(A)磷酸肌醇3-激酶抑制剂和(B)RAS/RAF/MEK通路调节剂的组合产品

本发明涉及一种药物组合产品，其包含(a)磷酸肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂化合物和(b)调节Ras/Raf/Mek通路的化合物，并且任选包含至少一种可药用载体，用于同时、分别或相继使用，特别是用于治疗增殖性疾病，尤其是其中Ras/Raf/MeK和PI3K/Akt通路同时失调的增殖性疾病；包含这种组合产品的药物组合物；这种组合产品在制备用于治疗增殖性疾病的药剂中的用途；用于同时、分别或相继使用的组合制剂形式的包含这种组合产品的商业包装或产品；以及治疗温血动物、尤其是人的方法。

WO2006/122806描述了咪唑并喹啉衍生物，其已经被描述能抑制脂激酶(lipid kinase)如PI3-激酶的活性。适合用于本发明的具体的咪唑并喹啉衍生物、它们的制备和含有所述咪唑并喹啉衍生物的适合的药物制剂在WO2006/122806中有描述，包括式I的化合物或其互变异构体或其可药用盐或水合物或溶剂合物：

其中

R₁是萘基或苯基，其中所述苯基被一个或两个独立地选自以下的取代基取代：卤素；未被取代的或被卤素、氰基、咪唑基或三唑基取代的低级烷基；环烷基；被一个或两个独立地选自低级烷基、低级烷基磺酰基、低级烷氧基和低级烷氧基低级烷基氨基的取代基取代的氨基；未被取代的或被一个或两个独立地选自低级烷基和低级烷基磺酰基的取代基取代的哌嗪基；2-氧代-吡咯烷基；低级烷氧基低级烷基；咪唑基；吡唑基；和三唑基；

R₂是O或S；

R₃是低级烷基；

R₄是未被取代的或被卤素、氰基、低级烷基、低级烷氧基或未被取代的或被低级烷基取代的哌嗪基取代的吡啶基；未被取代的或被低级烷氧基取代的嘧啶基；未被取代的或被卤素取代的喹啉基；喹喔啉基；或被烷氧基取代的苯基；

R₅是氢或卤素；

n是0或1；

R₆是氧化；

条件是如果n＝1，则带有基团R₆的N原子具有正电荷；

R₇是氢或氨基。

在式I化合物的定义中使用的基团和符号具有WO2006/122806中所公开的含义，在此将该公开物通过引用并入本申请。

本发明优选的化合物是WO2006/122806中具体描述的化合物。本发明非常优选的化合物是2-甲基-2-[4-(3-甲基-2-氧代-8-喹啉-3-基-2，3-二氢-咪唑并[4，5-c]喹啉-1-基)-苯基]-丙腈以及它的单甲苯磺酸盐(化合物A)。2-甲基-2-[4-(3-甲基-2-氧代-8-喹啉-3-基-2，3-二氢-咪唑并[4，5-c]喹啉-1-基)-苯基]-丙腈的合成例如在WO2006/122806中作为实施例1被描述。本发明的另一个非常优选的化合物是8-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-3-甲基-1-(4-哌嗪-1-基-3-三氟甲基-苯基)-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]喹啉-2-酮(化合物B)。8-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-3-甲基-1-(4-哌嗪-1-基-3-三氟甲基-苯基)-1，3-二氢-咪唑并[4，5-c]喹啉-2-酮的合成例如在WO2006/122806中作为实施例86被描述。

WO07/084786描述了嘧啶衍生物，已经发现它们具有脂激酶如PI3-激酶的活性。适合用于本发明的具体的嘧啶衍生物、它们的制备以及含有所述嘧啶衍生物的合适的药物制剂在WO07/084786中有描述，包括下式的化合物：

