CCR2的稠合环戊基拮抗剂

技术领域

本发明涉及取代的稠合环戊基化合物、其药物组合物及其使用方法， 所述取代的稠合环戊基化合物为趋化性细胞因子受体2(CCR2)的拮抗剂。 更具体而言，所述CCR2拮抗剂是可用于预防、治疗或改善CCR2介导的 综合征、障碍或疾病的化合物。本发明还涉及((3aS，5S，6aR)-5-(((3S，4S)-3-甲 氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢-2H-环戊并[b]呋喃-3a-基)(3-(三氟甲基)- 7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮的结晶琥珀酸盐，含有所述盐的药物组合 物和所述盐在治疗障碍例如II型糖尿病、肥胖症和哮喘中的用途。本发明 还涉及用于制备所述结晶琥珀酸盐的新方法。

背景技术

CCR2是GPCR受体家族的成员(统称为趋化因子受体)，由单核细 胞和记忆性T-淋巴细胞表达。CCR2信号级联放大涉及磷脂酶(PLCβ2)、蛋 白激酶(PKC)和脂类激酶(PI-3激酶)的激活。

趋化性细胞因子(即趋化因子)是相对较小的蛋白质(8-10kD)，其刺 激细胞的迁移。根据第一个高度保守的半胱氨酸和第二个高度保守的半胱 氨酸之间的氨基酸残基数将趋化因子家族分成四个亚族。

单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)是CC趋化因子亚族(其中CC表示第一 个半胱氨酸和第二个半胱氨酸相邻的亚族)的成员，并且与细胞表面趋化 因子受体2(CCR2)结合。MCP-1是强效的趋化因子，其在结合至CCR2后 可介导单核细胞和淋巴细胞向炎症位点迁移(即趋化性)。MCP-1还由心 肌细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞、软骨细胞、平滑肌细胞、肾小球膜 细胞、肺泡细胞、T-淋巴细胞、巨噬细胞等表达。

在单核细胞进入炎性组织并分化成巨噬细胞后，单核细胞分化提供数 种促炎性调节剂的第二来源，所述调节剂包括肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白 介素-1(IL-1)、IL-8(CXC趋化因子亚族的成员，其中CXC表示在第一个 半胱氨酸和第二个半胱氨酸之间的一个氨基酸残基)、IL-12、花生四烯酸 代谢物(例如PGE₂和LTB₄)、氧衍生的自由基、基质金属蛋白酶和补体 成分。

慢性炎性疾病的动物模型研究已证明通过拮抗剂抑制MCP-1和CCR2 之间的结合抑制了炎性应答。MCP-1和CCR2之间的相互作用已牵涉(参 见Rollins B J，Monocyte chemoattractant protein 1：a potential regulator of  monocyte recruitment in inflammatory disease，Mol.Med.Today，1996，2：198； 和Dawson J等人，Targeting monocyte chemoattractant protein-1 signaling in  disease，Expert Opin.Ther.Targets，2003Feb.7(1)：35-48)炎性疾病病理例如 牛皮癣、葡萄膜炎、动脉粥样硬化、类风湿性关节炎(RA)、多发性硬化、 克罗恩氏病、肾炎、器官同种异体移植物排斥、纤维化肺、肾功能不全、II 型糖尿病和糖尿病并发症、糖尿病性肾病、糖尿病性视网膜病、糖尿病性 视网膜炎、糖尿病性微血管病、肺结核、肉样瘤病、侵入性葡萄球菌 (staphylococcia)感染、白内障手术后炎症、过敏性鼻炎、过敏性结膜炎、慢 性荨麻疹、慢性阻塞性肺病(COPD)、过敏性哮喘、牙周病、牙周炎、齿龈 炎、齿龈疾病、舒张性心肌病、心肌梗死、心肌炎、慢性心力衰竭、血管 狭窄、再狭窄、再灌注障碍、肾小球肾炎、实体瘤和癌症、慢性淋巴细胞 性白血病、慢性粒细胞性白血病、多发性骨髓瘤、恶性骨髓瘤、何杰金氏 病以及膀胱癌、乳腺癌、宫颈癌、结肠癌、肺癌、前列腺癌和胃癌。

单核细胞迁移由MCP-1拮抗剂(MCP-1的抗体或可溶性失活片段)抑 制，其已显示出抑制关节炎、哮喘和葡萄膜炎的发展。MCP-1和CCR2敲 除(KO)小鼠均已证明显著减少了单核细胞向炎性病变处的浸润。此外， 这种KO小鼠可抵抗实验性过敏性脑脊髓炎(EAE，一种人MS模型)、蟑 螂过敏原诱导的哮喘、动脉硬化症和葡萄膜炎的发展。类风湿性关节炎和 克罗恩氏病患者在用TNF-α拮抗剂(例如单克隆抗体和可溶性受体)以与 MCP-1表达及浸润性巨噬细胞数量减少相关的剂量治疗期间得以改善。

MCP-1已牵涉于季节性过敏性鼻炎和慢性过敏性鼻炎的发病机理中， 其被发现于大多数尘螨过敏患者的鼻粘膜中。已发现MCP-1还可体外诱发 组胺从嗜碱粒细胞释放。在过敏性病症期间，变应原和组胺均已显示引发 (即上调)MCP-1及其他趋化因子在过敏性鼻炎患者的鼻粘膜中的表达， 提示这些患者中存在正反馈回路。

仍然需要小分子CCR2拮抗剂来预防、治疗或改善由MCP-1诱导的单 核细胞和淋巴细胞向炎性位点的迁移而导致的CCR2介导的炎性综合征、 障碍或疾病。

将本文引用的所有文献以引用方式并入本文。

发明内容

本发明涉及式(I)的化合物及其药学上可接受的盐，

其中：

A为O或S；

R⁰为H或C_(1-4)烷基；

其中所述C_(1-4)烷基任选地被OH、C_(1-4)烷基-(OCH₂CH₂)_n-OCH₃、 OCH₃、CO₂H、C(O)NH₂、SO₂NH₂或CO₂C_(1-4)烷基取代；

n为1、2或3；

R¹为环己基或四氢吡喃基；

其中所述环己基或四氢吡喃基可任选地被一种取代基取代，所述取代基选 自：OCH₃、OH、CH₂CH₃、-CN、NH₂、NH(CH₃)、N(CH₃)₂和OCF₃；

另选地，R⁰和R¹与它们连接的氮一起形成选自下列的环：

R^a为苯基；其中所述苯基任选地被C(O)NH₂、C(O)NHC_(1-4)烷基、 SO₂NH₂、C(O)N(C_(1-4)烷基)₂、OCH₃、CO₂CH₃或CO₂H取代；

R^b为C_(1-4)烷基或OC_(1-4)烷基；

R²选自H、C_(1-4)烷基、环丙基、环己基、苯基、吡啶基、嘧啶基、吡 嗪基、吡唑基、咪唑基、异唑基、噻唑基、呋喃基和噻吩基；

其中所述苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、吡唑基、咪唑基、唑 基、异唑基、噻唑基、呋喃基或噻吩基任选地被一种取代基取代，所述 取代基选自：NH₂、NHC_(1-3)烷基、N(C_(1-3)烷基)₂、C_(1-3)烷基、-CN、- CH＝CH₂、-CONH₂、-CO₂H、-NO₂、-CONHC_(1-4)烷基、CON(C_(1-4)烷基)₂、 C_(1-4)烷基CONH₂、-NHCOC_(1-4)烷基、-CO₂C_(1-4)烷基、CF₃、SO₂C_(1-4)烷 基、-SO₂NH₂、-SO₂NH(C_(1-4)烷基)和-SO₂N(C_(1-4)烷基)₂；

R³为H或CH₃；

另选地，R³和R²与它们连接的碳一起形成

R⁴为

R⁵为H或CH₃；

另选地，R⁴和R⁵与它们连接的氮一起形成选自下列的环：

R⁶为CF₃或OCF₃；

R⁷为CF₃取代的杂芳基，前提条件是R⁷不为

R_x为CF₃、F、Cl、CN或OCH₃；

R_y为H、F、Cl或CF₃；

R_z为H或F。

本发明还涉及式(I-S)的化合物的琥珀酸盐，

也称为((3aS，5S，6aR)-5-(((3S，4S)-3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六 氢-2H-环戊并[b]呋喃-3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲 酮。在本发明的一个实施例中，式(I-S)的化合物的琥珀酸盐是结晶的。在 另一个实施例中，本发明涉及式(I-S)的化合物的琥珀酸盐，其中所述盐是 结晶水合物形式；优选地，水合物含有约0.6摩尔水/摩尔式(I-S)的化合 物。在本发明的另外一个实施例中，式(I-S)的化合物的琥珀酸盐是含有约 0.6摩尔水/摩尔式(I-S)的化合物的结晶水合物形式，并且还是吸湿性的。

本发明还涉及如下文更详细地描述的，用于制备式(I-S)的化合物的琥 珀酸盐，优选式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸盐的方法。

附图说明

图1示出了式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸盐的代表性pXRD光谱。

图2示出了式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸盐的代表性DSC扫描。

图3示出了式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸盐的代表性TGA扫描。

图4示出了式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸盐的代表性吸湿等温线。

图5示出了显示式(I-S)的化合物的无定形琥珀酸盐至式(I-S)的化合物 的结晶琥珀酸盐的代表性样品转换的DSC热谱图；和式(I-S)的化合物的无 定形琥珀酸盐的代表性样品的TGA热谱图。

具体实施方式

本发明涉及式(I)的化合物，

其中：

A、R⁰、R¹、R²、R³、R⁴和R⁵如上定义。

在一个实施例中，本发明涉及式(I)的化合物，其中A为O。

在另一个实施例中，本发明涉及式(I)的化合物及其药学上可接受的 盐，其中

A为O或S；

R⁰为H或C_(1-4)烷基；

其中所述C_(1-4)烷基任选地被OH、C_(1-4)烷基-(OCH₂CH₂)_n-OCH₃或 OCH₃取代；

n为1、2或3；

R¹为环己基、1-甲氧基环己-2-基、四氢吡喃-4-基或3-甲氧基四氢吡 喃-4-基；

另选地，R⁰和R¹与它们连接的氮一起形成选自下列的环：

R^a为苯基；

其中所述苯基任选地被C(O)NH₂、C(O)NHCH₃、SO₂NH₂、 C(O)N(CH₃)₂、OCH₃、CO₂CH₃或CO₂H取代；

R²选自H、C_(1-4)烷基、环丙基、环己基、苯基、吡啶基、嘧啶基、吡 嗪基、吡唑基、咪唑基、异唑基、噻唑基、呋喃基和噻吩基；

其中所述苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、吡唑基、咪唑基、唑 基、异唑基、噻唑基、呋喃基或噻吩基任选地被一种取代基取代，所述 取代基选自：NH₂、NHC_(1-3)烷基、N(C_(1-3)烷基)₂、C_(1-3)烷基、-CN、- CH＝CH₂、-CONH₂、-CO₂H、-NO₂、-CONHC_(1-4)烷基、CON(C_(1-4)烷基)₂、 C_(1-4)烷基CONH₂、-NHCOC_(1-4)烷基、-CO₂C_(1-4)烷基、CF₃、SO₂C_(1-4)烷 基、-SO₂NH₂、-SO₂NH(C_(1-4)烷基)和-SO₂N(C_(1-4)烷基)₂；

