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【24h】

Spreading by snail (Lymnaea stagnalis) defence cells is regulated through integrated PKC, FAK and Src signalling.

机译:蜗牛(Lymnaea stagnalis)防御细胞的扩散是通过整合的PKC,FAK和Src信号传导来调节的。

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摘要

Cell adhesion and spreading are vital to immune function. In molluscs, haemocytes (circulating phagocytes) are sentinels and effectors of the internal defence system; however, molecular mechanisms that regulate integrin-mediated spreading by haemocytes have not been characterised in detail. Visualisation of Lymnaea stagnalis haemocytes by scanning electron microscopy revealed membrane ruffling, formation of lamellipodia and extensive filopodia during early stages of cell adhesion and spreading. These events correlated with increased phosphorylation (activation) of protein kinase C (PKC) and focal adhesion kinase (FAK), sustained for 60 min. Treatment of haemocytes with the PKC inhibitors GF109203X or Go 6976, or the Src/tyrosine kinase inhibitors SrcI or herbimycin A, attenuated haemocyte spread by 64, 46, 32 and 35%, respectively (P
机译:细胞粘附和扩散对免疫功能至关重要。在软体动物中,血细胞(循环吞噬细胞)是内部防御系统的前哨和效应。然而,尚未详细描述调节整合素介导的血细胞扩散的分子机制。通过扫描电子显微镜观察到的狼毒葡萄球菌的血细胞显示在细胞黏附和扩散的早期阶段,膜起皱,片状脂蛋白形成和广泛的丝状伪足。这些事件与持续60分钟的蛋白激酶C(PKC)和粘着斑激酶(FAK)的磷酸化(激活)增加有关。用PKC抑制剂GF109203X或Go 6976或Src /酪氨酸激酶抑制剂SrcI或除草霉素A处理血细胞,可使血细胞扩散分别减少64%,46%,32%和35%(P <或0.001); PKC或Src抑制也阻止了粘着斑的形成。 Western印迹表明,在扩散和粘附过程中,这些抑制剂还损害PKC和FAK活化,其中Go 6976或SrcI抑制FAK磷酸化至少70%(P <或0.001),而除草霉素A或SrcI抑制PKC磷酸化至少46。 %(P <或= 0.01)。共聚焦显微镜显示磷酸化的PKC与局灶性粘着位点共定位,特别是在粘着和扩散的早期。最后,纤连蛋白促进了悬浮血细胞中的PKC和FAK磷酸化,表明活化可以独立于细胞粘附而发生。这些新颖的数据与PKC和FAK / Src在整合素激活和整合素介导的葡萄球菌血细胞的扩散中起着整合作用是一致的。我们提出了一个模型,其中整合素的参与介导了PKC与FAK / Src复合物的缔合,以在这些细胞的免疫识别过程中促进粘着斑组装。

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