或其立体异构体、互变异构体或可药用盐，其中W是CR_w或N，其中R_w选自

(1)氢，

(2)氰基，

(3)卤素，

(4)甲基，

(5)三氟甲基，

(6)磺酰胺基(sulfonamido)；

R₁选自

(1)氢，

(2)氰基，

(3)硝基，

(4)卤素，

(5)被取代的和未被取代的烷基，

(6)被取代的和未被取代的链烯基，

(7)被取代的和未被取代的炔基，

(8)被取代的和未被取代的芳基，

(9)被取代的和未被取代的杂芳基，

(10)被取代的和未被取代的杂环基，

(11)被取代的和未被取代的环烷基，

(12)-COR_1a，

(13)-CO₂R_1a，

(14)-CONR_1aR_1b，

(15)-NR_1aR_1b，

(16)-NR_1aCOR_1b，

(17)-NR_1aSO₂R_1b，

(18)-OCOR_1a，

(19)-OR_1a，

(20)-SR_1a，

(21)-SOR_1a，

(22)-SO₂R_1a，和

(23)-SO₂NR_1aR_1b，

其中R_1a和R_1b独立地选自

(a)氢，

(b)被取代的或未被取代的烷基，

(c)被取代的和未被取代的芳基，

(d)被取代的和未被取代的杂芳基，

(e)被取代的和未被取代的杂环基，和

(f)被取代的和未被取代的环烷基；

R₂选自

(1)氢，

(2)氰基，

(3)硝基，

(4)卤素，

(5)羟基，

(6)氨基，

(7)被取代的和未被取代的烷基，

(8)-COR_2a，和

(9)-NR_2aCOR_2b，

其中R_2a和R_2b独立地选自

(a)氢，和

(b)被取代的或未被取代的烷基；

R₃选自

(1)氢，

(2)氰基，

(3)硝基，

(4)卤素，

(5)被取代的和未被取代的烷基，

(6)被取代的和未被取代的链烯基，

(7)被取代的和未被取代的炔基，

(8)被取代的和未被取代的芳基，

(9)被取代的和未被取代的杂芳基，

(10)被取代的和未被取代的杂环基，

(11)被取代的和未被取代的环烷基，

(12)-COR_3a，

(13)-NR_3aR_3b，

(14)-NR_3aCOR_3b，

(15)-NR_3aSO₂R_3b，

(16)-OR_3a，

(17)-SR_3a，

(18)-SOR_3a，

(19)-SO₂R_3a，和

(20)-SO₂NR_3aR_3b，

其中R_3a和R_3b独立地选自

(a)氢，

(b)被取代的或未被取代的烷基，

(c)被取代的和未被取代的芳基，

(d)被取代的和未被取代的杂芳基，

(e)被取代的和未被取代的杂环基，和

(f)被取代的和未被取代的环烷基；和

R₄选自

(1)氢，和

(2)卤素。

在式I化合物的定义中使用的基团和符号具有WO07/084786中所公开的含义，在此将该公开物通过引用并入本申请。

本发明优选的化合物是WO07/084786中具体描述的化合物。本发明非常优选的化合物是5-(2，6-二-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-4-三氟甲基-吡啶-2-基胺(化合物C)。5-(2，6-二-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-4-三氟甲基-吡啶-2-基胺的合成在WO07/084786中作为实施例10被描述。

通过RTK与它们各自的同源配体的初始细胞外结合和RTK被它们各自的同源配体刺激Ras/Raf/Mek信号转导通路被活化。在RTK的胞质域中的特定酪氨酸残基自磷酸化后，Grb2-Sos复合物易位到质膜，将无活性的Ras.GDP转化为活性的Ras.GDP。Grb2与活化的激酶或磷酸化的受体相关蛋白之间的相互作用是由识别特定磷酸酪氨酸序列的信号蛋白的SH2结构域介导的。Ras在GTP结合后经历构象变化并且引起Raf-1募集到细胞质膜，在此处Raf-1被几种激酶磷酸化并且同时在关键残基处被蛋白磷酸酶-2B二磷酸化。活化的Raf磷酸化活化环中两个丝氨酸残基上的Mek，这导致该蛋白激酶活化。然后Mek使Erk磷酸化和活化，使得它易位到细胞核中，在此处它磷酸化转录因子，从而使各种基因表达。如该部分所示，Raf/Mek/Erk级联的几个组分代表癌症治疗的独特机会，例如基因改变如HRAS、KRAS、NRAS或BRAF突变或基因扩增。