R³为H或CH₃；

另选地，R³和R²与它们连接的碳一起形成

另选地，R⁴和R⁵与它们连接的氮一起形成选自下列的环：

R⁶为CF₃或OCF₃；

R⁷为

在本发明的另一个实施例中，

A为O或S；

R⁰为H、CH₃、CH₂CH₂CH₂OH、CH₂CH₂OH、 CH₂CH₂CH₂(OCH₂CH₂)₃OCH₃或CH₂CH₂OCH₃；

R¹为四氢吡喃-4-基或3-甲氧基四氢吡喃-4-基；

另选地，R⁰和R¹与它们连接的氮一起形成选自下列的环：

R^a为苯基；

其中所述苯基任选地被C(O)N(CH₃)₂、OCH₃或CO₂H取代；

R²为H、C_(1-4)烷基、环丙基、环己基、噻唑-2-基、1-甲基-咪唑-2-基、 1-甲基-吡唑-5-基或苯基；

R³为H或CH₃；

另选地，R³和R²与它们连接的碳一起形成

R⁴和R⁵与它们连接的氮一起形成选自下列的环：

R⁶为CF₃或OCF₃；

R⁷为

及其药学上可接受的盐。

在另一个实施例中，本发明涉及式(I)的化合物及其药学上可接受的 盐，其中

A为O；

R⁰为H、CH₃、CH₂CH₂CH₂OH、CH₂CH₂OH、 CH₂CH₂CH₂(OCH₂CH₂)₃OCH₃或CH₂CH₂OCH₃；

R¹为四氢吡喃-4-基或3-甲氧基四氢吡喃-4-基；

另选地，R⁰和R¹可与它们连接的氮一起形成选自下列的环：

R^a为苯基；

其中所述苯基任选地被C(O)N(CH₃)₂、OCH₃或CO₂H取代；

R²为H、C_(1-4)烷基、环丙基、环己基、噻唑-2-基、1-甲基-咪唑-2-基、 1-甲基-吡唑-5-基或苯基；

R³为H或CH₃；

另选地，R³和R²与它们连接的碳一起形成

R⁴和R⁵与它们连接的氮一起形成选自下列的环：

R⁶为CF₃或OCF₃；

R⁷为

在另一个实施例中，本发明涉及独立地选自下列的任何一种或多种化 合物及其药学上可接受的盐：

在另一个实施例中，本发明涉及下式的化合物或其药学上可接受的 盐：

在另一个实施例中，本发明涉及包含式(I)的化合物和药学上可接受的 载体的药物组合物。

在另一个实施例中，本发明涉及通过混合式(I)的化合物和药学上可接 受的载体制备的药物组合物。

在另一个实施例中，本发明涉及用于制备药物组合物的方法，所述方 法包括将式(I)的化合物和药学上可接受的载体混合。

本发明还涉及根据任何本文所述的方法制备的产物。在另一个实施例 中，本发明涉及根据如本文下文的实例31中所述的方法制备的产物。

在另一个实施例中，本发明涉及如本文下文的方案和实例中更详细地 描述的，用于制备式(I)的化合物的方法。在另一个实施例中，本发明涉及 如本文下文的实例31中更详细地描述的，用于制备式(I)的化合物的方法。

在另一个实施例中，本发明涉及选自下列的化合物：

这些化合物可用作式(I)的 化合物制备的中间体。

在另一个实施例中，本发明涉及可用作式(I)的化合物，更具体而言式 (XIX)的化合物制备的中间体，

其中X为Br、PhSe或I。

在另一个实施例中，本发明涉及可用作式(I)的化合物制备的中间体的 式(XXI)的化合物

在另一个实施例中，本发明涉及用于制备(S)-4，4-二甲氧基四氢-2H-吡 喃-3-醇的方法，所述方法包括：

使4，4-二甲氧基二氢-2H-吡喃-3(4H)-酮与硼还原剂和R-(+)-2-甲基- CBS-唑硼烷经历至少六小时时段的反应，以提供至少60％对映体过量的 (S)-4，4-二甲氧基四氢-2H-吡喃-3-醇。

在另一个实施例中，本发明涉及用于制备(S)-4，4-二甲氧基四氢-2H-吡 喃-3-醇的方法，所述方法包括：

使4，4-二甲氧基二氢-2H-吡喃-3(4H)-酮与硼还原剂和R-(+)-2-甲基- CBS-唑硼烷经历至少六小时时段的反应，以提供至少90％对映体过量的 (S)-4，4-二甲氧基四氢-2H-吡喃-3-醇。

在另一个实例中，本发明涉及如上所述用于制备(S)-4，4-二甲氧基四 氢-2H-吡喃-3-醇的方法，其中所述硼烷还原络合物选自硼烷-二甲基硫醚络 合物或硼烷-N，N-二乙基苯胺络合物。

在另一个实施例中，本发明涉及如上所述用于制备(S)-4，4-二甲氧基四 氢-2H-吡喃-3-醇的方法，其中将所述硼烷还原络合物和R-(+)-2-甲基-CBS- 唑硼烷的THF溶液加入在THF中的4-二甲氧基二氢-2H-吡喃-3(4H)-酮溶 液中。

在另一个实施例中，本发明涉及如上所述用于制备(S)-4，4-二甲氧基四 氢-2H-吡喃-3-醇的方法中的任一种，其中所述反应在惰性环境中执行；在 本发明的另一个实施例中，惰性环境是氮气。

在另一个实施例中，本发明涉及如上所述用于制备(S)-4，4-二甲氧基四 氢-2H-吡喃-3-醇的方法中的任一种，所述方法还包括使(S)-4，4-二甲氧基四 氢-2H-吡喃-3-醇与硫酸二甲酯反应，以提供(R)-3，4，4-三甲氧基四氢-2H-吡 喃。

在另一个实施例中，本发明涉及如上所述用于制备(S)-4，4-二甲氧基四 氢-2H-吡喃-3-醇的方法中的任一种，所述方法还包括使(R)-3，4，4-三甲氧基 四氢-2H-吡喃与酸反应，以提供(R)-3-甲氧基二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮。在另 一个实施例中，酸是浓盐酸。

在另一个实施例中，本发明涉及用于制备(S)-4，4-二甲氧基四氢-2H-吡 喃-3-醇的方法，所述方法包括：

使4，4-二甲氧基二氢-2H-吡喃-3(4H)-酮与硼还原剂和R-(+)-2-甲基- CBS-唑硼烷经历至少六小时时段的反应，以提供至少60％对映体过量的 (S)-4，4-二甲氧基四氢-2H-吡喃-3-醇，其中所述反应在20℃至60℃的温度 范围内进行。

在另一个实施例中，本发明涉及用于制备(R)-4，4-二甲氧基四氢-2H-吡 喃-3-醇的方法，所述方法包括：

使4，4-二甲氧基二氢-2H-吡喃-3(4H)-酮与硼还原剂和S-(-)-2-甲基- CBS-唑硼烷经历至少六小时时段的反应，以提供至少60％对映体过量的 (R)-4，4-二甲氧基四氢-2H-吡喃-3-醇。

在另一个实施例中，本发明涉及用于制备(R)-4，4-二甲氧基四氢-2H-吡 喃-3-醇的方法，所述方法包括：

使4，4-二甲氧基二氢-2H-吡喃-3(4H)-酮与硼还原剂和S-(-)-2-甲基- CBS-唑硼烷经历至少六小时时段的反应，以提供(R)-4，4-二甲氧基四氢- 2H-吡喃-3-醇，其中(R)-4，4-二甲氧基四氢-2H-吡喃-3-醇以至少90％对映体 过量形成。

在另一个实施例中，本发明涉及如上所述用于制备(R)-4，4-二甲氧基四 氢-2H-吡喃-3-醇的方法，其中所述硼烷还原络合物选自硼烷-二甲基硫醚络 合物或硼烷-N，N-二乙基苯胺络合物。

在另一个实施例中，本发明涉及如上所述用于制备(R)-4，4-二甲氧基四 氢-2H-吡喃-3-醇的方法，其中将所述硼烷还原络合物和S-(-)-2-甲基-CBS- 唑硼烷的THF溶液加入在THF中的4-二甲氧基二氢-2H-吡喃-3(4H)-酮溶 液中。

在另一个实施例中，本发明涉及如上所述用于制备(R)-4，4-二甲氧基四 氢-2H-吡喃-3-醇的方法中的任一种，其中所述反应在惰性环境中执行；在 本发明的另一个实施例中，惰性环境是氮气。

在另一个实施例中，本发明涉及如上所述用于制备(R)-4，4-二甲氧基四 氢-2H-吡喃-3-醇的方法中的任一种，所述方法还包括使(R)-4，4-二甲氧基四 氢-2H-吡喃-3-醇与硫酸二甲酯反应，以提供(R)-3，4，4-三甲氧基四氢-2H-吡 喃。

在另一个实施例中，本发明涉及如上所述用于制备(R)-4，4-二甲氧基四 氢-2H-吡喃-3-醇的方法中的任一种，所述方法还包括使(S)-3，4，4-三甲氧基 四氢-2H-吡喃与酸反应，以提供(S)-3-甲氧基二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮。在另 一个实施例中，酸是浓盐酸。

在另一个实施例中，本发明涉及如上所述用于制备(R)-4，4-二甲氧基四 氢-2H-吡喃-3-醇的方法中的任一种，所述方法包括：

使4，4-二甲氧基二氢-2H-吡喃-3(4H)-酮与硼还原剂和S-(-)-2-甲基- CBS-唑硼烷经历至少六小时时段的反应，以提供至少60％对映体过量的 (R)-4，4-二甲氧基四氢-2H-吡喃-3-醇，其中所述反应在20℃至60℃的温度 范围内进行。

