конструирования Плазмиды pCTVHyg одноклеточной зеленой водоросли Chlamydomonas reinhardtii Dang., с использованием в качестве селективного маркера гена hpt--ги-громицинфосфотрансферазы и транспозона Tn5 Escheruhia coli под промотором ранних генов вируса SV40. Клетки мутанта CW-15, не формирующего клеточной стенки, были трансформированы посредством электропорации при напряженности электрического поля 1 кВ/см и длительности импульса 2 мс. Оптимальные условия для трансформации наблюдались при плотности суспензии 10~6 клеток/мл в середине логарифмической фазы роста. При таких условиях можно получить до 10~3 Hyg~R-KnoHOB трансформантов на 10~6 реципиентных клеток, устойчивых к гигромицину. Экзогенная ДНК, интегрированная в геном ядра С/г. reinhardtii, стабильно наследовалась в течение, по крайней мере 8 мес, но устойчивость к гигромицину проявлялась как нестабильный признак. Результаты сравнительного анализа частот использования кодонов гена hpt и ядерных генов С/г, reinhardtii статистически достоверно дают основания полагать, что смещение использования кодонов. присущее этому организму, не является основным фактором,влияющим на экспрессию чужеродного гена, Обсуждаются преимущества использования мутанта CW-1.5 и данной селективной системы для изучения трансформации Си. reinhardtii гетерологичными генами.
机译:提出了构建质粒pCTVHYG单细胞生绿藻类衣原体Reinhardtii Dang的结果。,在SV40病毒早期基因的启动子下使用HPT-HPT-GOMOCINFOSPHET转移酶基因作为选择性标记和TN5 eScheruhia COLI转座子。 CW-15突变细胞,不形成细胞壁,通过电励磁强度为1kV / cm的电场强度和脉冲持续时间2ms转化。在生长的对数阶段中间的10〜6个细胞/ mL的悬浮密度下观察转化的最佳条件。在这种情况下,通过抵抗潮霉素的10〜6个受体细胞,可以获得高达10〜3型〜R-Knohob的转化体。将外源性DNA集成到C / G核基因中。 Reinhardtii,稳定继承至少8个月,但潮霉素抵抗表现为不稳定的标志。对HPT基因和核C / G基因的密码子的比较分析的结果,Reinhardtii统计上可靠地认为相信使用密码子使用。该体内固有的身体不是影响外源基因表达的主要因素,讨论使用CW-1.5突变体的益处和这种选择性系统研究Si的转化。 Reinhardtii异源基因。

著录项

相似文献

  • 外文文献
  • 中文文献
  • 专利
获取原文

客服邮箱:kefu@zhangqiaokeyan.com

京公网安备:11010802029741号 ICP备案号:京ICP备15016152号-6 六维联合信息科技 (北京) 有限公司©版权所有
  • 客服微信

  • 服务号