索拉非尼(sorafenib)也被称为Nexavar^TM或BAY 43-9006，是第一个得到上市批准用于治疗晚期肾细胞癌(RCC)的Raf激酶调节剂。索拉非尼是以下结构的二芳基脲衍生物：

索拉非尼及其制备方法已经例如在US7235576或US7351834中描述。

RAF265(以前被称为CHIR-265)是以下结构的另一种口服生物可利用的Raf调节剂：

RAF265以及它的制备方法例如在WO07/030377中有描述。

另外的Raf激酶调节剂包括例如SB590885、XL281、PLX4032。

Mek激酶调节剂包括WO02/06213中描述的化合物，特别是具有以下结构的化合物PD-0325901：

另一种有关的Mek激酶抑制剂是化合物PD-181461。

另外的Mek激酶调节剂包括WO03/077914中描述的化合物，特别是以下结构的化合物ARRY142886/AZD6244：

和ARRY-509以及WO05/051906、WO05/023251、WO03/077855和US20050049419中描述的作为MEK抑制剂用于治疗过度增殖性疾病的涵盖N3-烷基化苯并咪唑的化合物和其它类似的杂环衍生物。

另外的Mek激酶调节剂包括例如XL518、JTP-74057、AS-701255、AS-701173。

因此，本发明还涉及一种组合产品，如组合制剂或药物组合物，其包含(a)磷酸肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂化合物和(b)调节Ras/Raf/Mek通路的化合物。更具体而言，在第一个实施方案中，本发明涉及一种组合产品，其包含(a)磷酸肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂化合物和(b)Raf激酶调节剂或Mek激酶调节剂。

本文所用的术语“组合制剂”尤其定义了“套药盒(kit of parts)”，含义是上文所定义的组合成员(a)和(b)可以被独立地给药或者通过使用具有不同量的组合成员(a)和(b)的不同的固定组合产品给药，即同时或在不同的时间点给药。然后套药盒中的各部分能例如同时施用或按时间顺序错开施用，即在不同的时间点并且以相等或不同的时间间隔施用套药盒中的任意部分。能改变组合制剂中待施用的组合成员(a)与组合成员(b)的总量的比例，例如以便符合待治疗的患者亚群的需要或单个患者的需要。

已经发现用PI3K抑制剂和raf激酶或mek激酶抑制剂进行的组合治疗在肿瘤疾病的治疗中导致意料不到的改善。当同时、顺序或分别施用时，PI3K抑制剂和raf激酶或mek激酶抑制剂以协同方式相互作用，从而抑制细胞增殖。该意料不到的协同作用使得每种化合物的所需剂量减少，从而导致副作用减少以及化合物和治疗的临床有效性增加。

在确定一种或多种组分之间的协同相互作用时，可以通过将各组分以不同w/w比例范围和剂量施用于需要治疗的患者来确定地测量实现效果的最佳范围和实现效果的每种组分的绝对剂量范围。对于人而言，用患者进行临床研究的复杂性和成本使得使用这种形式的试验作为首要的协同作用模型不切实际。但是，在一个物种中的协同作用观察结果能预测在其它物种中的作用，如本文所述，存在测定协同作用的动物模型，通过应用药动学/药效学方法这类研究的结果也能用于预测在其它物种中所需的有效剂量和血浆浓度比例范围以及绝对剂量和血浆浓度。已确立的肿瘤模型与在人中看到的效果之间的关系表明在动物中的协同作用可以例如在下文实施例中所述的BN472肿瘤模型或胰腺PANC1和MiaPaCa2肿瘤模型中证明。