在另一个实施例中，本发明涉及用于预防、治疗或改善CCR2介导的 综合征、障碍或疾病的方法，所述方法包括向对其有需要的受试者施用治 疗有效量的式(I)的化合物。

在另一个实施例中，本发明涉及用于预防、治疗或改善CCR2介导的 炎性综合征、障碍或疾病的方法，其中所述综合征、障碍或疾病与升高的 MCP-1表达或MCP-1过表达相关，或者是伴随与升高的MCP-1表达或 MCP-1过表达相关的综合征、障碍或疾病的炎性病症，所述方法包括向对 其有需要的受试者施用有效量的权利要求1的化合物。

在另一个实施例中，本发明涉及预防、治疗或改善综合征、障碍或疾 病的方法，其中所述综合征、障碍或疾病选自：慢性阻塞性肺病(COPD)、 眼部障碍、葡萄膜炎、动脉粥样硬化、类风湿性关节炎、牛皮癣、牛皮癣 关节炎、特应性皮炎、多发性硬化、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎、肾炎、 器官同种异体移植物排斥、纤维化肺、肾功能不全、I型糖尿病、II型糖尿 病、糖尿病并发症、糖尿病性肾病、糖尿病性视网膜病、糖尿病性视网膜 炎、糖尿病性微血管病、超重、肥胖症、肥胖症相关胰岛素抗性、代谢综 合征、肺结核、肉样瘤病、侵入性葡萄球菌感染、白内障手术后炎症、过 敏性鼻炎、过敏性结膜炎、慢性荨麻疹、哮喘、过敏性哮喘、牙周病、牙 周炎、齿龈炎、齿龈疾病、舒张性心肌病、心肌梗死、心肌炎、慢性心力 衰竭、血管狭窄、再狭窄、再灌注障碍、腹主动脉瘤、肾小球肾炎、实体 瘤和癌症、慢性淋巴细胞性白血病、慢性粒细胞性白血病、多发性骨髓 瘤、恶性骨髓瘤、何杰金氏病和膀胱癌、乳腺癌、宫颈癌、结肠癌、肺 癌、前列腺癌或胃癌以及慢性神经炎性病症，包括但不限于阿尔茨海默氏 病、缺血性中风、脊髓损伤、神经压碾损伤和外伤性脑损伤，所述方法包 括向对其有需要的受试者施用有效量的式(I)的化合物。

在另一个实施例中，本发明涉及预防、治疗或改善综合征、障碍或疾 病的方法，其中所述综合征、障碍或疾病选自：I型糖尿病、II型糖尿病、 糖尿病并发症、糖尿病性肾病、糖尿病性视网膜病、糖尿病性视网膜炎、 糖尿病性微血管病、肥胖症、肥胖症相关胰岛素抗性、代谢综合征、哮喘 和过敏性哮喘，所述方法包括向对其有需要的受试者施用治疗有效量的式(I) 的化合物。

在另一个实施例中，本发明涉及治疗病症的方法，所述病症选自II型 糖尿病、肥胖症和哮喘，所述方法包括向对其有需要的受试者施用治疗有 效量的式(I)的化合物。

本发明还涉及式(I-S)的化合物的琥珀酸盐，

其中式(I-S)的化合物也称为((3aS，5S，6aR)-5-(((3S，4S)-3-甲氧基四氢-2H-吡喃- 4-基)氨基)六氢-2H-环戊并[b]呋喃-3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶- 6(5H)-基)甲酮。在一个实施例中，式(I-S)的化合物的琥珀酸盐是结晶的。 在另一个实施例中，式(I-S)的化合物的琥珀酸盐是结晶水合物形式；其中 所述水合物含有约0.6摩尔水/摩尔式(I-S)的化合物。在本发明的另一个实 施例中，式(I-S)的化合物的琥珀酸盐是含有约0.6摩尔水/摩尔式(I-S)的化合 物的结晶水合物形式；其中所述结晶水合物形式还是吸湿性的。

本发明还涉及式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸盐，其中所述酸性抗衡离 子是琥珀酸。使用下列另外的酸性抗衡离子，对式(I-S)的化合物进行另外 的盐筛选：HCl酸、硫酸、柠檬酸、丙二酸、马来酸、L-酒石酸、对甲苯 磺酸、磷酸和乙酸。所得的固体残余的X射线分析指示关于硫酸盐、马来 酸盐和磷酸盐的晶体结构；以及HCl盐、柠檬酸盐、丙二酸盐、酒石酸盐 和甲苯磺酸盐的无定形结构。

式(I-S)的化合物的结晶磷酸盐、硫酸盐和马来酸盐另外在DSC、TGA 和水分吸附/解吸中进行测试。硫酸盐显示在盐形式之间的互换以及1.6％直 至60％RH和总共26.5％直至90％RH的吸湿性重量增加，伴随强滞后。马 来酸盐显示形式变化以及18.3％直至70％RH和总共79.9％至90％RH的吸 湿性重量增加。磷酸盐显示3.3％直至60％RH和总共69.4％直至90％RH 的吸湿性重量增加，伴随强滞后和潮解。

定义

除非另外指明，否则术语“烷基”是指最多12个碳原子(优选最多6 个碳原子)的直链和支链基团，并且其包括但不限于甲基、乙基、丙基、 异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、己基、异己 基、庚基、辛基、2，2，4-三甲基戊基、壬基、癸基、十一烷基以及十二烷 基。

术语“C_(a-b)”(其中a和b为表示指定数目的碳原子的整数)是指烷 基、烯基、炔基、烷氧基或环烷基，或是指基团中的烷基部分，其中烷基 作为前缀词根出现，含有a至b(包括a和b)个碳原子。例如，C_(1-4)表示 含有1、2、3或4个碳原子的基团。

术语“环烷基”是指通过从单个环碳原子中去除一个氢原子而衍生的 饱和或部分饱和的单环或二环烃环原子团。环烷基原子团的例子包括但不 限于环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环庚基和 环辛基。另外的例子包括C_(3-8)环烷基、C_(5-8)环烷基、C_(3-12)环烷基、C_(3-20)环 烷基、十氢萘基和2，3，4，5，6，7-六氢-1H-茚基。

术语“硼还原剂”是指硼氢化物，通常伴随稳定剂例如醚、胺或硫化 物。硼还原剂的例子包括但不限于硼烷-四氢呋喃络合物、儿茶酚硼烷、硼 烷-二甲基苯胺络合物和硼烷-二甲基硫醚络合物。

术语“杂芳基”是指通过从杂芳环系统的环碳原子中去除一个氢原子 而衍生的原子团。杂芳环系统应指示含有选自O、N和S的至少一个杂原 子，任选含有独立地选自O、N和S的一至三个另外的杂原子的任何五元或 六元单环芳环结构；或者含有选自O、N和S的至少一个杂原子，任选含有 独立地选自O、N和S的一至四个另外的杂原子的九元或十元二环芳环结 构。杂芳基可在环的任何杂原子或碳原子处附着，使得结果是稳定结构。杂 芳基原子团的例子包括但不限于呋喃基、噻吩基、吡咯基、唑基、噻唑 基、咪唑基、吡唑基、异唑基、异噻唑基、二唑基、三唑基、噻二唑 基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吲嗪基、吲哚基、异吲哚基、苯 并[b]呋喃基、苯并[b]噻吩基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、嘌呤 基、4H-喹嗪基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、喹啉 基、1，8-萘啶基和蝶啶基。

术语“ee”或“对映体过量”是对映体混合物的摩尔分数中的差异的 绝对值。(+)-和(-)-对映体的摩尔分数表示为F(+)和F(-)(其中F(+)+F(-)＝ 1)。对映体过量定义为|F(+)-F(-)|。对映体过量百分比为ee*100。例如， (+)和(-)对映体的50/50混合物具有0％ee，(+)和(-)对映体的5/95混合物具 有90％ee，并且(+)和(-)对映体的70/30混合物具有40％ee。

术语“惰性环境”是基本上耗尽大气氧和水蒸气的化学反应的局部环 境。例如，在惰性环境下进行的反应包括但不限于在氩或氮大气下进行的 反应。

术语“分离的形式”应意指化合物以与具有另一种化合物的任何固体 混合物、溶剂系统或生物环境分开的形式存在。在一个实施例中，本发明 涉及式(I-S)的化合物的琥珀酸盐，优选式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸盐，其 中所述盐作为分离的形式存在和/或制备。

当用于描述式(I-S)的化合物的琥珀酸盐时，术语“基本上不含其他盐 形式”应意指在式(I-S)的化合物中的分离的琥珀酸盐中的任何其他盐形式 的摩尔百分比小于约5摩尔百分比、优选小于约2摩尔百分比、更优选小 于约0.5摩尔百分比、最优选小于约0.1摩尔百分比。在一个实施例中，本 发明涉及式(I-S)的化合物的琥珀酸盐，优选式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸 盐，其中所述盐作为基本上不含其他盐形式的形式存在和/或制备。

术语“基本上纯的形式”应意指分离的化合物中杂质的摩尔百分比小 于约5摩尔百分比、优选小于约2摩尔百分比、更优选小于约0.5摩尔百分 比、最优选小于约0.1摩尔百分比。在一个实施例中，本发明涉及式(I-S)的 化合物的琥珀酸盐，优选式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸盐，其中所述盐作 为基本上纯的形式存在和/或制备。

对于在医学中的使用，本发明化合物的盐是指无毒的“药学上可接受 的盐”。FDA批准的药学上可接受的盐形式(参考International J.Pharm. 1986，33，201-217；J.Pharm.Sci.，1977，Jan，66(1)，第1页)包括药学上可接 受的酸式/阴离子盐或碱式/阳离子盐。

在本说明书通篇中，化合物被描述为通常通过硅胶柱来分离，但还可 使用制备性薄层色谱法或者高压或低压液相色谱法。公认的是，当通过硅 胶型分离介质洗脱化合物时，极性最小的化合物在极性较大的化合物之前 洗脱。因此，术语“极性较少的异构体”是指首先从硅胶型分离介质中洗 脱的异构体。

