一种适合与造影剂联合使用的前列地尔组合物

技术领域

本发明涉及药物制剂领域，具体涉及适合与造影剂联合使用的前列地尔组合物。

背景技术

当人体某些组织和器官缺乏自然对比时，可通过人为的方法将某种物质引入器官内或其 周围，以提高组织之间对X线的吸收差别，并增强CT图像中组织之间的对比度，即造影增强 扫描，主要用于腹部脏器、血管、脑室、脊髓等的造影，引入的物质即造影剂，又称为对比 剂。根据造影剂的理化性质和在水溶液中电离情况的不同将其分为四类：离子型单体(泛影 葡胺)、非离子型单体(碘帕醇、碘海醇、碘普罗胺、碘美普尔等)、离子二聚体(碘克酸) 和非离子二聚体(碘曲仑、碘克沙醇等)。

经肠系膜上动脉间接门静脉造影，被认为是门静脉成像的“金标准”，它清晰地显示门静 脉系统，显示的血管图像直观，应用于诊断肝硬化、肝血管瘤、肝癌、肝移植后血管并发症、 门静脉高压症、门静脉海绵样变。但患者伴有重度肝硬化、门静脉癌栓及门静脉高压时，一 种方式通过加大造影剂剂量和注射速度，可提前门静脉显影时间，改善图像质量，但造影剂 剂量却是引起造影剂肾病的独立危险因素；另一种方式使用前列地尔，前列地尔在经肠系膜 上动脉间接门静脉造影中可通过扩张血管，发挥增加血流量、缩短造影剂到达门静脉主干时 间等作用。通过扩张血管，可使血流量增加，更多量的造影剂到达造影部位，从而得到良好 的门静脉图像。在经肠系膜上动脉性门静脉造影中，前列地尔能够改善造影效果，减少造影 剂泄露，缩短造影剂到达门静脉主干时间，并具有高安全性。

造影剂是一种高分子黏稠性很强的渗透液体，由于造影剂本身具有高渗性、化学毒性和 电荷，而前列地尔注射液是一种脂肪乳，两者相遇时，容易导致前列地尔脂肪乳乳粒增加， 甚至破乳析出，影响药物剂型的稳定性。为此，有必要制备一种配伍稳定性更好的前列地尔 组合物。

发明内容

本发明提供一种前列地尔组合物及其制备方法。

本发明的技术方案如下：

一种前列地尔组合物，包含前列地尔，注射用油，蛋黄卵磷脂，前列地尔的重量为1份， 注射用油的重量为2000～20000份，蛋黄卵磷脂的重量为1200～3600份，所述蛋黄卵磷脂中磷 脂酰胆碱(PC)的含量在96％以上，磷脂酰肌醇(PI)的含量为0.3～1.0％，且不含磷脂酰乙 醇胺(PE)。优选为蛋黄卵磷脂中磷脂酰肌醇含量为0.7～0.9％。

所述蛋黄卵磷脂中磷脂酰胆碱(PC)的含量及磷脂酰肌醇(PI)的含量均采用HPLC法 测定。

不含磷脂酰乙醇胺(PE)判断方式如下：将磷脂以10％(w/v)溶解于氯仿-甲醇混合溶 液中，采用硅胶薄层板进行分析，点样10μL，展开剂为氯仿∶甲醇∶水＝65∶25∶4，干燥后喷 茚三酮试剂，120℃加热十分钟，在同样上样的磷脂酰乙醇胺标准液检测到斑点相对应的位置 未见显色，即判定为磷脂不含磷脂酰乙醇胺。

组合物中磷脂酰乙醇胺的检测方法：在组合物(含有前列地尔5μg)中加入乙醇1mL、 二乙醚0.5mL以及石油醚0.5mL，进行搅拌。采集将其离心分离而得到的上层，利用氮馏去 溶剂。使所得的油相成分为20％(w/v)地溶解于氯仿-甲醇混合溶液，所得的溶液20μL点样 于硅胶薄层板，展开剂为氯仿∶甲醇∶水＝65∶25∶4，干燥后喷茚三酮试剂，120℃加热十分钟， 在同样上样的磷脂酰乙醇胺标准液检测到斑点相对应的位置未见显色，即判定为脂肪乳剂不 含磷脂酰乙醇胺。

