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尿足细胞特异信使核糖核酸聚合酶链反应检测方法

摘要

一种尿足细胞特异信使核糖核酸聚合酶链反应检测方法的建立,其特征在于构建步骤为:尿液标本的收集;总RNA提取及浓度纯度检测;逆转录;引物设计与合成;real-timePCR反应;标准品制备及标准曲线制作;待测样本及标准品real-time PCR反应。本发明具有快速简便的特征,且可获得优异的定量直线相关系数(R2>0.99)。同时,所建立的方法检测浓度范围广,podocalyxin及CD2-AP分别跨10个及8个数量级,两种基因最低检测浓度所对应的Ct值分别可达35、33.2286。此外,利用该方法检测两种基因高浓度及低浓度模板Ct值的组间及批间差异均小于3%,提示该方法稳定性高,可重复性好。该方法的建立为快速、简便检测尿液足细胞特异性mRNA提供了稳定的技术平台。

著录项

  • 公开/公告号CN102443651A

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2012-05-09

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 东南大学;

    申请/专利号CN201110443651.4

  • 发明设计人 刘必成;郑敏;

    申请日2011-12-27

  • 分类号C12Q1/68;

  • 代理机构南京天翼专利代理有限责任公司;

  • 代理人汤志武

  • 地址 210096 江苏省南京市四牌楼2号

  • 入库时间 2023-12-18 05:12:52

法律信息

  • 法律状态公告日

    法律状态信息

    法律状态

  • 2013-10-30

    发明专利申请公布后的视为撤回 IPC(主分类):C12Q1/68 申请公布日:20120509 申请日:20111227

    发明专利申请公布后的视为撤回

  • 2012-06-27

    实质审查的生效 IPC(主分类):C12Q1/68 申请日:20111227

    实质审查的生效

  • 2012-05-09

    公开

    公开

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