缩写

在本专利申请说明书以及整个专利申请中，使用了如下缩写。

AIBN               偶氮二异丁腈

BOC或Boc           叔丁氧羰基

DCC                二环己基碳二亚胺

DCM                二氯甲烷

EDCI或EDC          1-乙基-3-(3’-二甲氨基丙基)碳二亚胺

DIAD               二异丙基偶氮二羧酸酯

DIEA               二异丙基乙胺

DSC                差示扫描量热法

Et                          乙基

EtOAc                       乙酸乙酯

ee                          对映体过量

eq                          当量

HOBt                        羟基苯并三唑

LiHMDS                      双(三甲基甲硅烷基)氨基锂

M                           摩尔/升

Me                          甲基

MIBK                        甲基异丁基酮

min.                        分钟

n-BuLi                      正丁基锂

NBS或NIS                    N-溴琥珀酰亚胺或N-碘琥珀酰亚胺

OAc                         乙酸根

Ph                          苯基

PyBrop                      三吡咯烷基溴化六氟磷酸盐

RH                          相对湿度

rt                          室温

TBAF                        四丁基氟化铵

TFA                         三氟乙酸

THF                         四氢呋喃

TBS或TBDMS                  叔丁基二甲基甲硅烷基

TLC                         薄层色谱法

S-(-)-2-甲基-CBS-唑硼烷    

药学上可接受的酸式/阴离子盐包括但不限于乙酸盐、苯磺酸盐、苯甲 酸盐、碳酸氢盐、酒石酸氢盐、溴化物、依地酸钙盐、樟脑磺酸盐、碳酸 盐、氯化物、柠檬酸盐、二盐酸盐、依地酸盐、乙二磺酸盐、丙酸酯十二 烷基硫酸盐、乙磺酸盐、延胡索酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、谷氨酸 盐、乙醇酰对氨基苯胂酸盐、己基间苯二酚盐、海巴明盐、氢溴酸盐、盐 酸盐、羟基萘甲酸盐、碘化物、羟乙基磺酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、苹果 酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基溴化物、甲基硝酸盐、甲基 硫酸盐、粘酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、双羟萘酸盐、泛酸盐、磷酸盐/二磷 酸盐、聚半乳糖醛酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、碱式乙酸盐、琥珀酸盐、 硫酸盐、鞣酸盐、酒石酸盐、氯茶碱盐、甲苯磺酸盐以及三乙基碘化物。 有机酸或无机酸还包括但不限于氢碘酸、过氯酸、硫酸、磷酸、丙酸、乙 醇酸、甲磺酸、羟基乙磺酸、草酸、2-萘磺酸、对甲苯磺酸、环己烷氨基 磺酸、糖精酸或三氟乙酸。

药学上可接受的碱式/阳离子盐包括且不限于铝、2-氨基-2-羟甲基-丙 烷-1，3-二醇(也称为三(羟甲基)氨基甲烷、三羟甲基氨基甲烷(tromethane)或 “TRIS”)、氨、苄星青霉素、叔丁胺、钙、葡萄糖酸钙、氢氧化钙、氯 普鲁卡因、胆碱、胆碱碳酸氢盐、氯化胆碱、环己胺、二乙醇胺、乙二 胺、锂、LiOMe、L-赖氨酸、镁、葡甲胺、NH₃、NH₄OH、N-甲基-D-葡糖 胺、哌啶、钾、叔丁醇钾、氢氧化钾(含水)、普鲁卡因、奎宁、钠、碳 酸钠、2-乙基己酸钠(SEH)、氢氧化钠、三乙醇胺或锌。

使用方法

本发明涉及用于预防、治疗或改善CCR2介导的综合征、障碍或疾病 的方法，所述方法包括向对其有需要的受试者施用有效量的式(I)的化合物 或其形式、组合物或药物。

其中使用式(I)的化合物的CCR2介导的综合征、障碍或疾病的例子包 括慢性阻塞性肺病(COPD)、眼部障碍、葡萄膜炎、动脉粥样硬化、类风湿 性关节炎、牛皮癣、牛皮癣关节炎、特应性皮炎、多发性硬化、克罗恩氏 病、溃疡性结肠炎、肾炎、器官同种异体移植物排斥、纤维化肺、肾功能 不全、I型糖尿病、II型糖尿病、糖尿病并发症、糖尿病性肾病、糖尿病性 视网膜病、糖尿病性视网膜炎、糖尿病性微血管病、超重、肥胖症、肥胖 症相关胰岛素抗性、代谢综合征、肺结核、慢性阻塞性肺病、肉样瘤病、 侵入性葡萄球菌感染、白内障手术后炎症、过敏性鼻炎、过敏性结膜炎、 慢性荨麻疹、哮喘、过敏性哮喘、牙周病、牙周炎、齿龈炎、齿龈疾病、 舒张性心肌病、心肌梗死、心肌炎、慢性心力衰竭、血管狭窄、再狭窄、 再灌注障碍、腹主动脉瘤、多发性硬化、肾小球肾炎、实体瘤和癌症、慢 性淋巴细胞性白血病、慢性粒细胞性白血病、多发性骨髓瘤、恶性骨髓 瘤、何杰金氏病、膀胱癌、乳腺癌、宫颈癌、结肠癌、肺癌、前列腺癌或 胃癌以及慢性神经炎性疾病，包括但不限于阿尔茨海默氏病、缺血性中 风、脊髓损伤、神经压碾损伤和外伤性脑损伤。

本文给出的一些定量表达由术语“约”进行修饰。应当理解无论术语 “约”是否明确使用，本文给出的每一个数量均意指实际给出值以及可根 据本领域普通技术合理推断出的此类给出值的近似值，包括由于此类给出 值的实验和/或测量条件的近似值。另外，本文的一些定量表述叙述为从约 量X到约量Y的范围。应当理解，若叙述了某个范围，则该范围不限于所 叙述的上限和下限，而是包括从约量X直至约量Y的整个范围，或者其中 的任何范围。

就本发明方法而言，术语“施用”意指通过使用式(I)的化合物或其形 式、组合物或药物来治疗性地或预防性地预防、治疗或改善本文所述的综 合征、障碍或疾病的方法。这种方法包括在治疗期间以不同的次数施用有 效量的所述化合物、配混物形式、组合物或药物，或者以组合形式同时施 用。本发明的方法应被理解为涵盖所有已知的治疗性处理方案。

术语“受试者”是指患者，其可以是已作为治疗、观察或实验的对象 的动物，通常是哺乳动物(通常是人)。在本发明的一个方面，受试者有 发展与升高的MCP-1表达或MCP-1过表达相关联的综合征、障碍或疾病的 风险(或易于发生所述发展)，或者为具有伴随与升高的MCP-1表达或 MCP-1过表达相关联的综合征、障碍或疾病的炎性病症的患者。

术语“治疗有效量”意指在组织系统、动物或人中引起生物学反应或 药物反应的活性化合物或药剂的量，而所述生物学反应或药物反应正是研 究人员、兽医、医生或其他临床医师所寻求的，包括预防、治疗或改善所 治疗的综合征、障碍或疾病的症状。

术语“葡萄膜炎”通常是指涉及眼的任何炎性疾病。可基于炎症存在 于眼中的部分，将葡萄膜炎分成临床上不同的亚型(百分比对应于已知符 合这些种类的患者)：前部(51％)、中间(13％)、后部(20％)或全葡萄膜炎 (16％)，并且根据疾病的进程，可分为急性(16％)、复发性(26％)或慢性 (58％)。患有前葡萄膜炎的那些患者(·19％)尽管进行积极治疗，最终也会发 展成不能恢复的视力损伤，例如单侧盲(9％)、双侧盲(2％)或者单侧或双侧 视力受损(8％)。大多数葡萄膜炎案例为特发性的，但已知的原因包括感染 (例如弓形体病、细胞巨化病毒等)或作为全身性炎性病症和/或自身免疫 病症的一部分发展(例如幼年型类风湿性关节炎、HLA-B27相关脊椎关节 病、肉样瘤病等)。(HLA-B27：人类白细胞抗原B*27-为由在染色体6上 的主要组织相容性复合体(MHC)中的B基因座编码的I类表面抗原，并将 微生物抗原呈递给T细胞。HLA-B27与某一组被称为血清反应阴性脊椎关 节病变的自身免疫疾病密切相关联)。

当用作CCR2抑制剂时，本发明的化合物可以单个或分份日剂量的有 效量施用，所述有效量在约0.5mg至约10g的范围内，或其中的任何量或 范围，优选为约0.5mg至约5g，或其中的任何量或范围。施用的剂量将受 诸如施用途径，受体的健康状态、体重和年龄，治疗频率以及同期治疗和 不相关的治疗的存在等因素影响。

对于本领域的技术人员还将显而易见的是，本发明的化合物或其药物 组合物的治疗有效剂量将根据所需效果而变化。因此，本领域的技术人员 可容易地确定待施用的最佳剂量，并且最佳剂量将随所使用的具体化合 物、施用方式、制剂强度和疾病状况的进展而变化。另外，与待治疗的具 体受试者相关联的因素(包括受试者年龄、体重、饮食和施用时间)将导 致需要将剂量调整至适当的治疗水平。因而上述剂量是一般情况的示例。 当然，可能会存在其中较高或较低剂量范围有利的个别情况，并且这类情 况也在本发明的范围内。

可将式(I)的化合物配制成包含任何已知的药学上可接受的载体的药物 组合物。示例性载体包括但不限于任何合适的溶剂、分散介质、包衣、抗 菌剂和抗真菌剂以及等渗剂。还可作为制剂组分的示例性赋形剂包括填充 剂、粘合剂、崩解剂以及润滑剂。

式(I)的化合物的药学上可接受的盐包括由无机或有机酸或碱形成的常 规无毒盐或季铵盐。此类酸加成盐的例子包括乙酸盐、己二酸盐、苯甲酸 盐、苯磺酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、十二烷基硫酸盐、盐酸盐、氢溴酸 盐、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、硝酸盐、草酸盐、三甲基乙酸盐、丙 酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐以及酒石酸盐。碱盐包括铵盐、碱金属盐诸如钠 盐和钾盐、碱土金属盐例如钙盐和镁盐、有机碱盐例如二环己胺盐以及氨 基酸例如精氨酸的盐。还可将碱性含氮基团用例如烷基卤化物进行季铵 化。

本发明的药物组合物可通过任何能实现其预期目的方式施用。例子包 括通过肠胃外、皮下、静脉内、肌内注射、腹膜内注射、透皮、口腔或眼 等途径施用。另选地或同时地，可通过口服途径施用。适用于肠胃外施用 的制剂包括水溶性形式的活性化合物(例如，水溶性盐)的水溶液、酸性 溶液、碱性溶液、右旋糖水溶液、等渗碳水化合物溶液以及环糊精包合复 合物。