所述的注射用油选自精制大豆油、花生油、红花油、棉籽油、橄榄油、椰子油、麻油、 鱼油、中链甘油单酯、中链甘油双酯、中链甘油三酯、油酸乙酯、乙酰化单甘油酯、丙二醇 双酯、亚油酸甘油酯、聚乙二醇月桂酸甘油酯或其组合，优选为橄榄油。

所述组合物为注射液，包含前列地尔，注射用油，蛋黄卵磷脂，前列地尔的重量为1份， 注射用油的重量为2000～20000份，蛋黄卵磷脂的重量为1200～3600份，注射用水的重量为 100000～200000份。所述的注射液中还含有油酸，重量份为48～480份。所述注射液中还含有 等渗调节剂甘油。

当组合物为注射液时，其制备方法包括以下步骤：

(1)水相的制备：将甘油加入水中，搅拌使其溶解，作为水相；

(2)油相的制备：注射用油中加入蛋黄卵磷脂和前列地尔，搅拌使其溶解，作为油相；

(3)初乳的制备：将步骤(2)油相加入步骤(1)水相中，高速剪切分散，形成初乳；

(4)高压匀化：将步骤(3)初乳高压匀化，得精乳；

(5)灌装：将步骤(4)精乳过滤，灌封；

(6)湿热灭菌(F₀＞8)

(7)步骤(1)至(5)均在氮气保护下操作。

步骤(3)所述的高速剪切分散时间为10～60分钟，剪切速度为3000～10000rpm，温度 55～70℃；步骤(4)所述的高压匀化压力为600～2000bar，匀化次数3～6次。步骤(6)所 述的灭菌温度为126±1℃，F₀值大于等于8。

所述的前列地尔组合物为冻干制剂，还含有冻干保护剂，冻干保护剂重量为 20000～40000份。所述的冻干保护剂选自蔗糖、乳糖、海藻糖或其组合。

当所述组合物为冻干制剂时，其制备方法如下：

(1)油相的制备：注射用油中加入蛋黄卵磷脂和前列地尔，搅拌使其溶解，作为油相；

(2)水相的制备：将冻干保护剂加入水中，搅拌使其溶解，作为水相；

(3)初乳的制备：将步骤(1)油相加入步骤(2)水相中，高速剪切分散，形成初乳；

(4)高压匀化：将步骤(3)初乳，高压匀化，得精乳；

(5)无菌灌装：将步骤(4)精乳经0.22μm微孔滤膜过滤除菌，无菌灌封至西林瓶中；

(6)冷冻干燥：将步骤(5)西林瓶中样品冷冻干燥，即得。

步骤(3)所述的高速剪切分散时间为10～60分钟，剪切速度为3000～10000rpm，温度 55～70℃；步骤(4)所述的高压匀化压力为600～2000bar，匀化次数3～6次，温度15～30℃。 步骤(6)所述的真空冷冻干燥为，将样品快速冷冻至温度-50～-45℃，维持1～3小时；一 次干燥温度-35～-30℃，一次干燥时间24～48小时；二次干燥温度25～40℃，二次干燥时间 2～6小时。