在一个方面，本发明提供了一种用于人施用的协同作用组合产品，其以对应于在用于鉴定协同相互作用的肿瘤模型例如下文实施例中所述的肿瘤模型中观察到的范围的组合范围(w/w)包含(a)PI3K抑制剂化合物和(b)调节Ras/Raf/Mek通路的化合物，或其可药用的盐或溶剂合物。适合地，在人中的比例范围对应于选自50∶1至1∶50重量份、50∶1至1∶20、50∶1至1∶10、50∶1至1∶1、20∶1至1∶50、20∶1至1∶20、20∶1至1∶10、20∶1至1∶1、10∶1至1∶50、10∶1至1∶20、10∶1至1∶10、10∶1至1∶1、1∶1至1∶50、1.1至1∶20和1∶1至1∶10的非人范围。更适合地，人范围对应于10∶1至1∶1或5∶1至1∶1或2∶1至1∶1重量份级别的非人范围。

根据另一个方面，本发明提供了一种用于施用于人的协同作用组合产品，其包含(a)PI3K抑制剂化合物和(b)调节Ras/Raf/Mek通路的化合物或其可药用盐，其中每种组分的剂量范围对应于在主要用于鉴定协同相互作用的适合的肿瘤模型例如下文实施例中所述的肿瘤模型中观察到的协同作用范围。适合地，PI3K抑制剂化合物在人中的剂量范围对应于在适合的肿瘤模型例如下文实施例中所述的大鼠或小鼠模型中的1-50mg/kg、更适合地1-30mg/kg(例如对于化合物A是1-35mg/kg或1-10mg/kg，对于化合物B是1-25mg/kg)的剂量范围。

对于调节Ras/Raf/Mek通路的化合物，在人中的剂量范围适合地对应于在适合的肿瘤模型例如下文实施例中所述的大鼠或小鼠模型中的1-50mg/kg或1-30mg/kg(例如1-25mg/kg、1-10mg/kg或1-2.5mg/kg)的协同作用范围。

适合地，用于人的PI3K抑制剂化合物的剂量在选自1-1200mg、1-500mg、1-100mg、1-50mg、1-25mg、500-1200mg、100-1200mg、100-500mg、50-1200mg、50-500mg或50-100mg、适合地50-100mg的范围内，每天一次或每天两次(b.i.d.)或每天三次(t.i.d.)，调节Ras/Raf/Mek通路的化合物的剂量在选自1-1000mg、1-500mg、1-200mg、1-100mg、1-50mg、1-25mg、10-100mg、10-200mg、50-200mg或100-500mg的范围内，每天一次、b.i.d或t.i.d。

根据又一个方面，本发明提供了用于施用于人的协同作用组合产品，其包含(a)10％-100％、优选50％-100％或更优选70％-100％、80％-100％或90％-100％最大耐受剂量(MTD)的PI3K抑制剂化合物和(b)10％-100％、优选50％-100％或更优选70％-100％、80％-100％或90％-100％MTD的调节Ras/Raf/Mek通路的化合物。在一个优选的实施方案中，化合物中的一个、优选PI3K抑制剂化合物以MTD给药，另一个化合物、优选调节Ras/Raf/Mek通路的化合物以50％-100％MTD、优选60％-90％MTD给药。MTD对应于能给予而没有不可接受的副作用的最高药物剂量。确定MTD在现有技术的范围内。例如，可以在I期研究(包括表征限制剂量的毒性和确定生物学活性耐受剂量水平的剂量递增试验)中适当地确定MTD。

在本发明的一个实施方案中，(a)磷酸肌醇3-激酶(PI3K)抑制剂化合物选自化合物A、化合物B或化合物C。

在本发明的一个实施方案中，(b)Raf激酶调节剂选自索拉非尼、Raf265、SB590885、XL281和PLX4032。在另一个实施方案中，(b)Mek激酶调节剂选自PD325901、PD-181461、ARRY142886/AZD6244、ARRY-509、XL518、JTP-74057、AS-701255、AS-701173、AZD8330、ARRY162、ARRY300、RDEA436、E6201、RO4987655/R-7167、GSK1120212和AS703026。