本发明还包括制备药物组合物的方法，所述方法包括将药学上可接受 的载体与本发明的任何化合物混合。另外，本发明包括通过将药学上可接 受的载体与本发明的任何化合物混合而制备的药物组合物。如本文所用， 术语“组合物”旨在涵盖包含规定量的规定成分的产物，以及任何由规定 量的规定成分的组合直接或间接得到的产物。

多晶型物和溶剂化物

此外，本发明的化合物可具有一种或多种多晶型或无定形结晶形式， 这些多晶型或无定形结晶形式旨在包括在本发明的范围内。此外，化合物 可例如与水(即水合物)形成溶剂化物或与普通有机溶剂形成溶剂化物。 如本文所用，术语“溶剂化物”意指本发明的化合物与一个或多个溶剂分 子的物理结合。该物理缔合涉及不同程度的离子键合和共价键合，包括氢 键合。在某些情况下，溶剂化物将能够在(例如)一个或多个溶剂分子混 在结晶固体的晶格中时分离出来。术语“溶剂化物”旨在既涵盖溶液相溶 剂化物又涵盖可分离溶剂化物。合适的溶剂化物的非限制性例子包括乙醇 化物、甲醇化物等。

本发明旨在包括在其范围内的本发明化合物的多晶型物和溶剂化物。 因此，在本发明的治疗方法中，术语“施用”应涵盖使用本发明的化合物 或其多晶型物或溶剂化物治疗、改善或预防本文所述的综合征、障碍或疾 病的方法，其虽然没有被具体公开，但这将明显包括在本发明的范围内。

在另一个实施例中，本发明涉及用作药物的如式(I)的实例中所述的化 合物。

在另一个实施例中，本发明涉及如式(I)的实例中所述的化合物制备用 于治疗与升高的或不适当的CCR2活性相关联的疾病的药物的用途。

本发明包括在其范围内的本发明化合物的前药。一般来讲，此类前药 将为化合物的官能团衍生物，其可在体内容易地转化为所需的化合物。因 此，在本发明的治疗方法中，术语“施用”应涵盖用具体公开的化合物或 用可能未具体公开的化合物(但该未具体公开的化合物在向患者施用后， 在体内转化为具体公开的化合物)来治疗多种病症。选择和制备合适的前 药衍生物的常规程序在(例如)“Design of Prodrugs”，H.Bundgaard(编 辑)，Elsevier，1985中有所描述。

如果根据本发明的化合物具有至少一个手性中心，则它们可因此作为 对映体存在。在化合物拥有两个或更多个手性中心的情况下，它们可另外 作为非对映体存在。应理解，所有的此类异构体及其混合物涵盖在本发明 的范围内。

如果制备根据本发明的化合物的方法产生立体异构体的混合物，则这 些异构体可以通过常规技术如制备色谱来分离。化合物可以外消旋形式制 备，或者单独的对映体可通过对映体特异性合成或通过拆分制备。例如， 可通过标准的技术，如通过与具有旋光活性的酸(如(-)-二对甲基苯甲酰基- D-酒石酸和/或(+)-二对甲基苯甲酰基-L-酒石酸)成盐来形成非对映体对， 然后分级结晶并再生成游离的碱而将化合物拆分成它们的组分对映体。也 可通过形成非对映体酯或酰胺，然后进行色谱分离并移除手性助剂而拆分 化合物。作为另一种选择，可用手性HPLC柱拆分化合物。

在任何制备本发明化合物的方法中，可能必需和/或期望保护任何有关 分子上的敏感或反应性基团。这可借助于常规保护基团来实现，例如在 Protective Groups in Organic Chemistry，编辑J.F.W.McOmie，Plenum出版 社，1973年；以及T.W.Greene和P.G.M.Wuts，Protective Groups in  Organic Synthesis，John Wiley&Sons，1991的文献中找到。可使用本领域 已知的方法在方便的后续阶段移除保护基团。

式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸盐的制备

本发明的式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸盐可通过下列由相应的式(I-S) 的化合物的无定形琥珀酸盐进行制备：使式(I-S)的化合物的无定形琥珀酸 盐加热至在140℃至约150℃范围内的温度，优选加热至约140℃，并且随 后冷却至约室温，以实现结晶，如本文下文的实例52中更详细地描述的。

另选地，本发明的式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸盐可通过由适当选择 的溶剂例如甲基异丁基酮(MIBK)结晶，经由相应的式(I-S)的化合物的无定 形琥珀酸盐进行制备，如本文下文的实例53中更详细地描述的。对于式(I- S)的化合物的琥珀酸盐的结晶，适当选择的溶剂是除水、甲醇、乙醇、丙 酮、乙腈、乙酸异丙酯、硝基甲烷、四氢呋喃、甲基乙基酮、二氯甲烷、 甲苯、甲基异丙基酮(MIPK)以外。

式(I-S)的化合物的无定形琥珀酸盐可例如如本文下文的实例30中所述 进行制备。

X射线粉末衍射(pXRD)

式(I-S)的化合物的琥珀酸盐如下在实例中关于其X射线粉末衍射图 (pXRD)进行表征。使用配有超能(X′Celerator)探测器和梯度多层抛物面X射 线反射镜的X射线衍射仪(Philips型号X’PERT PRO PW3040型)检查样 品。以0.0165°2θ的步长和2000.025秒的每步时间，从3至40°2θ对样品进 行扫描。管电压和电流分别为45KV和40mA。将样品装填于零背景XRD 试样架上并在环境温度和湿度条件下进行扫描。

如图1中所示，对于式(I-S)的化合物的琥珀酸盐的代表性样品测量 pXRD光谱。在一个实施例中，式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸盐可通过其X 射线粉末衍射图进行表征，所述X射线粉末衍射图包含下表1中列出的峰 值。

表1：pXRD峰值：

式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸盐

在一个实施例中，式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸盐通过其pXRD图进 行表征，所述pXRD图包含具有大于或等于约3％的相对强度的峰值，如下 表2所列出的。

表2：pXRD峰值：

式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸盐

在一个实施例中，式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸盐通过其pXRD图进 行表征，所述pXRD图包含具有大于或等于约5％的相对强度的峰值，如下 表3所列出的。

表3：pXRD峰值：

式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸盐

在一个实施例中，式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸盐通过其pXRD图进 行表征，所述pXRD图包含具有大于或等于约10％的相对强度的峰值，如 下表4所列出的。

表4：pXRD峰值：

式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸盐

在另一个实施例中，本发明涉及如通过以°2θ列出的下列pXRD峰值表 征的式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸盐：10.03、10.51、11.27、13.87、19.22 和22.01。在另一个实施例中，本发明涉及如通过以°2θ列出的下列pXRD 峰值表征的式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸盐：11.27、13.87、19.22和 22.01。

差示扫描量热法(DSC)

对式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸盐进一步实施DSC分析。使用TA仪 器型号Q100O差示扫描量热仪测试代表性样品。在敞口铝盘中按原样分析 样品。DSC被编程为在氮吹扫下以10℃/分钟的加热速率从25℃加热到300 ℃。

对式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸盐的代表性样品完成热分析(经由 DSC扫描)，如图2所示。式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸盐表现出约156℃ 的开始熔融温度，约158℃的峰值熔融温度和焓68.3J/g。

热重分析(TGA)

对式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸盐进一步实施TGA分析。使用TA仪 器型号Q5000IR TGA热重分析热量计，就总重量减轻测试如接受的代表性 样品。将样品置于去皮重(tarred)的铝盘中，自动称重并插入TGA炉中。样 品以10℃/分钟的加热速率从25℃到300℃进行扫描，伴随90mL/分钟氮吹 扫和10mL/分钟氦平衡吹扫。

如图3中所示，对于式(I-S)的化合物的琥珀酸盐的代表性样品测量 TGA迹线。由于脱水/去溶剂化，在室温和144℃之间观察到1.8％重量减 轻；随后为在151℃下的分解。这些结果指示式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸 盐是水合物；其中所述水合物含有约0.6摩尔水/摩尔式(IS)的化合物。

水分等温分析

对式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸盐进一步实施水分吸附分析。使用 Hiden Isochema系统型号IGAsorp进行水分吸附分析。样品(～5mg)在不锈钢 丝网坩埚中进行处理。样品最初在60℃下干燥30分钟，随后通过在25℃ 下监测经过0％RH至90％RH范围的蒸气吸附/解吸进行评估。水分特征图 由2个蒸气吸附/解吸循环组成。

图4示出了关于式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸盐的代表性样品的两个 蒸气吸附/解吸循环。样品的重量增加3.8％直至70％RH，具有总共70％摄 取直至90％RH。此外，在多个吸附/解吸循环中观察到强滞后，其中约 2.7％水分(等于0.9摩尔水)在解吸期结束时保留。因此，式(I-S)的化合物 的结晶琥珀酸盐是吸湿性的。

溶解度

式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸盐就溶液溶解度进行测试，并且测量为 在水中以＞50mg/ml可溶，并且在0.1N NaOH、pH2、pH4和pH6柠檬酸缓 冲液；pH8和pH10硼酸盐缓冲液；模拟肠液、模拟胃液；0.5％甲醇和20％ HpbCD中以＞100mg/ml可溶。

一般反应方案

本发明的代表性化合物可根据下文所述的一般合成方法合成。式(I)的 化合物可通过本领域的技术人员已知的方法制备。以下反应方案仅意在表 示本发明的实例且绝不意在限制本发明。

其中A为O，并且其中R⁰、R²和R³各自为氢的式(I)的化合物可根据 方案1中概述的方法进行制备。

方案1

方案1示出了导致其中R⁰、R²和R³各自为氢的式(I)的化合物的合成 路线。商购可得的式(II)的酯通过与适当选择的碱例如LiHMDS等等反应进 行烷基化；并且随后在有机溶剂例如THF或二乙醚中在-78℃至20℃范围 内的温度下与叔丁基(2-碘乙氧基)二甲基硅烷反应。所得的烷基化酯随后通 过在0℃至60℃范围内的温度下与含水碱例如NaOH、KOH或LiOH反应 进行皂化，以获得相应的酸，式(III)的化合物。

随后在偶联剂例如EDCI/HOBt、PyBrop或DCC的存在下，在有机溶 剂例如THF、二氯甲烷或1，2-二氯乙烷中，在约0℃至约25℃范围内的温 度下，使式(III)的酸与适当选择的、商购可得的式(IV)的胺反应，以获得相 应的酰胺；随后通过在溶剂例如THF中在约0℃至60℃的温度范围内与氟 化物源例如TBAF反应，所述酰胺进行反应以使醇官能团脱保护，以获得 相应的式(V)的脱甲硅烷基醇。

