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一种基于Cas9切口酶偶联DNA聚合酶的恒温核酸检测分析方法及试剂盒

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本发明公开了一种基于Cas9切口酶偶联DNA聚合酶的恒温核酸检测分析方法，是在恒温条件下特异性检测靶标核酸；包括以下步骤：以两条分别与靶DNA序列互补的sgRNA序列，两组Cas9n‑sgRNA复合物分别与前间区序列邻近基序毗邻的匹配靶DNA序列结合后，通过Cas9n单口切割酶活性和恒温DNA聚合酶链置换活性，获得一条单链靶DNA序列，该序列在引物1和引物2，DNA聚合酶及Cas9n‑sgRNA复合物的共同作用下，在恒温条件下反复进行引物杂交，延伸，切割，链置换反应，扩增获得大量靶DNA序列，荧光染料与双链DNA产物结合产生荧光信号，实时测定反应体系中的荧光信号强度，与标准工作曲线对比，计算出靶标基因组或DNA序列的浓度。本发明尤其适用于核酸即时检测。

著录项

公开/公告号CN110607355A

专利类型发明专利
公开/公告日2019-12-24

原文格式PDF
申请/专利权人华东理工大学;
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申请/专利号CN201910119855.9
发明设计人叶邦策;尹斌成;王婷;
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申请日2019-02-18
分类号C12Q1/6851(20180101);C12Q1/10(20060101);C12R1/42(20060101);
代理机构31203 上海顺华专利代理有限责任公司;
代理人顾兰芳
地址 200137 上海市徐汇区梅陇路130号
入库时间 2024-02-19 15:25:52

法律信息

法律状态公告日

法律状态信息

法律状态
2020-01-17

实质审查的生效 IPC(主分类):C12Q1/6851 申请日:20190218

实质审查的生效
2019-12-24

公开

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