法律状态公告日
法律状态信息
法律状态
2018-05-18
未缴年费专利权终止 IPC(主分类):A61K31/7048 授权公告日:20170208 终止日期:20170427 申请日:20140427
专利权的终止
2017-02-08
授权
授权
2016-10-26
专利申请权的转移 IPC(主分类):A61K31/7048 登记生效日:20160929 变更前: 变更后: 申请日:20140427
专利申请权、专利权的转移
2016-10-26
著录事项变更 IPC(主分类):A61K31/7048 变更前: 变更后: 申请日:20140427
著录事项变更
2014-08-27
实质审查的生效 IPC(主分类):A61K31/7048 申请日:20140427
实质审查的生效
2014-07-30
公开
公开
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技术领域
本发明属于医药技术领域，具体涉及一种外科用防粘连的药物组合物。
背景技术
粘连是一种疤痕组织带，在外科手术、炎症或者损伤后形成，它将两个通常彼此相互分离的解剖面连结在一起。粘连可以表现为薄层组织或者厚的纤维带。
我国外科手术量呈快速增长趋势，过去很多疾病都采取保守治疗,如今通过外科手术即可在短期内取得满意效果。据资料统计，2005年全国手术量已接近1000万台，这表明外科手术的技术水平得到了充分发挥。
但多年以来，在外科手术中，90%以上都会涉及到术后组织粘连问题。粘连是外科手术中由于组织的创伤使结缔组织纤维带与相邻的组织或器官结合在一起，形成的异常结构，它是一种常见的病理反应(医学统称术后组织粘连)。在腹腔手术、盆腔手术、骨科手术、泌尿外等手术中都会出现术后组织粘连，会引起严重的术后并发症。如肠梗阻、腹腔和盆腔疼痛、不孕和不育等，严重的腹腔粘连常给再次手术造成困难。这长期困扰着外科医师，并给患者造成痛苦和经济损失，严重者甚至危及其生命。
正常生理情况下,腹膜间皮细胞纤维蛋白原的释放和纤维蛋白溶解作用之间存在着平衡关系,如果此关系遭到破坏,纤维蛋白原释放增加,大量纤维蛋白沉积和/或纤维蛋白溶解障碍将导致粘连的形成。尽管现代外科手术技术已有很大的发展和进步,但术后腹腔粘连仍然是腹部手术后常见的并发症,发生率高达90%。腹腔粘连可引起腹部很多并发症。有的要接受再次开腹手术甚至多次手术。
迄今为止，尚没有一种药物能起到完全令人满意的防治手术尤其是腹部外科手术后组织粘连的效果。本申请旨在针对现有技术防治组织粘连效果不佳的问题，提供一种可以有效预防和治疗腹部手术后组织粘连的药物组合物。
发明内容
本发明提供了一种预防和治疗腹部手术后组织粘连的药物组合物，其特征在于其活性成分由芍药苷和阿魏酸组成，二者的重量配比为1：3～3：1。
为了达到更好的预防和治疗腹部手术后组织粘连的效果，所述药物组合物为缓释微球制剂。
优选地，所述微球制剂中活性成分与药物可接受载体成分的重量配比为1：2～1：5。
进一步优选地，所述缓释微球制剂由海藻酸钠经常规方法交联制备得到，交联剂为氯化钙。
本发明还提供了一种制备所述药物组合物的方法，具体步骤如下：
称取海藻酸钠，溶于100 mL 水中，备用; 精密称取氯化钙和活性成分，配制成活性成分和氯化钙的混合溶液，置冰浴中; 采用滴头为医用8 号针头的注射器将海藻酸钠溶液匀速滴入氯化钙混合溶液中，静置数小时，待微球形成后用水反复冲洗，50 ℃烘干，重复多次，即得。
本发明还提供了一种所述药物组合物在制备预防和治疗腹部手术后组织粘连的药物中的用途，在于所述药物在腹部手术后给予患者。
经过不断尝试和潜心研究，本发明的药物组合物，其活性成分芍药苷与阿魏酸的配伍取得了协同增效的治疗效果，疗效明显优于活性成分单独应用，或者芍药苷与其他药物，例如川芎嗪，配伍使用时取得的预防和治疗效果。取得了意料不到的技术效果。