在溶剂例如DCM或1，2-二氯乙烷中，在0℃至50℃的温度下，使式(V) 的醇与试剂例如N-(苯基硒)邻苯二甲酰亚胺(VI)或苯基氯化硒和路易斯酸例 如三氟化硼醚化物反应，以获得相应的式(VII)的环状醚。

在自由基引发剂例如AIBN的存在下，在溶剂例如苯或甲苯中，在60 ℃至120℃的温度下，使环状醚(VII)与适当选择的还原剂例如三-正丁基锡 烷或三(三甲基甲硅烷基)硅烷反应；并且通过在溶剂例如DCM、乙腈、 THF或二烷中，在0℃至80℃的温度下与酸例如TFA或HCl反应，所得 的中间体在N-Boc氨基甲酸酯处脱保护，以获得相应的式(VIII)的胺。

在适当选择的还原剂例如NaBH₄、NaBH₃CN或NaBH(OAc)₃的存在 下，在有机碱例如三乙胺、二异丙基乙胺或N-甲基吗啉中，连同或不连同 分子筛，在有机溶剂例如二氯甲烷、1，2-二氯乙烷或THF中，在0℃至约 25℃范围内的温度下，使式(VIII)与式(IX)的适当取代的酮反应，以获得相 应的其中R⁰、R²和R³各自是氢的式(I)的化合物。

本领域技术人员应认识到其中R₀不是H的式(I)的化合物可通过标准烷 基化操作由其中R₀为H的式(I)的化合物合成。此类烷基化操作包括但不限 于还原烷基化。例如，其中R₀为H的式(I)的化合物可溶解于溶剂例如THF 中，并且与醛和还原剂例如三乙酰氧基硼氢化钠反应。合适的温度包括从 约25℃延伸到50℃的范围。

式(X)的化合物可根据方案2中概述的方法进行制备。

方案2

通过在溶剂例如DCM或1，2-二氯乙烷，在0℃至50℃的温度下，与适 当选择的氧化剂例如戴斯-马丁氧化剂、斯文或氯铬酸吡啶盐反应，例如如 上文方案1中所述制备的式(V)的醇转换为相应的醛。随后在溶剂例如二乙 醚、THF或甲苯的存在下，在-78℃至25℃的温度下，所得的中间体与适当 选择的式(XI)的格氏试剂或锂试剂反应，以获得相应的式(X)的醇。

可通过用所述式(X)的化合物取代上文方案1中的式(V)的化合物，由 相应的(X)的化合物制备其中A为O并且其中R²除氢以外的式(I)的化合 物。

式(XII)的化合物可根据方案3中概述的方法进行制备。

方案3

在溶剂例如丙酮或水中，在0℃至50℃的温度下，例如如上文方案1 中所述制备的式(V)的醇与适当选择的氧化剂例如CrO₃、Ru/NaIO₄或 KMnO₄反应，以获得相应的式(XIII)的羧酸。

在溶剂例如甲醇或乙醇中，在-20℃至25℃的温度下，使式(XIII)的酸 与适当选择的烷化剂例如三甲基甲硅烷基(重氮甲烷)反应，以获得相应的式 (XIV)的甲酯。

在二乙醚、THF或甲苯的存在下，在-78℃至25℃的温度下，使式 (XIV)的甲酯与锂或格氏试剂(XI)反应，以获得取代的醇(XII)。

可通过用所述式(XII)的化合物取代上文方案1中的式(V)的化合物，由 相应的(XII)的化合物制备其中A为O并且其中R²和R³除氢以外的式(I)的 化合物。

式(XV)的化合物可根据方案4中概述的方法进行制备。

方案4

在溶剂例如DCM或1，2-二氯乙烷中，在0℃至50℃的温度下，使如上 文方案3中所述制备的适当选择的式(XIII)的酸与试剂例如N-(苯基硒)邻苯 二甲酰亚胺(VI)或苯基氯化硒和路易斯酸例如三氟化硼醚化物反应，以获得 相应的式(XV)的二环内酯。

可通过用所述式(XV)的化合物取代上文方案1中的式(V)的化合物，由 相应的(XV)的化合物制备其中A为O并且其中R²和R³与它们结合的碳原 子一起形成C＝O的式(I)的化合物。

式(XVI)的化合物可根据方案5中概述的方法进行制备。

方案5

在膦例如三苯基膦或三丁基膦的存在下并且在活化剂例如偶氮二甲酸 二异丙酯(DIAD)或偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)的存在下，在溶剂例如THF、 二乙醚、DCM或1，2-二氯乙烷中，在0℃至60℃的温度下(即在 Mitsunobu条件下)，例如如上文方案1中所述制备的式(V)的醇与硫代酸 例如硫代乙酸反应，以获得相应的式(XVII)的硫酯。

在溶剂例如甲醇或乙醇中，在0℃至60℃的温度下，使式(XVII)的硫 酯与含水碱例如NaOH、LiOH或KOH反应，以获得相应的式(XVIII)的硫 醇。

在溶剂例如苯或甲苯中，在60℃至120℃的温度下，式(XVIII)的硫醇 与自由基引发剂例如AIBN反应，以获得相应的式(XVI)的二环硫醚。

可根据方案5的操作，通过用化合物(XII)(如方案3中制备)代替化 合物(V)起始，制备其中A为S，R⁰为氢并且其中R₂和R₃除氢以外的式(I) 的化合物。另外，如方案1中所述的还原性烷化可由本领域普通技术人员 用作将其中A为S并且R₀为H的式(I)的这些化合物转化为其中A为S并 且R₀除H以外的式(I)的化合物的方法。

式(VIII)的化合物可替代地可根据方案6的操作进行制备。

方案6

通过在溶剂例如THF等等中，在约-20℃至约50℃的温度范围内，与 适当选择的脱甲硅烷基试剂例如四丁基氟化铵等等反应，使例如如上文方 案1中所述制备的式(III)的化合物环化，以获得相应的式(XVII)的内酯。

在适当选择的溶剂例如THF等等中，在约-20℃至约50℃的温度范围 内，使式(XVII)的内酯与适当选择的还原剂例如NaBH₄、LiAlH₄等等反 应，以获得相应的式(XVIII)的二醇。

在溶剂例如THF、EtOAc、CH₂Cl₂等等中，在约0℃至约100℃的温度 范围内，使式(XVIII)的二醇与适当选择的卤化试剂例如N-溴-琥珀酰亚胺、 N-碘-琥珀酰亚胺、Br₂等等反应，以获得相应的式(XIX)的中间体。

通过在溶剂或溶剂混合物例如THF、EtOAc、甲醇等等中，在适当选 择的催化剂例如Pd/C、Pt/C等等的存在下，在约室温下与氢气反应，使式 (XIX)的中间体氢化，以获得相应的式(XX)的醇。

另选地，在自由基引发剂例如AIBN等等的存在下，在溶剂例如苯、 甲苯等等中，在约60℃至约120℃范围内的温度下，式(XIX)的中间体可与 还原剂例如三正丁基锡烷、三(三甲基甲硅烷基)硅烷等等反应，以获得相应 的式(XX)的醇。

在溶剂例如丙酮、水等等中，在约0℃至约50℃范围内的温度下，使 式(XX)的醇与适当选择的氧化剂例如CrO₃、Ru/NaIO₄、KMnO₄等等反应， 以获得相应的式(XXI)的羧酸。

随后在偶联剂例如EDCI/HOBt、PyBrop、DCC等等的存在下，在有机 溶剂例如THF、二氯甲烷、1，2-二氯乙烷等等中，在约0℃至约25℃范围内 的温度下，使式(XXI)的酸与适当选择的式(IV)的胺反应，以获得相应的式 (XXII)的酰胺。

式(XXII)的酰胺通过在酸性条件例如在MeOH中的HCl下，在范围为 约25℃至约80℃的温度下反应进行脱保护，以获得相应的式(VIII)的化合 物，所述式(VIII)的化合物随后可如上文方案1中所述进行反应，以获得相 应的其中A为O并且其中R₀、R₂和R₃各自为氢的式(I)的化合物。

另选地，在适当选择的路易斯酸例如三氟化硼醚化物等等的存在下， 在溶剂例如DCM、1，2-二氯乙烷等等中，在约0℃至约50℃范围内的温度 下，式(XVIII)的化合物可与N-(苯基硒)邻苯二甲酰亚胺(VI)或苯基氯化硒反 应，以获得相应的其中X为Ph-Se的式(XIX)的环状醚。

在自由基引发剂例如AIBN等等的存在下，在溶剂例如苯、甲苯等等 中，在约60℃至约120℃范围内的温度下，式(XIX)的环状醚随后与适当选 择的还原剂例如三正丁基锡烷、三(三甲基甲硅烷基)硅烷等等反应，以获得 相应的式(XX)的中间体。

式(XX)的中间体随后如上所述反应，以获得相应的其中A为O并且其 中R₀、R₂和R₃各自为氢的式(I)的化合物。

另外，如方案1中所述的还原性烷化可由本领域普通技术人员用作将 其中A为O并且R₀为H的式(I)的这些化合物转化为其中A为O并且R₀除 H以外的式(I)的化合物的方法。

实例

本发明的代表性化合物可根据下文所述的一般合成方法合成。式(I)的 化合物可通过本领域的技术人员已知的方法制备。以下实例仅意在表示本 发明的实例且绝不意在限制本发明。

中间体1

(R)-3-甲氧基二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮

步骤A

4，4-二甲氧基四氢-2H-吡喃-3-醇

向具有顶置式搅拌器的12-L 4颈圆底烧瓶中装入MeOH(8.18L)和氢氧 化钾(400.5g，2.4摩尔)，同时在室温下搅拌直至碱完全溶解(观察到放 热)。将均质混合物用冰-丙酮浴冷却至0℃。向500-mL添加漏斗中装入四 氢-4H-吡喃-4-酮(250g，2.5摩尔)，并且在KOH-甲醇溶液温度达到0℃ 后，逐滴加入吡喃酮，同时使温度维持在＜5℃。在搅拌另外1.5小时后，经 历1.5小时时段分批加入碘(704g，1.1摩尔)，同时使温度维持在＜5℃。 允许反应混合物在室温下搅拌18小时。使反应浓缩，并且用甲苯(1.5L)处 理剩余残余并搅拌1/2小时。固体已沉淀，被过滤掉，并且使滤液蒸发，以提 供作为琥珀油的标题化合物(330g，81％)。

