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一种乙脑病毒SA14-14-2的克隆方法及应用

摘要

本发明提供了一种乙脑病毒SA14‑14‑2的克隆方法:根据NCBI公布的D90195.1基因序列为参照分别合成6段基因序列,利用同源重组技术通过相应酶切位点将合成序列依次克隆至线性化载体中,获得乙脑病毒SA14‑14‑2的全长克隆。本发明采用同源重组技术,可简单、快速并且高效的将插入片段定向克隆至载体任意位点。仅需将插入片段正/反向引物5’端引入线性化载体的末端序列,使之包含载体的同源臂,后按一定比例混合,在重组酶催化下,37℃反应30min即可完成,极大的节约了连接时间。同时由于独特的非连接酶依赖体系,极大降低了载体自连背景,同时对杂质的耐受度增加,提高了其阳性率并简化了实验步骤。

著录项

法律信息

  • 法律状态公告日

    法律状态信息

    法律状态

  • 2020-02-04

    实质审查的生效 IPC(主分类):C12N15/70 申请日:20191016

    实质审查的生效

  • 2020-01-07

    公开

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