并且，发明人还惊奇地发现，当使用海藻酸钠制备缓释微球载体时，能够使得活性成分的治疗效果更优，明显好于其他材料制备得到的微球制剂所能达到的效果。
具体实施方式
通过以下实施方式进一步详细说明本发明的技术方案。需要指出的是，以下说明仅仅是对本发明要求保护的技术方案的举例说明，并非对这些技术方案的任何限制。本发明的保护范围以所附权利要求书记载的内容为准。
实施例1
1）称取海藻酸钠2.5g，溶于100 mL 水中，备用;
2）称取氯化钙2g，芍药苷和阿魏酸各0.5g，配制成活性成分和氯化钙的混合溶液100mL，置冰浴中;
3）采用滴头为医用8号针头的注射器将海藻酸钠溶液匀速滴入含有活性成分的氯化钙混合溶液中，静置数小时；
4）待微球形成后用水反复冲洗，50 ℃烘干，重复多次，即得。
测定：微球制剂的平均粒径为106.1±3.4μm，包封率为85.2％
实施例2
1）称取海藻酸钠4g，溶于100 mL 水中，备用;
2）称取氯化钙3g，芍药苷1.5g和阿魏酸各0.5g，配制成活性成分和氯化钙的混合溶液100mL，置冰浴中;
3）采用滴头为医用8号针头的注射器将海藻酸钠溶液匀速滴入含有活性成分的氯化钙混合溶液中，静置数小时；
4）待微球形成后用水反复冲洗，50 ℃烘干，重复多次，即得。
测定：微球制剂的平均粒径为99.5±5.8μm，包封率为80.3％
实施例3
1）称取海藻酸钠5g，溶于100 mL 水中，备用;
2）称取氯化钙5g，芍药苷0.5g和阿魏酸1g，配制成活性成分和氯化钙的混合溶液100mL，置冰浴中;
3）采用滴头为医用8号针头的注射器将海藻酸钠溶液匀速滴入含有活性成分的氯化钙混合溶液中，静置数小时；
4）待微球形成后用水反复冲洗，50 ℃烘干，重复多次，即得。
测定：微球制剂的平均粒径为110±1.6μm，包封率为88.6％
实施例4 肠粘连模型
研究中使用重量在240-280g之间的雄性SD大鼠。将队列设计成包括盲肠磨损的无治疗的阳性对照和无磨损的无治疗的阴性对照，以及另外的队列，以评价预防肠粘连的最优递送方法。所有的动物将在12小时光照/黑的暗周期下在单独的笼中供养，并在手术前和手术后无限制地提供食物和水。所有动物均采用腹膜内注射氯胺酮(75-100mg/kg)和赛拉嗪(5-10mg/kg)进行麻醉。麻醉将用腹膜内注射10％诱导剂量的氯胺酮/赛拉嗪维持。麻醉水平使用夹趾方法评估。
通过刮剃已麻醉的大鼠的下腹部并用碘清洗来对该大鼠进行手术准备。动物将接受中线剖腹术，确定盲肠并将其放置到含盐水的纱布垫上，用盐水来保持组织湿润。用强生的1x1cm电外科刀头清洁片刮擦盲肠壁，直到在前面上观察到出血为止。使用0.8mm活检凿在腹膜和下面的肌肉中形成1.6mmx0.8mm的缺损。在施加治疗前冲洗腹腔。在并置的盲肠和受伤的腹膜之间施行适当的治疗。具体而言，在队列1中，将磨损的盲肠与受伤的腹膜和闭合的手术切口并置。队列2仅接受剖腹术，而且闭合切口。另外的队列用10ml含有适当浓度MK2抑制剂的PBS冲洗。如果在手术过程中发生诸如肠穿孔的损伤或者隔离物未能将受损的组织分开，将从研究中除去该动物并进行替换。
手术后14天，对实验鼠再次进行如上所述的麻醉，并且在不知道所述治疗的情况下实施第二次剖腹术，以评价粘连的范围和严重性。绝大多数腹部粘连研究采用目测类比评分系统而非组织学。将采用如下所述的评分系统：0＝无粘连，1＝细薄且容易分离的粘连，2＝量多而薄，且组织难以分离，以及3＝严重，并且伴随纤维化，需要器械来分离组织。记录每组中具有粘连的动物数和粘连的严重性，随后采用ANOVA方差分析进行组间比较，以确定抑制粘连的最佳治疗组合(屏障、释放速度和药物浓度)。
实施例5 药效实验
将40只雄性SD大鼠分别关在笼中，并容许一个为期5天的顺应时期。在外科手术前半小时，用皮下注射丁丙诺啡 (50μg/kg)来对所有动物进行预处理，以用于控制疼痛。
