...
  • 主题
高级搜索  >
历史搜索 清空历史
首页> 外文期刊>Biochemistry >Cobalt hexammine inhibition of the hammerhead ribozyme.
【24h】

Cobalt hexammine inhibition of the hammerhead ribozyme.

机译：六甲基钴对锤头状核酶的抑制作用。

获取原文
获取原文并翻译 | 示例
           
页面导航
  • 摘要
  • 著录项
  • 相似文献
  • 相关主题

摘要

The effects of Co(NH(3))(6)(3+) on the hammerhead ribozyme are analyzed using several techniques, including activity measurements, electron paramagnetic resonance (EPR), and circular dichroism (CD) spectroscopies and thermal denaturation studies. Co(NH(3))(6)(3+) efficiently displaces Mn(2+) bound to the ribozyme with an apparent dissociation constant of K(d app) = 22 +/- 4.2 microM in 500 microM Mn(2+) (0.1 M NaCl). Displacement of Mn(2+) coincides with Co(NH(3))(6)(3+) inhibition of hammerhead activity in 500 microM Mn(2+), reducing the activity of the WT hammerhead by approximately 15-fold with an inhibition constant of K(i) = 30.9 +/- 2.3 microM. A residual 'slow' activity is observed in the presence of Co(NH(3))(6)(3+) and low concentrations of Mn(2+). Under these conditions, a single Mn(2+) ion remains bound and has a low-temperature EPR spectrum identical to that observed previously for the highest affinity Mn(2+) site in the hammerhead ribozyme in 1 M NaCl, tentatively attributed to the A9/G10.1 site [Morrissey, S. R. , Horton, T. E., and DeRose, V. J. (2000) J. Am. Chem. Soc. 122, 3473-3481]. Circular dichroism and thermal denaturation experiments also reveal structural effects that accompany the observed inhibition of cleavage and Mn(2+) displacement induced by addition of Co(NH(3))(6)(3+). Taken together, the data indicate that a high-affinity Co(NH(3))(6)(3+) site is responsible for significant inhibition accompanied by structural changes in the hammerhead ribozyme. In addition, the results support a model in which at least two types of metal sites, one of which requires inner-sphere coordination, support hammerhead activity.
机译：使用几种技术分析了Co（NH（3））（6）（3+）对锤头状核酶的影响，包括活性测量，电子顺磁共振（EPR）和圆二色性（CD）光谱学和热变性研究。 Co（NH（3））（6）（3+）有效地置换结合到核酶的Mn（2+），在500 microM Mn（2+）中的表观解离常数K（d app）= 22 +/- 4.2 microM ）（0.1 M NaCl）。 Mn（2+）的置换与Co（NH（3））（6）（3+）在500 microM Mn（2+）中抑制锤头活动相吻合，从而使WT锤头的活性降低了约15倍。 K（i）的抑制常数= 30.9 +/- 2.3 microM。在Co（NH（3））（6）（3+）和低浓度的Mn（2+）的存在下，观察到残留的“慢”活性。在这些条件下，单个Mn（2+）离子仍保持结合状态，其低温EPR谱与先前在1 M NaCl中锤头状核酶中亲和力最高的Mn（2+）位点观察到的相同，暂时归因于A9 / G10.1网站[Morrissey，SR，Horton，TE和DeRose，VJ（2000）J. Am。化学Soc。 122，3473-3481]。圆二色性和热变性实验还揭示了观察到的抑制裂解和通过添加Co（NH（3））（6）（3+）引起的Mn（2+）置换的结构效应。两者合计，数据表明高亲和力Co（NH（3））（6）（3+）网站负责重大抑制伴随着锤头状核酶的结构变化。另外，结果支持了一个模型，其中至少两种类型的金属位点支持锤头活动，其中一种需要内部球体协调。

著录项

相似文献

  • 外文文献
  • 中文文献
  • 专利
获取原文

客服邮箱：kefu@zhangqiaokeyan.com

京公网安备：11010802029741号 ICP备案号：京ICP备15016152号-6 六维联合信息科技 (北京) 有限公司©版权所有

  • 客服微信

  • 服务号