13-(N-叔丁氧基羰基)-2’-O-己酰基-3-苯基异丝氨酰氧基-10-脱乙酰基巴卡亭III的晶型

技术领域

本发明涉及13-[(N-叔丁氧基羰基)-2'-O-己酰基-3-苯基异丝氨酰 氧基]-10-脱乙酰基巴卡亭(baccatin)III(以下称为化合物(1))的新晶型。 先前在US2009/0130163和WO2009/126175中描述的化合物(1)起抑 制细胞增殖和迁移的作用。为了降低血管成形术后血管堵塞的发病 率，其可被有效地并入诸如支架的医疗器械中。化合物(1)也可用作 抗肿瘤药物。

背景技术

US2009/0130163和WO2009/126175报道了化合物(1)各种可能 的应用，但未公开任何其物理性质。可能由于在2'-O-位高柔性戊基- 羰基部分的存在，化合物(1)不能容易地结晶，因此通常以非结晶形 态制备。然而该形态在ICH稳定性研究中显示出化学稳定性的问题， 主要与源于巴卡亭核10-位氧化的杂质有关。因为晶体物质相比于非 结晶形态具有较低的吉布斯自由能，所以预期晶体物质在稳定性研究 中有较低的分解速度和因此较好的行为。因此期望的是发现化学和热 力学稳定的化合物(1)的晶型。用于持续不断地制备这种固体形态化 合物(1)的方法是开发健全的制造工艺的前提。

发明内容

现在已经发现化合物(1)可以以晶体形态存在。因此，根据第一 方面，本发明提供一种13-[(N-叔丁氧基羰基)-2'-O-己酰基-3-苯基异 丝氨酰氧基]-10-脱乙酰基巴卡亭III的晶型。

如技术人员已知，有可以用来验证固体是否为晶体形态的测量方 法。例如，结晶度可以通过诸如X射线粉末衍射的衍射技术或差热 分析(例如用于测量熔化和/或结晶温度)进行检测。

在一个优选实施方案中，13-[(N-叔丁氧基羰基)-2'-O-己酰基-3- 苯基异丝氨酰氧基]-10-脱乙酰基巴卡亭III的晶型为晶型A。因此， 称为“晶型A”的多晶型与其生产方法一起为本发明的一个优选主题。

优选地，13-[(N-叔丁氧基羰基)-2'-O-己酰基-3-苯基异丝氨酰氧 基]-10-脱乙酰基巴卡亭III的晶型A具有特征在于以下峰的XRPD衍 射图：6.1,9.1,10.1,10.6,11.7,13.0,18.5,19.8,22.0°2-θ±0.2°。更优选 地，晶型A的XRPD衍射图中另外具有以下峰：9.8,14.0,15.4,16.4, 17.5,17.8,19.2,20.6,22.7,24.1,25.4,27.0,28.0,30.2,31.5,31.7,34.6° 2-θ±0.2°。

在一个优选实施方案中，晶型A为水合物。

优选地，晶型A的水合物的含水量为最高4.0wt%，更优选为1.0 wt%到2.5wt%。

在一个优选实施方案中，晶型A的水合物为一水合物。

在一个优选实施方案中，晶型A的熔点为130±2℃，该熔点通 过差热分析在10℃/分钟的加热速率下以峰值温度测得。

在一个优选实施方案中，晶型A为含有约2%水和/或在约130℃ 熔化的一水合物的形态。

在一个优选实施方案中，晶型A为含有结晶水的水合物，如通 过差热分析以10℃/分钟的加热速率测量的，所述结晶水在70-120℃ 的温度范围内以约1.0到1.5wt%的量排出。

优选地，晶型A的FTIR-ATR光谱显示吸收频率为3444,3265, 2971,2940,1732,1697,13671240,1157,1063,973756,704cm^-1±2 cm^-1。更优选地，晶型A的FTIR-ATR光谱中另外具有以下峰：3063, 2902,2875,1641,1603,1586,1538,1497,1454,1316,1277,1023,946, 918,884,849,802,776,644,609,577cm^-1±2cm^-1。

根据另一方面，本发明提供上述13-[(N-叔丁氧基羰基)-2'-O-己酰 基-3-苯基异丝氨酰氧基]-10-脱乙酰基巴卡亭III的晶型作为药物的用 途。

优选地，所述晶型、尤其是晶型A可以用作用于抑制细胞增殖 和迁移、降低血管成形术后血管阻塞发病率和/或肿瘤治疗的药物。

根据另一方面，本发明提供制备上述13-[(N-叔丁氧基羰基)-2'-O- 己酰基-3-苯基异丝氨酰氧基]-10-脱乙酰基巴卡亭III的晶型的方法， 其包括在醇溶剂和水的混合物中搅拌13-[(N-叔丁氧基羰基)-2'-O-己 酰基-3-苯基异丝氨酰氧基]-10-脱乙酰基巴卡亭III。

优选地，搅拌时间为至少2小时，更优选为至少12小时。

在一个优选实施方案中，将优选为非结晶形态的13-[(N-叔丁氧 基羰基)-2'-O-己酰基-3-苯基异丝氨酰氧基]-10-脱乙酰基巴卡亭III至 少部分溶解在醇溶剂中，然后将醇溶液与水混合，并搅拌醇溶剂和水 的混合物。