在达到足够的麻醉水平后，腹部的毛被剪去并用贝塔定溶液预备好。采用15号刀片划出3cm的纵向中线腹部切口。使小肠向上回缩并且暴露出降结肠。将乙状结肠在腹膜反折上方约2cm锐性分离。使用6-0普罗林，布置8个间断的缝合，以实现手缝吻合。
任何具有看得见的裂隙的区域也布置了另外的缝合线。
在闭合前，将5ml试验溶液(无菌生理盐水中溶有试验制剂，确定活性成分最终浓度)或者盐水置于吻合部上以及腹腔和骨盆中。随后，用3-0丝缝合线以直线的、连续的方式闭合腹部，并且以相同的方式作为单独的层闭合皮肤。将动物放置在恢复区，直至完全从麻醉中清醒。在手术后4小时以及第二天早晨进一步注射丁丙诺啡，以控制疼痛。
处死实验动物在距手术日4天和10天时进行(10只动物，每天每组处理5只)。处死点要谨慎地选择，因为可以预见在第4天肠完整性方面的效果是最显著的，如果存在的话；以及2)10天时间段是形成最大粘连的时间段。
对动物实施安乐死。用左侧面正中旁切口进入腹腔；然后在切口尖端做出两个水平切口，从而可以向后拉动皮瓣，且可以在不会无意地损伤任何组织的情况下评估到前腹壁的粘连形成。
在仔细地移回任何上面覆盖的非粘连的内脏后，随后识别出吻合部位。使直接与吻合部形成的任何粘连保持原位，同时不试图除去或者扰动该区域。对吻合部拍照，以用于进一步评估。这是粘连评分系统的第二部分。对每个发现与吻合部粘连的组织指定为“1”，包括附睾脂肪、网膜、小肠、大肠。增加所有可能性作为累积得分的部分。
随后，测量结肠爆裂压力。使用丝带，将距吻合部远端的结肠挤出粪便并结扎。在近端小心地挤出其余的任何结肠内容物，并随后在靠近吻合部处锐性分离结肠。将18号穿刺针插入结肠腔，并再次用丝带扎住近端和所包括的穿刺针，以将它固定在适当位置并确保无泄漏。使穿刺针与压力传感器连接，并且预设置输液泵以递送300cc/hr生理盐水作为逐渐增加结肠内压力的手段。将结肠开始泄漏盐水或者压力突然下降的点记录为爆裂压力，无论泄漏是否发生在吻合部或者缝合线外侧。
接下来，对与吻合部的粘连的密度和韧性进行分级。从吻合部切取或者切开粘连，并根据切开的难度分级。该得分作为累积总计的部分被包括。
表1.粘连评分系统
理论上，最小的可能得分为0，最高的可能得分为8。
表2.活性成分对比实验数据
以上说明各个治疗组相对于模型对照组，均有组织粘连的治疗效果，但阿魏酸单独使用药效一般（与对照组p>0.01），芍药苷和川芎嗪具有较好的治疗效果（与对照组p<0.05）；然而，在活性成分组合方面，以芍药苷和阿魏酸的配伍组协同效果最为明显（与对照组p<0.0001），治疗效果最佳，明显比单独用药疗效好（与单独用药组相比p<0.01），而这种协同作用效果并未在芍药苷和川芎嗪（与单独用药组相比p>0.05），以及阿魏酸和川芎嗪（与单独用药组相比p>0.05）的联合应用中观察到。
表明芍药苷与阿魏酸联合应用在治疗腹部手术后组织粘连上取得了意料不到的良好效果。
表3.不同剂型对比实验数据
以上数据说明书相同活性成分芍药苷和阿魏酸（各0.5g），使用不同的药剂载体，其治疗作用仍有差异。实验数据表明当所述活性成分使用海藻酸钠微球作为药物载体时，其治疗效果明显好于其他类型的药物制剂（与其他实验组相比，活性成分海藻酸钠微球组p均<0.001）。
本发明内容仅仅举例说明了要求保护的一些具体实施方案，其中一个或更多个技术方案中所记载的技术特征可以与任意的一个或多个技术方案相组合，这些经组合而得到的技术方案也在本申请保护范围内，就像这些经组合而得到的技术方案已经在本发明公开内容中具体记载一样。
机译： 用于治疗和预防粘连的化合物，与化合物有关的药物组合物和用于预防和治疗粘连的方法
机译： 用于治疗和预防粘连的化合物，与化合物有关的药物组合物和用于预防和治疗粘连的方法
机译： 用于治疗和预防粘连的化合物，与该化合物有关的药物组合物以及用于预防和治疗粘连的方法
