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首页> 外文期刊>Biochemical and Biophysical Research Communications >Gaussian FRET two-hybrid assays for determining the stoichiometry of hetero-oligomeric complexes in single living cells
【24h】

Gaussian FRET two-hybrid assays for determining the stoichiometry of hetero-oligomeric complexes in single living cells

机译：高斯FRET双杂化测定法测定单活细胞中杂寡聚复合物的化学计量

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Here we integrate multiple Gaussian-functions analysis into fluorescence resonance energy transfer (FRET) two-hybrid assays (Gaussian FRET two-hybrid assay) to determine the stoichiometric ratios of intracellular hetero-oligomers in single living cells. This method adopts in multiple Gaussian-functions to fit the E-count histograms of both donor- and acceptor-centric FRET efficiency (E_d and E_A) images of a single cell for obtaining the peak values (E_Di and E_Ai), thus yielding the corresponding stoichiometric ratios (E_Di and E_Ai) of intracellular hetero-oligomers. We performed Gaussian FRET two-hybrid assay for living Hela cells coexpressing different FRET tandem plasmids, and obtained consistent results with the expected values.
机译：在这里，我们将多个高斯函数分析整合到荧光共振能量转移（FRET）双杂合物测定（高斯FRET双杂合物测定）中，以确定单一活细胞中细胞内杂寡体的化学计量比。 该方法采用多个高斯函数，以适应单个单元的施主和受体的FRET效率（E_D和E_A）图像的电子计直方图，以获得峰值（E_DI和E_AI），从而产生相应的 细胞内杂寡体的化学计量比（E_DI和E_AI）。 我们对生活HeLa细胞进行高斯担心双杂化测定，共同呈现不同的FRET串联质粒，并获得了预期值的一致结果。

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