本发明意外的发现，所制备的前列地尔组合物与造影剂具有更好的配伍稳定性。

具体实施例

对比实施例1

处方：

工艺：

(1)水相的制备：将处方量甘油加入水中溶解，加热至60℃，备用；

(2)油相的制备：将处方量精制大豆油加热至60℃，加入处方量蛋黄卵磷脂(PC含量 98％，PI含量小于0.1％，不含PE)，油酸和前列地尔，搅拌使其溶解；

(3)初乳的制备：将步骤(2)油相加入步骤(1)水相中，温度60℃，高速剪切分散， 剪切速度10000rpm，时间15分钟，形成初乳；

(4)精乳的制备：将步骤(3)初乳用0.1M NaOH调pH5.4～5.6，经微射流仪高压匀化 3次，压力1000～1200bar；

(5)灌装：将步骤(4)精乳经0.45μm微孔滤膜过滤，灌封；

(6)126±1℃湿热灭菌(F₀＞8)；

(7)步骤(1)至(5)均在氮气保护下操作。

对比实施例2

处方：

工艺：

(1)水相的制备：将蔗糖加入水中溶解，加热至65℃，备用；

(2)油相的制备：将精制大豆油加热至65℃，分别加入蛋黄卵磷脂(PC含量98％， PI含量小于0.1％，不含PE)，油酸溶解，加入前列地尔，搅拌使其溶解；

(3)初乳的制备：将步骤(2)油相加入步骤(1)水相中，温度65℃，高速剪切分散， 剪切速度10000rpm，时间15分钟，形成初乳

(4)高压匀化：将步骤(3)初乳调pH至5.0-7.0，经微射流仪高压匀化3次，压力1000～ 1200bar；

(5)初滤：将步骤(4)精乳经0.45μm滤膜初滤；

(6)无菌过滤：将步骤(5)制得乳剂经0.22μm微孔滤膜过滤除菌，无菌灌封

(7)冷冻干燥：将步骤(6)所得样品冷冻干燥，将样品快速冷冻至温度-45℃，升温至 -35℃，维持3小时；一次干燥温度-30℃，一次干燥时间24小时；二次干燥温度30℃，二次 干燥时间6小时，即得前列地尔冻干乳。

实施例1

处方：

工艺：

(1)水相的制备：将处方量甘油加入水中溶解，加热至60℃，备用；

(2)油相的制备：将处方量精制大豆油加热至60℃，加入处方量蛋黄卵磷脂(磷脂酰 胆碱97％，磷脂酰肌醇0.5％，不含磷脂酰乙醇胺)，油酸和前列地尔，搅拌使其溶解；

(3)初乳的制备：将步骤(2)油相加入步骤(1)水相中，温度60℃，高速剪切分散， 剪切速度10000rpm，时间15分钟，形成初乳；

(4)精乳的制备：将步骤(3)初乳用0.1M NaOH调pH5.4～5.6，经微射流仪高压匀化 3次，压力1000～1200bar；

(5)灌装：将步骤(4)精乳经0.45μm微孔滤膜过滤，灌封；

(6)126±1℃湿热灭菌(F₀＞8)；

(7)步骤(1)至(5)均在氮气保护下操作。

实施例2

处方：

工艺：

(1)水相的制备：将处方量甘油加入水中溶解，加热至60℃，备用；

(2)油相的制备：将处方量精制大豆油加热至60℃，加入处方量蛋黄卵磷脂(磷脂酰 胆碱97％，磷脂酰肌醇0.9％，不含磷脂酰乙醇胺)，前列地尔，搅拌使其溶解；

(3)初乳的制备：将步骤(2)油相加入步骤(1)水相中，温度60℃，高速剪切分散， 剪切速度10000rpm，时间15分钟，形成初乳；

(4)精乳的制备：将步骤(3)初乳用0.1M NaOH调pH5.4～5.6，经微射流仪高压匀化 3次，压力1000～1200bar；

(5)灌装：将步骤(4)精乳经0.45μm微孔滤膜过滤，无菌灌封；

(6)126±1℃湿热灭菌(F₀＞8)；

(7)步骤(1)至(5)均在氮气保护下操作。

实施例3

处方：

工艺：

(1)水相的制备：将蔗糖加入水中溶解，加热至65℃，备用；

(2)油相的制备：将精制大豆油加热至65℃，分别加入蛋黄卵磷脂(PC含量97％， PI含量0.3％，不含PE)，油酸溶解，加入前列地尔，搅拌使其溶解；

(3)初乳的制备：将步骤(2)油相加入步骤(1)水相中，温度65℃，高速剪切分散， 剪切速度10000rpm，时间15分钟，形成初乳

(4)高压匀化：将步骤(3)初乳调pH至5.0-7.0，经微射流仪高压匀化3次，压力1000～ 1200bar；

(5)初滤：将步骤(4)精乳经0.45μm滤膜初滤；

(6)无菌过滤：将步骤(5)制得乳剂经0.22μm微孔滤膜过滤除菌，无菌灌封

(7)冷冻干燥：将步骤(6)所得样品冷冻干燥，将样品快速冷冻至温度-45℃，升温至 -35℃，维持3小时；一次干燥温度-30℃，一次干燥时间24小时；二次干燥温度30℃，二次 干燥时间6小时，即得前列地尔冻干乳。