本文所用的术语“治疗”包括引起疾病进展延缓的治疗。本文所用的术语“进展延缓”或“延缓......进展”意指将所述组合产品施用于处于待治疗的增殖性疾病前阶段(pre-stage)或早期的患者，其中所述患者例如被诊断为相应疾病前形式(pre-form)或者所述患者处于例如医学治疗期间的状况或由意外导致的状况，在这些状况下可能将发生相应的疾病。

在本发明的一个实施方案中，所述增殖性疾病是黑素瘤、肺癌、结肠直肠癌(CRC)、乳腺癌、肾癌例如肾细胞癌(RCC)、肝癌、急性髓性白血病(AML)、骨髓增生异常综合征(MDS)、非小细胞肺癌(NSCLC)、甲状腺癌、胰腺癌、神经纤维瘤病或肝细胞癌。

在本发明的另一个实施方案中，所述增殖性疾病是实体瘤。术语“实体瘤”尤其指乳腺癌、卵巢癌、结肠癌和通常是GI(胃肠)道癌、宫颈癌、肺癌、特别是小细胞肺癌和非小细胞肺癌、头颈癌、膀胱癌、前列腺癌或卡波西肉瘤。本发明的组合产品不仅抑制实体瘤的生长，而且抑制液体瘤的生长。而且，根据肿瘤类型和所用的具体组合产品，能实现肿瘤体积的减小。本文所公开的组合产品还适于防止肿瘤的转移扩散以及微小转移灶的生长和发展。本文所公开的组合产品特别适合用于治疗预后不良的患者，尤其是患有转移性黑素瘤或胰腺癌的这类预后不良的患者。

待治疗的癌症可以在Ras/Raf/Mek信号转导通路中具有基因改变，例如HRAS、KRAS、NRAS或BRAF突变或基因扩增。在一个实施方案中，待治疗的癌症具有KRAS突变，例如KRAS突变的胰腺癌、结肠癌、肺癌(例如NSCLC)或白血病。

可以从现行版本的标准目录“默克索引(The Merck Index)”或从数据库例如Patents International(例如IMS World Publications)得到由编号、通用名或商品名确定的活性剂的结构。在此将其相应的内容通过引用方式并入。

应当理解的是，对组合成员(a)和(b)的提及还包括可药用盐。如果这些组合成员(a)和(b)具有例如至少一个碱性中心，则它们能形成酸加成盐。如果需要，也能形成具有另外存在的碱性中心的相应的酸加成盐。具有酸性基团(例如COOH)的组合成员(a)和(b)也能与碱形成盐。组合成员(a)或(b)或其可药用盐也可以以水合物的形式被使用或者包括其它用于结晶的溶剂。

包含(a)磷酸肌醇3-激酶抑制剂化合物和(b)调节Ras/Raf/Mek通路的化合物(其中在每种情况下活性成分以游离形式或以可药用盐形式存在)并且任选包含至少一种可药用载体的组合产品在下文将被称为“本发明的组合产品”。

本发明的组合产品在有效性和安全性方面均具有协同和相加优点。磷酸肌醇3-激酶抑制剂化合物与调节Ras/Raf/Mek通路的化合物的组合产品的疗效能导致组合产品中每种组分的安全剂量范围更低。

本发明的组合产品的药理学活性可以例如在临床研究中或在下文主要描述的试验操作中被证明。适合的临床研究是例如在患有晚期实体瘤的患者中进行的开放标签的非随机化的剂量递增研究。此类研究能证明本发明的组合产品的活性成分的相加或协同作用。能直接通过这些研究的结果或通过对于本领域技术人员已知的研究设计中的变化确定对增殖性疾病的有益效果。这类研究特别适合用于比较使用活性成分的单一药物治疗的效果和本发明的组合产品的效果。优选地，以固定剂量施用组合成员(a)，逐渐增加组合成员(b)的剂量直到达到最大耐受剂量。

