含有马尾藻提取物、海鹿角提取物和褐海藻提取物的化妆品组合物

技术领域

本发明涉及一种含有马尾藻提取物、海鹿角（sea staghorn）提取物和褐 海藻提取物作为活性成分的化妆品组合物，以及更具体地涉及一种含有选自 由马尾藻提取物、海鹿角提取物和褐海藻提取物组成的组中的至少一种作为 活性成分的化妆品组合物，该化妆品组合物具有优异的抗氧化效果以及优异 的提高皮肤弹性和减少皮肤皱纹的效果。

背景技术

皮肤由三层组成：外表皮、中部真皮和内皮下组织。皮肤的功能是保护 身体免受外来的物理的和化学的影响。特别地，皮肤调节从具有约65-70% 水含量的人体中水的蒸发。皮肤的表皮按顺序从上到下由角质层、颗粒层、 鳞状层（squamous layer）和基底层组成。表皮的角质层具有大约10-20%的 水含量，形成皮肤的最外层，并且起到抑制水分从身体内蒸发的作用，同时 防止外部物质的过度渗透（J.Invest.Dermatol.80(Suppl.),44-49.1983）。皮肤 的真皮由乳头层和网状层组成。乳头层是由包括坚韧的胶原纤维和弹性纤维 的结缔组织组成，其使皮肤坚韧和有弹性，并且因此在皮肤弹性（皱纹）中 起到关键的作用。皮肤的皮下组织是一种由结缔组织层组成的层并且有时也 被称为脂肪组织层。皮下组织主要由分布在皮下脂肪层中的疏松结缔组织组 成，在皮下组织中的脂肪细胞起到储存热量和作为缓冲的作用。

皮肤老化的原因主要被分为两类：内在老化和外在老化。内在老化随着 年龄的增加自然地发生。外在老化指的是由于长期暴露在阳光下导致的皮肤 损伤并且包括光-老化，以及通过活性氧（reactive oxygen species）引起的老 化。当角质层被阳光的UV辐射损伤时，在角质层中发生细胞的过度增殖， 结果就是，当光-老化发生时角质层的厚度增加。进一步，由于被UV辐射引 起的皮肤损伤，真皮层的胶原蛋白产生能力下降，结果就是，真皮层变得越 来越薄以致产生的皱纹比由内在老化引起的皱纹更厚更深。通过很多研究众 所周知，活性氧（ROS）参与皮肤老化。Harman在1956年提出老化的自由 基理论，并且根据这个理论，在正常的新陈代谢过程中产生的各种活性氧引 起累积的氧化损伤，导致老化和死亡。活体有能力保护自身抵抗由活性氧引 起的损伤，但是这种保护并不彻底，因此身体被一些活性氧损伤。这种累积 的氧化损伤缓慢地而又漫长地发生，经过几年或者在某些情况下贯穿整个生 命，以降低皮肤细胞或组织的功能，导致疾病和老化。随着消费者期望看起 来年轻以及对功能性的化妆品产品的需要增加，用于提高皮肤弹性和降低皮 肤皱纹的化妆品产品的研究已经被踊跃的实施。

通常，化妆品产品旨在保持身体清洁，使皮肤好看和迷人并且保护皮肤 或头发免受UV辐射或者干燥环境以防止老化。近期，随着工业社会的发展 和社会行动的增加，积极地自我表达的意识已经增加，并且使用化妆品产品 保持皮肤美丽和健康的期望极大地增加。因此，已经研究和开发了各种类型 和配方的皮肤护理和化妆的化妆品产品，在其中，已经公认用于提高皮肤弹 性和减少皮肤皱纹的化妆品产品成为最主要的产品。

因此，已经开发出用于提高皮肤弹性和减少皮肤皱纹的各种化妆品原材 料，并且与动物-衍生的原材料相比，天然植物-衍生的原材料近期受到大量 的关注。在极端的海洋环境中保持活力以及含有大量的好的养分的海藻提取 物被认为显示出更大的有力的效果并且受到消费者的高度喜爱。实际上，用 作食品的海藻是维生素和矿物质优秀的来源，并且因此认为，当这些海藻被 用于皮肤时，它的效果能够直接地被转移到皮肤。

发明内容

技术问题

因此，本发明的发明人关于海藻提取物对皮肤的效果已经进行了大量的 研究，并且结果，发现马尾藻提取物、海鹿角提取物和褐海藻提取物具有减 轻皮肤氧化应激（oxidative stress）和减少皮肤皱纹的效果，从而实现本发明。