优选地，在0℃到45℃的温度下，更优选地在室温下搅拌混合物。 优选地，所述醇溶剂为甲醇、乙醇或其混合物。

优选地，醇溶剂与水的体积比为0.3到0.6。

化合物(1)的晶型(优选为晶型A)的重要性首先在于化合物(1)的 化学稳定性。在该新形态中阻止了巴卡亭核10-位的氧化。通过过滤 或离心进行分离的简易性是晶型A的另一优点。如上文已说明的， 根据本发明的一个优选实施方案，晶型A的制备可以通过将原料化 合物(1)(例如以其非结晶形态)溶解于适量醇溶剂(优选甲醇或乙醇) 中，并将该溶液加入适量水中来实现。在可变的温度、优选0-45℃下， 最优选在约室温下，浆化所得的混合物至少12小时，从而生成晶型 A。典型的醇溶剂和水的体积比为0.3-0.6。

表征

X射线粉末衍射(XRPD)、热重分析和差热分析(TG/DTA)以及傅 里叶变换红外光谱(FTIR)能够将化合物(1)的晶型A与非晶相区分开 来。

X射线粉末衍射(XRPD)

X射线粉末衍射图案用Philips PW1800衍射仪收集。X射线发生 器使用Cu Kα线作为辐照源在45kV和35mA下运行。样品装填在 合适的狭缝上，受辐照长度为10mm。数据以0.02°2-θ的步长在2 和65°2-θ之间收集。

热重分析和差热分析(TG/DTA)

使用Seiko TG/DTA6200同步系统采用敞开的铝盘(体积40μL) 实施分析。在200ml/分钟氮气流下以线性加热速率(10℃/分钟)从30 到300℃记录TG/DT信号。每次测量使用约10mg粉末。

傅里叶变换红外光谱(FTIR)

使用傅里叶变换光谱仪Perkin Elmer Spectrum One利用ATR技 术记录红外光谱。该光谱为在4000-550cm^-1光谱范围内在4cm^-1分 辨率下16个加在一起的扫描的采集和转化的结果。

非晶态

非晶态的x射线粉末衍射图案(图1，2≤2θ≤40°角度范围)显示衍 射峰不存在以及非晶态样品典型的宽噪音。

非晶态的TG/DT分析(图2)显示特征在于在约123℃玻璃化转变 的DT曲线。在TG曲线中，由于残留湿分排出导致从30到120℃约 1.0%的重量损失，随后由于降解反应在200℃发生大量的重量损失。

非晶态的FTIR-ATR光谱示于图3a(4000-2500cm^-1光谱范围)和 3b(1900-550cm^-1光谱范围)中。其显示吸收频率为3443,2959,2935, 1707,1496,1453,1367,1242,1159,1068,1024,982,776,708cm^-1±2 cm^-1。

晶型A

下面将参照图4至6b所示的XRPD、TG/DT和FTIR-ATR测量 讨论晶型A的优选实施方案。

晶型A的x射线粉末衍射图案(图4，2≤2θ≤40°角度范围)显示在 约6.1,9.1,9.8,10.1,10.6,11.7,13.0,14.0,15.4,16.4,17.5,17.8,18.5, 19.2,19.8,20.6,22.0,22.7,24.1,25.4,27.0,28.0,30.2,31.5,31.7,34.6° 2-θ处具有有用的特征反射的晶体结构。

在一个优选实施方案中，13-[(N-叔丁氧基羰基)-2'-O-己酰基-3- 苯基异丝氨酰氧基]-10-脱乙酰基巴卡亭III的晶型具有基本上与图4 一致的X射线粉末衍射图案。

晶型A的TG/DT分析(图5)显示具有以下特征的DT曲线：由于 残留湿分排出导致低于70℃的弱吸热信号，相应的重量损失(TG曲 线中)约为2.5%；由于结晶水排出导致在约82℃处的最大吸热峰，从 70到120℃相应的重量损失(TG曲线中)约为1.2%(与水合物产物一 致)；从约123℃开始且在约130℃达到最大值的熔融峰。在TG曲线 中，首先是渐进的重量损失，之后是由于降解反应在180℃发生的大 量损失。

在一个优选实施方案中，13-[(N-叔丁氧基羰基)-2'-O-己酰基-3- 苯基异丝氨酰氧基]-10-脱乙酰基巴卡亭III的晶型具有基本上与图5 一致的差热分析曲线。

晶型A的FTIR-ATR光谱示于图6a(4000-2500cm^-1光谱范围)和 6b(1900-550cm^-1光谱范围)中。其显示吸收频率为3444,3265,3063, 2971,2940,2902,2875,1732,1697,1641,1603,1586,1538,1497,1454, 1367,1316,1277,1240,1157,1063,1023,973,946,918,884,849,802, 776,756,704,644,609,577cm^-1。

在一个优选实施方案中，13-[(N-叔丁氧基羰基)-2'-O-己酰基-3- 苯基异丝氨酰氧基]-10-脱乙酰基巴卡亭III的晶型具有基本上与图6a 和6b一致的FTIR-ATR光谱。

本发明通过以下实施例描进行说明，所述实施例并非意在限制权 利要求的有效范围。

实施例1

晶型A的制备

将非晶态的化合物(1)(10g)(如WO2009/126175的实施例2描述 所制备)在室温下溶解于乙醇(70mL)中。用1小时将该溶液加入到纯 净水(140mL)中，在室温下将产生的浆料搅拌16小时。滤出白色固 体，以33%的乙醇水溶液清洗并在真空中于40℃下干燥16小时，得 到具有分别在图4、5和6中所描述的特征XRPD、TG/DTA和IR的 化合物(1)。

实施例2

在25±2°C和60±5%相对湿度下，化合物(1)的非晶态和晶型A 的稳定性数据。两种固体形态的包装相同(Amber玻璃小瓶+聚乙烯袋 +真空密封的PET/铝/PE多层袋)。