本发明的一个目的是提供包含本发明的组合产品的包含对抗增殖性疾病治疗有效量的药物组合物。在该组合物中，组合成员(a)和(b)可以在一个组合单位剂型中或在两个独立的单位剂型中一起、相继或分别施用。所述单位剂型也可以是固定组合产品。

本发明的药物组合物可以以本身已知的方式制备，是适合于肠内例如口服或直肠以及胃肠外施用于包括人在内的哺乳动物(温血动物)的那些。或者，当药物分别施用时，一个药物可以是肠内制剂，另一个药物可以被胃肠外施用。

所述新药物组合物含有例如约10％至约100％、优选约20％至约60％活性成分。用于肠内或胃肠外施用的组合治疗的药物制剂是例如单位剂型，例如糖包衣片剂、片剂、胶囊剂或栓剂，并且还有安瓿剂。如果没有另外说明，则这些制剂通过本身已知的方式例如通过常规的混合、制粒、糖包衣、溶解或冻干过程制备。应当理解的是，每个剂型的单个剂量中所含有的组合成员的单位含量本身不需要构成有效量，因为可以通过施用多个剂量单位达到必需的有效量。

在制备用于口服剂型的组合物时，可以使用任何通常的药物介质，例如水、二醇、油、醇、矫味剂、防腐剂、着色剂；或者在口服固体制剂例如散剂、胶囊剂和片剂的情况下，载体，例如淀粉、糖、微晶纤维素、稀释剂、制粒剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂等，固体口服制剂优选于液体制剂。因为它们易于施用，所以片剂和胶囊剂代表最有利的口服单位剂型，在这种情况下显然使用固体药物载体。

具体而言，治疗有效量的本发明的组合产品中的每个组合成员可以同时或者相继且以任何顺序施用，组分可以分别施用或以固定组合产品的形式施用。例如，本发明的延缓增殖性疾病进展或治疗增殖性疾病的方法可以包括以联合治疗有效量、优选以协同有效量同时或以任何顺序相继(i)施用游离形式或可药用盐形式的第一组合成员和(ii)施用游离形式或可药用盐形式的第二组合成员。本发明的组合产品中的各组合成员可以在治疗过程中的不同时间分别施用或者以分开的或单个的组合形式并行(concurrently)施用。此外，术语“施用”还包括使用组合成员的前药，其在体内转化为组合成员本身。因此，应当理解本发明包括所有这类同时或交替治疗的方案，并且应相应地解释术语“施用”。

本发明的组合产品可以是组合制剂或药物组合物。

而且，本发明还涉及治疗患有增殖性疾病的温血动物的方法，其包括将本发明的组合产品以对抗所述增殖性疾病的治疗有效量施用于动物。

此外，本发明还涉及本发明的组合产品用于治疗增殖性疾病的用途和在制备用于治疗增殖性疾病的药剂中的用途。

而且，本发明还提供了一种商业包装产品，其包含作为活性成分的本发明的组合产品，以及其在延缓增殖性疾病进展或治疗增殖性疾病中同时、分别或相继使用的说明书。

本发明的优选实施方案是包含以下组分的组合产品

·化合物A、化合物B或化合物C和索拉非尼，

·化合物A、化合物B或化合物C和RAF265。

在另一个优选的实施方案中，本发明提供了包括以下组分的组合产品

·化合物A和索拉非尼、Raf265、SB590885、XL281或PLX4032，

·化合物B和索拉非尼、Raf265、SB590885、XL281或PLX4032，

·化合物C和索拉非尼、Raf265、SB590885、XL281或PLX4032，

·化合物A和PD325901、PD-181461、ARRY142886/AZD6244、ARRY-509、XL518、JTP-74057、AS-701255、AS-701173、AZD8330、ARRY162、ARRY300、RDEA436、E6201、RO4987655/R-7167、GSK1120212或AS703026，