因此，本发明的目的是提供一种化妆品组合物，该化妆品组合物具有抗 氧化效果和优异的提高皮肤弹性和减少皮肤皱纹的效果。

技术方案

为了实现上述目的，本发明提供了一种用于为皮肤提供抗氧化保护、提 高皮肤弹性和减少皮肤皱纹的化妆品组合物，该组合物含有马尾藻提取物、 海鹿角提取物和褐海藻提取物作为活性成分。

有利影响

本发明的化妆品组合物含有马尾藻提取物、海鹿角提取物和褐海藻提取 物，该组合物能够提高皮肤的抗氧化活性并且具有优异的提高皮肤弹性和减 少皮肤皱纹的效果。

附图说明

图1是显示用于本发明的马尾藻提取物、海鹿角提取物和褐海藻提取物 使角化细胞免受紫外线引起的损伤的效果的图表。

具体实施方式

根据本发明的化妆品组合物，该化妆品组合物含有选自由马尾藻提取 物、海鹿角提取物和褐海藻提取物组成的组中的至少一种作为活性成分。

下文中，本发明将进行进一步详细描述。

用作本发明化妆品组合物中的活性成分的马尾藻（Sargassum fulvellum） 具有根、茎和叶，彼此很容易区分，而且根为固着器。马尾藻具有一个主要 的枝并且生长超过1-3m。茎为圆柱形或三角形并且扭曲。叶从茎朝向底部 生长并且扭曲。而且，叶为木质匙形或椭圆形并且具有中间叶脉（mid vein）。 上面的叶为柳叶刀形并在边缘具有锯齿形突出，以及从躯干的茎形成气泡。 马尾藻为深黄棕色并分布在韩国的海滨。马尾藻含有作为主要成分的褐海藻 酸（alginic acid）、叶绿素a-c、β-胡萝卜素、岩藻黄素、海带多糖和甘露醇。 当在未加工状态分析时，马尾藻具有非常低的膳食纤维和脂肪含量，但是在 加工成粉末状态时具有30%或以上的膳食纤维和脂肪含量。马尾藻中的膳食 纤维的含量高于碳水化合物的含量。在韩国，马尾藻属（genus Sargassum） 的很多种类被用作食品并且也用于在工业领域中褐海藻酸等的生产或者作 为肥料。已知褐海藻酸有助于胃的消化过程，有助于排便（bowel movement） 以减少便秘，还对结肠直肠癌的防止有效。由于马尾藻的高矿物质含量它能 有效预防高血压和骨质疏松症，并且由于它的高碘含量能够有效预防甲状腺 功能异常。

用作本发明化妆品组合物中的活性成分的海鹿角（Codium fragile）具有 光滑的感觉，为深蓝色，并且在味觉上是纯的（plain）用以提高朝鲜泡菜的 口味，在JaSanEoBo（学者Jeong Yak-Jeon记载的韩国渔业科学书（the Korean  fisheries science book written by the scholar Jeong Yak-Jeon））的记载中，表明 海鹿角已经被用作提高朝鲜泡菜口味的材料。在日本已知海鹿角作为海松 （Miru），是指生长在海里的松树。它具有10-30cm的高度和1.5-3mm的厚 度，并且它的下部比上部稍厚。枝像鹿角一样分开，笔直地生长并且达到相 同的高度以形成扇形。表面像绒布一样柔软，并且用显微镜可以看出无色和 透明的线状组织不规则地缠绕。年轻的海鹿角在前部特别是上部具有毛，但 是毛随着时间的推移而被去除，留下标记。海鹿角躯干的所有部分彼此连接， 细胞之间没有薄膜以致一个细胞中含有多个细胞核。含有孢子的囊（Sacks） 是棒状的，长度是厚度的5-7倍，而且顶部是尖的。海鹿角具有高的膳食纤 维含量以及含有大量的矿物质，包括钙、铁、维生素A、维生素C和烟酸。