步骤B

4，4-二甲氧基二氢-2H-吡喃-3(4H)-酮

向配备顶置式搅拌器、热电偶和两个添加漏斗的12-L 4颈莫顿烧瓶中 装入草酰氯(130mL，1.49摩尔)和CH₂Cl₂(2.5L)。该溶液用干冰/丙酮浴 冷却至-72℃。经历1/2小时时段经由添加漏斗加入在CH₂Cl₂(530mL)中的 DMSO(178mL，2.50摩尔)，同时使温度维持在或低于-70℃。在添加完 成后，将混合物搅拌另外30分钟，并且从添加漏斗缓慢加入(～1/2小时) 在CH₂Cl₂(630mL)中的4，4-二甲氧基四氢-2H-吡喃-3-醇(如步骤A中制 备，200g，1.23摩尔)，使温度维持在或低于-70℃。在搅拌另外30分钟， 加入Et₃N(870mL，6.24摩尔)，使温度达到-42℃，并且回降至大约-70 ℃。允许搅拌的混合物经过18小时搅拌至室温。将混合物过滤，并且使滤 液浓缩，以提供粗产物加上Et₃N-HCl固体。将混合物过滤，并且用EtOAc (2x500mL)清洗。将滤液再次浓缩为浆。浆用EtOAc(大约1L)稀释，过 滤并再次浓缩，以获得含有产物和残留DMSO作为主要组分的琥珀油。使 用在庚烷中的乙酸乙酯混合物在硅胶上纯化后，标题化合物(285g，90％)作 为褐色固体提供。

步骤C1

(R)-4，4-二甲氧基四氢-2H-吡喃-3-醇

向配备顶置式空气搅拌器、具有氮入口适配器的添加漏斗、冷凝器和 热电偶的12-L 4颈圆底烧瓶中装入S-(-)-2-甲基-CBS-唑硼烷(40g，0.12 摩尔)和THF(2.2L)。使混合物在氮下加温至40℃，随后经由注射器将 Me₂S-BH₃(108mL，1.15摩尔)加入THF催化剂混合物内。经历7小时时 段逐滴加入装入在THF(2.1L)中的4，4-二甲氧基二氢-2H-吡喃-3(4H)-酮 (如先前步骤中制备，165g，0.59摩尔)的添加漏斗。在添加完成后，允 许反应在40℃下搅拌18小时。使反应在冰-丙酮浴中冷却至10℃，并且通 过经历1小时时段缓慢加入MeOH(1.1L)得到淬灭。去除冷却浴，并且允许 混合物加温至室温3小时。在气体逸出停止后，使混合物在旋转蒸发器上 浓缩，以获得188g。使用EtOAc和庚烷的混合物在硅胶上的纯化提供作为 黄色油的标题化合物(166g，99％，手性GC 93％ee)。

步骤C(替代方案)

(R)-4，4-二甲氧基四氢-2H-吡喃-3-醇

向配备顶置式空气搅拌器、具有氮入口适配器的添加漏斗、冷凝器和 热电偶的12-L 4颈圆底烧瓶中装入S-(-)-2-甲基-CBS-唑硼烷(78g，0.28 摩尔)和THF(2.7L)。使混合物在氮下加温至40℃，同时经过40分钟经由 添加漏斗将硼烷-N，N-二乙基苯胺络合物(280mL，1.57摩尔)加入THF-催 化剂混合物中。向4-L锥形瓶中装入在THF(2.7L)中的4，4-二甲氧基二氢- 2H-吡喃-3(4H)-酮(如步骤B中制备，225g，1.4摩尔)，并且经由计量泵 经历8小时时段逐滴加入。在添加后，允许反应在40℃下搅拌18小时。使 反应在冰-丙酮浴中冷却至10℃，并且通过经历1小时时段缓慢加入MeOH (1.35L)得到淬灭；在MeOH添加完成后，去除冷却浴，并且允许混合物加 温至室温3小时。在气体逸出停止后，使混合物在旋转蒸发器上浓缩，以 获得365g。使用在庚烷中的ETOAC混合物在硅胶上的纯化提供作为黄色 油的标题化合物(157g，69％，手性GC 95.5％ee)。

步骤D

(R)-3，4，4-T三甲氧基四氢-2H-吡喃

向配备顶置式空气搅拌器、具有氮入口适配器的添加漏斗、冷凝器和 热电偶的12-L 4颈圆底烧瓶中装入在THF(2.4L)中的(R)-4，4-二甲氧基四 氢-2H-吡喃-3-醇(如先前步骤中制备，163g，1.0摩尔)，并且在冰/丙酮浴 中搅拌直至＜0℃。一次性加入KOtBu(113g，1.0摩尔)，并且在搅拌45 分钟后，经过15分钟经由添加漏斗加入硫酸二甲酯(95mL，1.0摩尔)。 允许反应在室温下搅拌2小时。将反应混合物倾入含有H₂O(1.2L)和 CH₂Cl₂(1.2L)的分离烧瓶内，并且使层分离。用CH₂Cl₂(900mL)反萃取水 层。将合并的有机层用卤水(1.0L；注：有机层在顶部)洗涤，在MgSO₄上干燥，过滤并蒸发，以提供作为淡黄色油的标题化合物(177.1g，99％， 手性GC 94.4％ee)。

步骤E

(R)-3-甲氧基二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮

用经过45分钟经由添加漏斗加入的HCl溶液(浓缩的，595mL，7.21 摩尔)处理在＜0℃下在冰/丙酮浴中的THF(3.6L)和H₂O(1.1L)中的(R)-3，4， 4-三甲氧基四氢-2H-吡喃(如先前步骤中制备，141g，0.80摩尔)的搅拌混 合物，同时使温度保持在＜3℃下。在添加完成后，允许反应在0℃下搅拌 1.5小时。使反应蒸发直至～1.9L浓缩物剩余。将浓缩物转移至分液漏斗， 并且用CH₂Cl₂(3×1L)萃取。将合并的有机级分用饱和NaHCO₃(1L)、卤水 (1L)洗涤，在MgSO₄上干燥，过滤并蒸发，以提供作为油的标题化合物 (71.4g，69％，手性GC 92％ee)，所述油在静止后固化。旋光度： [α]²⁵(D)-6.97°(c＝0.8222，MeOH)；对于C₆H₁₀O₃的元素分析计算值为：C， 53.59；H，7.58；实测值为：C，53.64；H，7.65。

中间体2

(S)-3-甲氧基二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮

步骤A

(S)-4，4-二甲氧基四氢-2H-吡喃-3-醇

向配备顶置式空气搅拌器、具有氮入口适配器的添加漏斗、冷凝器和 热电偶的5-L 4颈圆底烧瓶中装入(R)-(+)-2-甲基-CBS-唑硼烷(34g，0.12 摩尔)和THF(1.2L)。使混合物在氮下加温至40℃，随后经由注射器将 Me₂S-BH₃(63mL，0.67摩尔)加入THF催化剂混合物内。经历8小时时 段逐滴加入装入在THF(1.2L)中的4，4-二甲氧基二氢-2H-吡喃-3(4H)-酮 (如中间体1，步骤中制备，96g，0.59摩尔)的添加漏斗。在添加后，允 许反应在40℃下搅拌18小时。使反应在冰-丙酮浴中冷却至10℃，并且通 过经过45分钟缓慢加入MeOH(600mL)得到淬灭。去除冷却浴，并且允许 混合物加温至室温3小时。在气体逸出停止后，使混合物在旋转蒸发器上 浓缩，以获得132g。使用EtOAc和庚烷的混合物在硅胶上的纯化提供作为 黄色油的标题化合物(80.5g，83％，手性GC 95％ee)。

步骤A(替代方案1)

(S)-4，4-二甲氧基四氢-2H-吡喃-3-醇

反应根据中间体2，步骤A的操作执行，使用0.1当量的(R)-(+)-2-甲 基-CBS-唑硼烷，并且用BH₃-THF复合物替代Me₂S-BH₃。产物(S)-4，4-二 甲氧基四氢-2H-吡喃-3-醇以88％得率和60％ee获得。

步骤A(替代方案2)

(S)-4，4-二甲氧基四氢-2H-吡喃-3-醇

反应根据中间体2，步骤A的操作执行，使用0.1当量的(R)-(+)-2-甲 基-CBS-唑硼烷，并且用儿茶酚硼烷替代Me₂S-BH₃。产物(S)-4，4-二甲氧 基四氢-2H-吡喃-3-醇以20％得率和60％ee获得。

步骤B

(S)-3，4，4-三甲氧基四氢-2H-吡喃

向配备顶置式空气搅拌器、具有氮入口适配器的添加漏斗、冷凝器和 热电偶的3-L 4颈圆底烧瓶中装入在THF(1.1L)中的(S)-4，4-二甲氧基四氢- 2H-吡喃-3-醇(如先前步骤中制备，80g，0.49摩尔)，并且在冰/丙酮浴中 搅拌直至＜0℃。一次性加入KOtBu(56g，0.49摩尔)，并且在搅拌45分 钟后，经过15分钟经由添加漏斗加入硫酸二甲酯(47mL，0.49摩尔)。允 许反应在室温下搅拌3小时。将反应混合物倾入含有H₂O(1.25L)和CH₂Cl₂(1.25L)的分离烧瓶内，并且使层分离。用CH₂Cl₂(750mL)反萃取水层。将 合并的有机层用卤水(1L；注：有机层在顶部)洗涤，在MgSO₄上干燥， 过滤并蒸发，以提供作为淡黄色油的标题化合物(83.5g，96％，手性GC  94.6％ee)。

步骤C

(S)-3-甲氧基二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮

向配备顶置式空气搅拌器、氮入口适配器、热电偶和隔膜的5-L 4颈圆 底烧瓶中装入(S)-3，4，4-三甲氧基四氢-2H-吡喃(如先前步骤中制备，83g， 0.47摩尔)、THF(2.1L)、H₂O(670mL)，并且在冰/丙酮浴中搅拌直至＜0 ℃，其后经过30分钟经由添加漏斗加入HCl溶液(浓缩的，350mL，4.24 摩尔)，同时使温度保持在＜2℃。在添加完成后，允许反应在0℃下搅拌1 小时。使反应蒸发直至～1.2L浓缩物剩余。将浓缩物转移至分液漏斗，并且 用CH₂Cl₂(3×750mL)萃取。将合并的有机级分用饱和NaHCO₃(500mL)、 卤水(500mL)洗涤，在MgSO₄上干燥，过滤并蒸发，以提供作为油的标题 化合物(46.9g，77％，手性GC 91％ee)，所述油在静止后固化。旋光 度：[α]²⁵(D)+3.65°(c＝1.020，MeOH)；对于C₆H₁₀O₃的元素分析计算值 为：C，53.39；H，7.57；实测值为：53.59；H，7.62。