·化合物B和PD325901、PD-181461、ARRY142886/AZD6244、ARRY-509、XL518、JTP-74057、AS-701255、AS-701173、AZD8330、ARRY162、ARRY300、RDEA436、E6201、RO4987655/R-7167、GSK1120212或AS703026，

·化合物C和PD325901、PD-181461、ARRY142886/AZD6244、ARRY-509、XL518、JTP-74057、AS-701255、AS-701173、AZD8330、ARRY162、ARRY300、RDEA436、E6201、RO4987655/R-7167、GSK1120212或AS703026。

在另外一些方面，本发明提供了

·一种组合产品，其包含(a)本发明的组合产品，其中在每种情况下活性成分以游离形式或以其可药用盐或任意水合物的形式存在，并且任选包含至少一种可药用载体；用于同时、分别或相继使用；

·一种药物组合物，其包含对抗增殖性疾病联合治疗有效量的本发明的组合产品和至少一种可药用载体；

·本发明的组合产品用于治疗增殖性疾病的用途；

·本发明的组合产品在制备用于治疗增殖性疾病的药剂中的用途；

·本发明的组合产品的用途，其中PI3K抑制剂选自化合物A、化合物B或化合物C；

·本发明的组合产品的用途，其中调节Ras/Raf/Mek通路的化合物是调节Raf激酶活性的化合物，例如索拉非尼、RAF265、SB590885、XL281、PLX4032；和

·本发明的组合产品的用途，其中调节Ras/Raf/Mek通路的化合物是调节Mek激酶活性的化合物，例如PD325901、PD-181461、ARRY 142886/AZD6244、ARRY-509、XL518、JTP-74057、AS-701255、AS-701173、AZD8330、ARRY162、ARRY300、RDEA436、E6201、RO4987655/R-7167、GSK1120212或AS703026。

而且，特定地，本发明还涉及一种组合制剂，其包含(a)磷酸肌醇3-激酶抑制剂化合物的一个或多个单位剂型和(b)调节Ras/Raf/Mek通路的化合物。

此外，特定地，本发明还涉及包含(a)磷酸肌醇3-激酶抑制剂化合物和(b)调节Ras/Raf/Mek通路的化合物的组合产品在制备用于治疗增殖性疾病的药剂中的用途。

本发明的组合产品中使用的每个组合成员的有效剂量可以根据所使用的具体化合物或药物组合物、施用方式、待治疗的病症、待治疗的病症的严重程度而变化。因此，根据包括施用途径以及患者的肾和肝功能在内的多种因素选自本发明的组合产品的剂量方案。普通技术的内科医生、临床医生或兽医能容易地确定和开具防止、对抗或阻止病症的进展所需的单个活性成分的有效量。获得产生功效但无毒性的范围内的活性成分浓度的最佳精确度需要基于活性成分对靶标部位的利用度的动力学的方案。

当本发明的组合产品中所用的组合成员以市售形式作为单一药物应用时，根据各个市售药物的包装说明书上提供的信息确定它们的剂量和施用方式，以便产生本文所述的有益效果，本文另有说明的除外。

化合物A可以以约50-800mg/天的剂量范围施用于人。

化合物B可以以约25-800mg/天的剂量范围施用于人。

化合物C可以以约25-800mg/天的剂量范围施用于人。

索拉非尼可以以约75-800mg/天的剂量范围、更优选每天两次400mg施用于人。

以下实施例举例说明了上面描述的发明；但是，它们不用于以任何方式限制本发明的范围。本发明的组合产品的有益效果也可以通过相关领域的技术人员已知的其它试验模型来确定。

附图说明

图1：将A549细胞与单独的或组合的化合物A、PD03251901(250nM)一起孵育30分钟。然后收获细胞，通过常规蛋白质印迹法进行Akt、p70S6K或ERK的磷酸化水平的估算。

图2：以给出的剂量和方案用给出的化合物单独或组合治疗携带BN472肿瘤的大鼠。在研究过程中通过用测径器测量追踪肿瘤生长的进展。＊，p＜0.05(Dunnett检验)。