用于本发明化妆品组合物中的褐海藻（Undaria pinnatifida）是叶状体的 植物，它的根、茎和叶彼此明显区分。褐海藻分布在韩国的所有海岸，但是 在被冷流和暖流强烈影响的区域没有分布。它生长在靠近低潮线的岩石上， 但是倾向生长在韩国南部地区的深水区和北部地区的浅水区。收集褐海藻主 要在从冬天到春天这个阶段，并且在这个阶段收集的褐海藻具有最好的口 感。褐海藻在从春天到夏天这个阶段进行繁殖。它是鲍鱼（ear shells）和海 螺的主要食物并且在韩国、日本、中国等用于食用的目的。它富含膳食纤维、 钾、钙、碘等，活化新陈代谢并在产后护理、预防便秘和肥胖以及补充铁和 钙方面具有优异的效果。由于这些优势，很久以前人们就知道褐海藻。有记 载从高丽时期就向中国出口褐海藻了。高丽Dogyeong（由中国学者记载的 关于高丽王朝的书）描述了“褐海藻常常被不同阶层的人接受。它尝起来咸 并且闻起来有鱼腥味，但是如果长期食用很好吃”。而且，高丽史（Goryeosa） （高丽历史汇编）描述“文宗王（King Munjong），高丽的第11位国王，在 1058年授权一处地方用于收集褐海藻。忠宣王（King Chungsun），高丽的第 26位国王，在1301年赠送褐海藻给元朝的皇太后”。而且，Donguibogam（在 朝鲜王国期间汇编的医学百科全书）描述褐海藻性凉，口味咸并且无毒。它 减轻发烧、消除压抑、治疗“Ki”和利尿。干褐海藻含有12.7%蛋白质、52% 碳水化合物、1.1%脂肪、1300mg%Ca、140IU维生素A、0.11mg%维生素 B1、0.14mg%维生素B2、10mg%烟酸和15mg%维生素C。与奶粉相比，褐 海藻具有高钙含量，含有100mg%碘并且是强碱性食物。而且褐海藻含有褐 海藻酸作为粘性物质，而且根中褐海藻酸的含量低于叶或茎中的。褐海藻中 主要的类胡萝卜素色素包括岩藻黄素（fucoxanthine）、紫黄质（violaxanthine）、 叶黄素和β-胡萝卜素。

本发明中的马尾藻提取物、海鹿角提取物和褐海藻提取物可以根据现有 技术的传统方法进行制备。例如，这些提取物可以通过用蒸汽蒸馏冻干的马 尾藻、海鹿角和褐海藻中的每种，使用甘油作为溶剂提取蒸馏的产物，并纯 化提取物来制备。

基于所述组合物的总重量，本发明的化妆品组合物中马尾藻提取物、海 鹿角提取物和褐海藻提取物各自的含量为0.001-30重量%。如果化妆品组合 物中的每种提取物的含量小于0.001重量%，组合物的效果将不明显，以及 如果含量大于30重量%，含量的增加并没有导致效果的明显增加。

当本发明的化妆品组合物含有马尾藻提取物、海鹿角提取物和褐海藻提 取物的混合物时，对皮肤提供抗氧化保护、减少皮肤皱纹和提高皮肤弹性的 效果能够进一步增加。而且，当本发明的化妆品组合物含有马尾藻提取物、 海鹿角提取物和褐海藻提取物的混合物时，活性成分将显示出协同效应 （synergistic effect），并且因此对皮肤提供抗氧化保护、减少皮肤皱纹和提 高皮肤弹性的效果将显著增加。

根据本发明的皮肤外用化妆品组合物含有化妆用的和皮肤科学可接受 的介质和/或基础成分。所述化妆品组合物可以以任意形式提供用于局部施 用。例如，所述化妆品组合物可以以溶液、凝胶、固体或无水膏状产品、水 包油乳液、悬浮液、微乳、微胶囊、微粒剂或离子（脂质体）和/或非离子囊 泡分散的形式来提供。或者，它也可以以乳霜、皮肤、护肤液、粉末、软膏、 喷雾或遮瑕棒的形式来提供。另外，根据本发明的皮肤外用组合物可以根据 现有技术的传统方法进行制备。进一步地，根据本发明的皮肤外用组合物的 化妆品组合物可以以泡沫组合物或进一步含有压缩推进剂的气溶胶组合物 的形式使用。

根据本发明的皮肤外用组合物的化妆品组合物可以含有通常用于化妆 品领域或皮肤科学领域的添加剂，例如，脂肪物质、有机溶剂、增溶剂、增 稠剂、胶凝剂、软化剂、抗氧剂、悬浮剂、稳定剂、发泡剂、香料、表面活 性剂、水、离子或非离子乳化剂、填充剂、金属离子掩蔽剂、金属离子螯合 剂、防腐剂、维生素、阻滞剂、润湿剂、精油、染料、色素、亲水或疏水活 化剂、脂囊泡或其他通常用于化妆品领域或皮肤科学领域的成分。这些添加 剂的引入量为通常用于化妆品领域或皮肤科学领域的用量。

