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一种利用新型dCas9调控基因表达的方法

摘要

CRISPRi系统由于可以阻断RNA聚合酶复合物的起始或延长来抑制基因转录,为了可控地调节基因的转录,dCas9基因会与各种诱导型启动子连接后进行表达。然而由于一些诱导型启动子宽松的调控机制,在不添加诱导剂的情况下,dCas9仍具有微弱的表达能力,进而对目的基因进行部分抑制。工业生产的大规模发酵中需要实现基因的精准调控,故诱导型启动子引起的泄露表达问题亟待解决。本发明的目的在于提供一种利用新型dCas9系统调控基因表达的方法,利用密码子偏好性和tRNA氨酰化水平的差异,在翻译水平上,简单有效地通过补加氨基酸实现dCas9基因的表达调控。将dCas9基因中的氨基酸替换为其稀有密码子形式,外源添加对应氨基酸,可以使其恢复表达有功能的蛋白而发挥抑制作用。

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  • 2019-12-24

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