图3：以给定的剂量和方案用给定的化合物单独或组合治疗携带BN472肿瘤的大鼠。在研究过程中追踪体重的进展。＊，p＜0.05(Dunnett检验)。

图4：使KRAS突变PANC1细胞在Harlan裸小鼠的胁腹处皮下生长，然后用化合物A、AZD6244单独或组合治疗12天。在研究过程中测量肿瘤体积(A)和体重(B)的进展。＊，p＜0.05(Dunnett检验)。

图5：使KRAS突变MiaPaCa2细胞在Harlan裸小鼠的胁腹处皮下生长，然后用化合物A、AZD6244单独或组合治疗12天。在研究过程中测量肿瘤体积(A)和体重(B)的进展。＊，p＜0.05(Dunnett检验)。

图6：使KRAS突变MiaPaCa2细胞在Harlan裸小鼠的胁腹处皮下生长，然后用5-(2，6-二-吗啉-4-基-嘧啶-4-基)-4-三氟甲基-吡啶-2-基胺(化合物C，此处称为cpd B)、AZD6244单独或组合治疗12天。在研究过程中测量肿瘤体积(A)和体重(B)的进展。＊，p＜0.05(Dunnett检验)。

实施例

实施例1：在抗增殖测定法中MEK抑制剂PD0325901与化合物A起协同作用。在标准亚甲蓝增殖测定法中使用KRAS突变NSCLC细胞系。在该检测法中，化合物A和PD0325901分别以9.41和36.8nM的GI50(其是观察到50％生长抑制的浓度)抑制增殖(表1)。当用二者组合进行试验时，BEZ235的GI50减少至3.2nM，也就是说，在PD0325901存在下，观察到相似的增殖减少需要的BEZ235少3倍。反过来，在化合物A存在下，PD0325901的GI50减少至11.5nM。获得的组合指数是0.718，其对应于中等协同作用(表2)。

表1

将A549细胞与单独的或组合的渐增量的化合物A或PD0325901(NVP-LBW624)一起孵育72小时，用标准亚甲蓝测定法评价增殖。测定了GI50并且用CalcuSyn软件对CI进行了定量。

表2

实施例2：当单独使用与细胞一起孵育时，MEK抑制剂和化合物A确实阻断它们各自的下游效应子(ERK和Akt)。当在两种抑制剂均存在下孵育A549细胞时，两个通路均被有效地同时阻断(图1)。

实施例3：在BN472肿瘤模型中，以10mg/kg (p.o.，1q24h)施用化合物A或施用Raf抑制剂Raf265(剂量2.5mg/kg，p.o.，&q24h)产生了83和76的弱的并且不显著的抗肿瘤活性(以T/C表示)。但是，化合物A(10mg/kg)与RAF265的组合产生了T/C为34％的强的并且统计学显著的抗肿瘤活性(图2)。该组合耐受性良好，没有测量到对体重有影响(图3)。

实施例4：使KRAS突变PANC1细胞在Harlan裸小鼠的胁腹处皮下生长。然后用图4中给出的化合物和剂量方案治疗携带肿瘤的动物。在研究过程中测量肿瘤体积(A)和体重(B)的进展，直到第12天将动物处死。＊，p＜0.05，单因素方差分析，然后进行Tukey事后(post hoc)检验，表明在组合组中获得的抗肿瘤活性与对照和单一药物治疗组显著不同(两种化合物之间具有协同活性)。

实施例5：使KRAS突变MiaPaCa2细胞在Harlan裸小鼠的胁腹处皮下生长。然后用图5和图6中给出的化合物和剂量方案治疗携带肿瘤的动物。在研究过程中测量肿瘤体积(A)和体重(B)的进展，直到第12天将动物处死。＊，p＜0.05，单因素方差分析，然后进行Tukey事后检验，表明在组合组中获得的抗肿瘤活性与对照和单一药物治疗组显著不同(两种化合物之间具有协同活性)。