实施例4

处方：

工艺：

(1)水相的制备：将蔗糖加入水中溶解，加热至65℃，备用；

(2)油相的制备：将精制大豆油加热至65℃，分别加入蛋黄卵磷脂(PC含量97％， PI含量0.7％，不含PE)，前列地尔，搅拌使其溶解；

(3)初乳的制备：将步骤(2)油相加入步骤(1)水相中，温度65℃，高速剪切分散， 剪切速度10000rpm，时间15分钟，形成初乳

(4)高压匀化：将步骤(3)初乳调pH至5.0-7.0，经微射流仪高压匀化3次，压力1000～ 1200bar；

(5)初滤：将步骤(4)精乳经0.45μm滤膜初滤；

(6)无菌过滤：将步骤(5)制得乳剂经0.22μm微孔滤膜过滤除菌，无菌灌封

(7)冷冻干燥：将步骤(6)所得样品冷冻干燥，将样品快速冷冻至温度-45℃，升温至 -35℃，维持3小时；一次干燥温度-30℃，一次干燥时间24小时；二次干燥温度30℃，二次 干燥时间6小时，即得前列地尔冻干乳。

测试实施例1

取本品2ml(冻干制剂先用注射用水复溶后取样)，与海赛显320(碘克沙酸)配伍，观 察不同时间的外观及平均粒径

检查方法：动态激光散射粒径测定法

具体试验操作：取本品0.1ml，加纯化水(预先用孔径0.22μm的膜过滤)稀释5000倍， 混匀，做为供试液，用动态激光散射粒径测定法测定，乳粒的平均粒径应为0.12～0.28μm。

检测结果：平均粒径

结果表明，对比实施例1和对比实施例2配伍后0.5小时平均粒径已经超过0.28μm，且 1小时出现絮凝现象，故不再测试粒径。

与对比实施例1-2相比，实施例1～4可增加与造影剂配伍稳定性。

测试实施例2稳定性试验

将上述制备的注射液样品在25度条件下放置，在第7天，28天取样测定含量，与0天 的含量为参比，计算含量下降百分率(％)。

将上述制备的冻干样品在40℃条件下放置，在第10天，30天取样测定含量，与0天的 含量为参比，计算含量下降百分率(％)。

含量测定方法：柱后衍生+HPLC法

色谱条件：

色谱柱：C₁₈柱(型号：YMC；250×4.6mm，5μm)

流动相：0.0067mol/L磷酸盐缓冲液(pH为6.3)(取磷酸二氢钾9.07g，加水使溶解，制 成1000ml，另取无水磷酸氢二钠9.46g，加水使溶解，制成1000ml，将后者加到前者中，直 至pH为6.3，取此液100ml加水至1000ml，摇匀，即得)-乙腈(3∶1)。

进样量：20μl；流速：1.0ml/min；检测波长：278nm；柱温：60℃

柱后反应管：聚四氟乙烯管()

柱后反应液：1mol/L氢氧化钾溶液

反应液流速：0.5ml/min

具体试验操作：

供试品溶液制备：精密量取本品1ml，精密加入1ml的内标溶液，摇匀，作为供试品溶 液；

内标溶液的制备：取α-萘酚约62.5mg，精密称定，置25ml量瓶中，加无水乙醇溶解并 稀释至刻度，精密量取3ml，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为内标溶液。

对照品溶液的制备：取前列地尔对照品约10mg，精密称定，置100ml量瓶中，加无水乙 醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，精密 量取1ml，精密加入1ml内标溶液，作为对照品溶液。

测定法：精密量取供试品溶液和对照品溶液各20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，按内 标法以峰面积计算，即得。

试验结果：

25℃条件下含量下降百分率(％)

40℃条件下含量下降百分率(％)

结果表明：蛋黄卵磷脂中含有磷脂酰肌醇0.3％以上，有助于提高药物的稳定性。

以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体 细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单 变型均属于本发明的保护范围。

另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情 况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组 合方式不再另行说明。

此外，本发明的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要其不违背本发明的 思想，其同样应当视为本发明所公开的内容。