发明方式

下面，参照实施例和测试实施例将进一步详细描述本发明，但是本发明 的范围并不限于这些实施例。

制备实施例1：马尾藻提取物的制备

将1kg冻干的马尾藻用蒸汽蒸馏12h，并在4℃下将蒸馏产物在70%的 甘油中浸渍7天，然后纯化。

制备实施例2：海鹿角提取物的制备

将1kg冻干的海鹿角用蒸汽蒸馏12h，并在4℃下将蒸馏产物在70%的 甘油中浸渍7天，然后纯化。

制备实施例3：褐海藻提取物的制备

将1kg冻干的褐海藻用蒸汽蒸馏12h，并在4℃下将蒸馏产物在70%的 甘油中浸渍7天，然后纯化。

制备实施例4：马尾藻、海鹿角和褐海藻混合物的提取物的制备

将冻干的马尾藻、海鹿角和褐海藻彼此以1:1:1的重量比混合并用蒸汽 蒸馏12h，并在4℃下将蒸馏产物在70%的甘油中浸渍7天，然后纯化。

制备实施例5：马尾藻和海鹿角混合物的提取物的制备

将冻干的马尾藻和海鹿角彼此以1:1的重量比混合并用蒸汽蒸馏12h， 并在4℃下将蒸馏产物在70%的甘油中浸渍7天，然后纯化。

制备实施例6：马尾藻和褐海藻混合物的提取物的制备

将冻干的马尾藻和褐海藻彼此以1:1的重量比混合并用蒸汽蒸馏12h， 并在4℃下将蒸馏产物在70%的甘油中浸渍7天，然后纯化。

制备实施例7：海鹿角和褐海藻混合物的提取物的制备

将冻干的海鹿角和褐海藻彼此以1:1的重量比混合并用蒸汽蒸馏12h， 并在4℃下将蒸馏产物在70%的甘油中浸渍7天，然后纯化。

测试实施例1：抵御紫外线引起的细胞损伤的效果

将从人的表皮组织分离的角化细胞以1×10⁴细胞/孔的密度添加到96-孔 细胞培养板的每个孔中并附着24h。18h后，去除培养基（medium）并添加 50μL的磷酸盐缓冲液（PBS）到每个孔中。用30mJ/cm²的来自UV-B灯（型 号：F15T8，UV B15W，Sankyo Dennki，日本）的紫外光照射角化细胞， 去除PBS后将200μL的角化细胞生长培养基（Clonetics，BioWhittaker，MD， 美国）添加到每个孔中。然后，分别用实施例1-7制备的马尾藻提取物、海 鹿角提取物、褐海藻提取物和混合的提取物中的每种处理细胞并培养20h。 特定时间之后，收集适当量的培养上清液并确定20h的乳酸脱氢酶（LDH） 指示的细胞损伤的量。使用Cytotox96非放射性细胞毒性检测^TM试剂盒（kit） （Promega，Madison，WI，美国）测量培养上清液中的LDH的量。LDH分 泌（secretion）（%）可以通过计算相对于作为100的媒介物对照组的每组的 数值来获得，并且计算的结果在图1中显示。

从图1可以看出，用马尾藻提取物、海鹿角提取物和褐海藻提取物中的 每种处理的组和用马尾藻、海鹿角和褐海藻中的至少两种的混合物的提取物 处理的组之间对比的结果表明，用马尾藻提取物、海鹿角提取物和褐海藻提 取物中的每种处理在某种程度能够抑制由紫外线引起的人的角化细胞的损 伤导致的LDH的增加，但是用至少两种活性成分的混合物的提取物处理更 显著地抑制了LDH的增加。具体地，用马尾藻、海鹿角和褐海藻的混合物 的提取物处理的细胞的LDH水平降低到与没有用紫外光处理的对照组（媒 介物）相似的水平。

