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首页> 外文期刊>Biochemistry >A New Binary System for Photosensitized Labeling of DNA polymerases in Nuclear Extract
【24h】

A New Binary System for Photosensitized Labeling of DNA polymerases in Nuclear Extract

机译：光敏标记核提取物中DNA聚合酶的新二元系统。

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A binary syste of reagents was used for photosensitized labeling of proteind of boving testis nuclear extract.A dUTP analog containing 4-azido-2,5-difuoro-3-chloropyridyl group (FAP-dUTP) was used for the first time as a compo-nent of the binary system,and a dUTP analog containing the pyrenyl proup 9Pyr-dUTP) was used as a photosensitizer.Photoaffinity labeling of proteins of nuclear extract was pefrormed using the radioactively labeled DNA duplex with the pho-toreactive FAP group at the 3'-end of elongation DNA strand and analog of the deoxyribose phosphate residue 93-hydroxy-2-hydroxymethylateraahydrofuran (F) 5'-phosphate) at the 5'-end of the nick.Such structure is formed by the action of nuclear extract enzymes from the initial DNA duplex containing a synthetic apurine/apydimidine site and is a photoreactive analogy of a long-patch base excision repair intermediate.UV-irradiation modified a limited number of proteins of the nuclear extract.As shown using specific antibodies,the new binary system of photoreagents increased the effeciency of DNA poly-merase beta labeling.
机译：使用二元试剂对感光的睾丸核提取物蛋白质进行光敏标记。首次使用含有4-叠氮基-2,5-二氟--3-氯吡啶基（FAP-dUTP）的dUTP类似物作为化合物。 -二元体系，并使用含有the基脯氨酸9Pyr-dUTP的dUTP类似物作为光敏剂。使用放射性标记的DNA双链体与光反应性FAP组的3进行放射性标记，对核提取物蛋白质进行光亲和标记。切口的5'末端的DNA延长链末端和脱氧核糖磷酸残基的类似物93-羟基-2-羟甲基ateraahydrofuran（F）5'-磷酸），这种结构是由核提取酶的作用形成的最初的DNA双链体含有一个合成的嘌呤/嘧啶位点，是长补片碱基切除修复中间体的光反应类似物。紫外线照射修饰了核提取物的有限数量的蛋白质。如使用特异性抗体所示，ne w光试剂的二元体系提高了DNA聚合酶β标记的效率。

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