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一种高通量筛选真核生物必需基因和生长抑制基因的方法

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本发明涉及一种一种高通量筛选真核生物必需基因和生长抑制基因的方法，首先建立真核生物CRISPR/Cas全基因组编辑载体文库，然后将载体文库转染真核细胞，之后将细胞均匀的分成两部分，一部分直接收细胞，抽提基因组备用，一部分培养约1个月后，收细胞，抽提基因组备用，另一部分培养约2个月后，收细胞，抽提基因组备用。通过PCR扩增方法和高通量测序技术，对三组细胞的sgRNA丰度进行比较，最后分析出真核生物的必需基因和生长抑制基因。本发明的载体文库的递送系统是piggyBac转座子系统，不需要包装病毒，可直接转染真核生物细胞，极大的节省了成本，对于研究真核生物必需基因和生长抑制基因具有极大的推动作用。

著录项

公开/公告号CN111534577A

专利类型发明专利
公开/公告日2020-08-14

原文格式PDF
申请/专利权人西南大学;
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申请/专利号CN202010379323.1
发明设计人马三垣;常珈菘;夏庆友;
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申请日2020-05-07
分类号C12Q1/6869(20180101);C12N15/90(20060101);C12N15/85(20060101);
代理机构11275 北京同恒源知识产权代理有限公司;
代理人赵荣之
地址 400715 重庆市北碚区天生路2号
入库时间 2023-12-17 11:07:24

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2020-08-14

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