因此，发现本发明的马尾藻提取物、海鹿角提取物和褐海藻提取物具有 优异的保护皮肤细胞免受外部刺激例如紫外线辐射的效果。

实施例1-7和对比例1

根据下面表1显示的组合物，制备实施例1-7和对比例1的面霜配方。

表1（单位：重量%）

实施例1-7和对比例1的面霜配方的制备方法

1）将上面表1中组分（1）到（12）均匀混合加热到70℃以制备水相部 分。

2）将组分（15）到（20）均匀混合加热到70℃以制备油相部分。

3）将步骤2）的油相部分添加到步骤1）的水相部分并在7200rpm下均 匀混合6min。

4）将步骤3）的混合物冷却到室温。

测试实施例2：提高皮肤弹性的效果

为了测试提高人的皮肤弹性的效果，将实施例1-7和对比例1的配方以 下列方式测试。将每个配方施用到20个25-35岁的每个女人的脸上，一天 两次（早上和晚上）持续8周，然后使用皮肤弹性测量仪（Cutometer）SEM 575（C+K电子有限公司（Electronic Co.），德国）测量提高皮肤弹性的效果， 测量的结果在下面表2中显示。表2中的数值是通过皮肤弹性测量仪 （Cutometer）SEM575测量的黏弹性。

表2：提高皮肤弹性的效果

从上面表2可以看出，用马尾藻提取物、海鹿角提取物和褐海藻提取物 中的每种处理的组显示出增加的皮肤弹性，以及用马尾藻、海鹿角和褐海藻 中的至少两种的混合物的提取物处理的组的皮肤弹性被进一步提高。具体 地，用马尾藻、海鹿角和褐海藻的混合物的提取物处理的组显示出最高的皮 肤弹性。

因此，发现本发明的马尾藻提取物、海鹿角提取物和褐海藻提取物具有 优异的提高皮肤弹性的效果。

测试实施例3：刺激胶原蛋白产生的效果

使用阴性对照（未处理的）和维生素C作为阳性对照来对比产生胶原蛋 白的能力。使用成纤维细胞系（fibroblast cell line）hs68，测量产生类型1原 骨胶原（procollagen）的能力和抑制胶原酶合成的能力。

将成纤维细胞以5×10⁴/孔的密度添加并附着到FALCON48-孔板中，然 后用1ppm的马尾藻提取物、海鹿角提取物、褐海藻提取物或它们的至少两 种混合物中的每种处理。培养细胞24h，然后使用类型1pN胶原蛋白酶免 疫测定（EIA）试剂盒测量培养上清液中类型1原骨胶原的产量。类型1原 骨胶原的产量通过蛋白质的总量标准化并且在对照组和测试组之间对比。测 量的结果在下面表3中显示。

表3

从上面表3可以看出，用马尾藻提取物、海鹿角提取物和褐海藻提取物 中的每种处理的组显示出增加的胶原蛋白产量，以及在用马尾藻、海鹿角和 褐海藻中的至少两种的混合物的提取物处理的组中的胶原蛋白产量进一步 提高。具体地，用马尾藻、海鹿角和褐海藻的混合物的提取物处理的组显示 出最高的胶原蛋白产量。

因此，发现本发明的马尾藻提取物、海鹿角提取物和褐海藻提取物具有 优异的通过刺激胶原蛋白产生减少皮肤皱纹的效果。

测试实施例4：抑制胶原酶合成的效果

使用阴性对照（未处理的）和视黄酸作为阳性对照来测量抑制胶原酶合 成的能力。

将成纤维细胞以5×10⁴/孔的密度添加并附着到FALCON48-孔板中，然 后用15mJ/cm²的UVB照射。然后，用1ppm的马尾藻提取物、海鹿角提取 物、褐海藻提取物或它们的至少两种混合物中的每种处理细胞。培养细胞 24h，然后使用MMP-1酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒测量培养上清液 中MMP-1（基质金属蛋白酶-1；一种胶原蛋白）的产量。MMP-1的量通过 蛋白质的总量标准化，并且测量的结果显示在下面表4中。

表4

从上面表4可以看出，用马尾藻提取物、海鹿角提取物和褐海藻提取物 中的每种处理的组显示出降低的胶原酶合成，以及在用马尾藻、海鹿角和褐 海藻中的至少两种的混合物的提取物处理的组中的胶原酶的合成进一步受 到抑制。具体地，用马尾藻、海鹿角和褐海藻的混合物的提取物处理的组显 示出最好的抑制胶原酶合成的效果。

因此，发现本发明的马尾藻提取物、海鹿角提取物和褐海藻提取物具有 优异的通过有效抑制胶原酶合成减少皮肤皱纹的效果。