实例1

((3aS，5S，6aR)-5-((3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢-2H-环戊并[b]呋喃- 3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮

步骤A

(1S，4S)-4-((叔丁氧羰基)氨基)-1-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)环 戊-2-烯基甲酸甲酯

在-78℃下在Ar下经过1小时向在THF中的LiHMDS溶液(72.9mL 1 M溶液，72.9mmol，2.2当量)中，逐滴加入在THF(40mL)中的(1R，4S)-4- ((-叔丁氧羰基)氨基)环戊-2-烯基甲酸甲酯溶液(根据US 20050101628 A1的 操作(参见第31页，第1列，操作B，步骤B)制备)，8.00g， 33.2mmol，1当量)。在搅拌30分钟后，加入在THF(20mL)中的叔丁基 (2-碘乙氧基)二甲基硅烷溶液(13.29g，46.4mmol，1.4当量)。使溶液在- 78℃下保持15分钟，随后经过2小时逐步加温至0℃，并且在0℃下保持1 小时。加入1N HCl和水，用DCM萃取溶液，合并有机物，在MgSO₄上干 燥并浓缩。通过用5至20％EtOAc/庚烷洗脱的色谱法(400g柱)的纯化提 供步骤A的标题化合物。¹H NMR(氯仿-d)δ：5.76-5.85(m，2H)，4.90(d，J ＝9.0Hz，1H)，4.72-4.82(m，1H)，3.69(s，3H)，3.57-3.64(m，2H)，2.24(dd，J＝ 13.9，8.0Hz，1H)，2.14(dd，J＝14.1，3.5Hz，2H)，1.71-1.82(m，1H)，1.40-1.50 (m，9H)，0.84-0.90(m，9H)，0.03(s，6H)。ESI-MS(m/z)：对于C20H37NO5Si 的计算值为：422.2(M+23)；实测值为：422.2。

步骤B

(1S，4S)-4-((叔丁氧羰基)氨基)-1-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)环 戊-2-烯羧酸

在室温下向在甲醇(100mL)中的步骤A产物(7.89g，19.74mmol，1当 量)溶液中加入1N NaOH(59.2mL，59.2mmol，3.0当量)。在搅拌过夜 后，去除甲醇，加入1N HCl直至溶液为酸性，用DCM萃取溶液，合并有 机物，在MgSO₄上干燥并浓缩，以提供步骤B的标题化合物。¹H NMR (氯仿-d)δ：5.85(br.s.，2H)，4.97(br.s.，1H)，4.80(br.s.，1H)，3.71(br.s.， 2H)，1.99-2.41(m，3H)，1.92(br.s.，1H)，1.44(br.s.，9H)，0.88(s，9H)，0.06(br. s.，6H)。ESI-MS(m/z)：对于C19H35NO5Si的计算值为：408.2(M+23)；实 测值为：408.3。

步骤C

叔丁基((1S，4S)-4-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-4-(3-(三氟甲基)- 5，6，7，8-四氢-1，6-萘啶-6-羰基)环戊-2-烯-1-基)氨基甲酸酯

在室温下向在DCM(40mL)中的步骤B产物(3.47g，8.99mmol，1当 量)溶液中加入HOBt水合物(2.34g，15.3mmol，1.7当量)和EDCI (2.58g，13.5mmol，1.5当量)。在15分钟后，加入DIEA(7.8mL， 45.3mmol，5当量)和3-(三氟甲基)-5，6，7，8-四氢-1，6-萘啶-2HCl(3.71g， 13.5mmol，1当量)，并且将溶液在室温下搅拌过夜。加入饱和NaHCO₃， 用DCM萃取溶液，合并有机物，在MgSO₄上干燥并浓缩。通过用25至 60％EtOAc/庚烷洗脱的色谱法(120g柱)的纯化提供步骤C的标题化合 物。¹H NMR(氯仿-d)δ：8.71(s，1H)，7.69(s，1H)，6.19(d，J＝5.4Hz，1H)， 5.76(dd，J＝5.6，2.0Hz，1H)，4.68-4.86(m，4H)，3.85-4.07(m，2H)，3.54- 3.65(m，2H)，3.13(t，J＝5.7Hz，2H)，2.58(dd，J＝13.3，7.7Hz，1H)，1.98-2.16 (m，2H)，1.85-1.97(m，1H)，1.42(s，9H)，0.84(s，9H)，-0.02(d，J＝4.4Hz， 6H)。对于C28H42F3N3O4Si的计算值为：570.3(M+1)；实测值为： 570.3。

步骤D

叔丁基((1S，4S)-4-(2-羟乙基)-4-(3-(三氟甲基)-5，6，7，8-四氢-1，6-萘啶-6-羰基) 环戊-2-烯-1-基)氨基甲酸酯

在室温下向在THF(50mL)中的步骤C产物(3.52g，6.18mmol，1当 量)溶液中加入在THF中的TBAF(12.36mL 1M溶液，12.36mmol，2当 量)。在1小时后，加入水，用DCM萃取溶液，合并有机物，在MgSO₄上干燥并浓缩。通过用2至6％甲醇/DCM洗脱的色谱法(80g柱)的纯化 提供步骤D的标题化合物。¹H NMR(氯仿-d)δ：8.71(s，1H)，7.70(s，1H)， 6.28(dd，J＝5.9，2.0Hz，1H)，5.78(dd，J＝5.9，2.0Hz，1H)，4.70-4.95(m，4H)， 3.99-4.10(m，1H)，3.85-3.96(m，1H)，3.68(br.s.，2H)，3.09-3.18(m，2H)， 2.65(dd，J＝12.9，7.4Hz，1H)，1.99-2.21(m，3H)，1.82-1.93(m，1H)，1.38- 1.49(m，9H)。对于C22H28F3N3O4的计算值为：456.2(M+1)；实测值为： 456.2。

步骤E

叔丁基((3aS，5S，6S，6aS)-6-(苯基硒烷基)-3a-(3-(三氟甲基)-5，6，7，8-四氢-1，6-萘 啶-6-羰基)六氢-2H-环戊并[b]呋喃-5-基)氨基甲酸酯

在室温下在Ar下向在DCM(40mL)中的步骤D产物(1.51g， 3.32mmol，1当量)溶液中加入N-(苯基硒)邻苯二甲酰亚胺(1.60g， 4.97mmol，1.5当量)和BF₃-醚化物(0.042mL，0.33mmol，0.1当量)。 在2小时后，加入1N NaOH并搅拌5分钟，加入水，用DCM萃取溶液， 合并有机物，在MgSO₄上干燥并浓缩。通过用50至100％EtOAc/庚烷洗脱 的色谱法(80g柱)的纯化提供步骤E的标题化合物。¹H NMR(氯仿-d) δ：8.72(s，1H)，7.69(s，1H)，7.50-7.62(m，2H)，7.22-7.27(m，3H)，5.35(s， 1H)，5.06(d，J＝8.1Hz，1H)，4.79-5.01(m，1H)，4.66-4.78(m，1H)，4.53(br.s.， 1H)，3.78-4.06(m，4H)，3.68-3.78(m，1H)，3.05-3.19(m，2H)，2.32(dd，J＝ 11.6，5.8Hz，2H)，2.16(d，J＝10.9Hz，2H)，1.36(s，9H)。对于 C28H32F3N3O4Se的计算值为：634.2(M+23)；实测值为：634.1。

步骤F

叔丁基((3aS，5S，6aR)-3a-(3-(三氟甲基)-5，6，7，8-四氢-1，6-萘啶-6-羰基)六氢- 2H-环戊并[b]呋喃-5-基)氨基甲酸酯

在Ar下使在苯(20mL)中的步骤E产物(1.51g，2.67mmol，1当量)、 三(三甲基甲硅烷基)硅烷(1.72mL，5.34mmol，2当量)和AIBN(438mg， 2.67mmol，1当量)溶液加温至80℃。在3小时后，使溶液浓缩。通过用 50至100％EtOAc/庚烷洗脱的色谱法(80g柱)的纯化提供步骤F的标题化 合物。¹H NMR(氯仿-d)δ：8.72(br.s.，1H)，7.71(br.s.，1H)，4.97-5.09(m， 1H)，4.70-4.91(m，2H)，4.56-4.69(m，1H)，4.28(br.s.，1H)，3.80-4.07(m， 3H)，3.71(q，J＝7.3Hz，1H)，3.13(br.s.，2H)，2.07-2.53(m，4H)，1.81(br.s.， 1H)，1.61-1.72(m，1H)，1.40(s，9H)。对于C22H28F3N3O4的计算值为： 478.2(M+23)；实测值为：478.2。

步骤G

((3aS，5S，6aR)-5-氨基六氢-2H-环戊并[b]呋喃-3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢- 1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮

在室温下向在DCM(100mL)中的步骤F产物(12.54g，24.8mmol，1 当量)溶液中加入TFA(20mL，261mmol，10.6当量)。在14、时后，使 溶液浓缩。加入3M NaOH，用DCM萃取溶液，合并有机物，在MgSO₄上 干燥并浓缩，以提供步骤G的标题化合物。¹H NMR(氯仿-d)δ：8.72(s， 1H)，7.69(br.s.，1H)，5.07(d，J＝4.9Hz，1H)，4.71-4.90(m，2H)，3.84-4.03(m， 3H)，3.58-3.71(m，2H)，3.09-3.20(m，2H)，2.14-2.41(m，3H)，1.99-2.13(m， 1H)，1.65-1.75(m，1H)，1.43-1.58(m，1H)。对于C17H20F3N3O2的计算值 为：356.2(M+1)；实测值为：356.3。

步骤H

((3aS，5S，6aR)-5-((3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢-2H-环戊并[b]呋喃- 3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮

在室温下向在DCM中的步骤G产物(119mg，0.33mmol，1当量)溶 液中加入乙酸(0.01mL，0.17mmol，0.5当量)、3-甲氧基四氢-4H-吡喃-4- 酮(131mg，1.0mmol，3当量)和三乙酰氧基硼氢化钠(355mg， 1.67mmol，5当量)。在搅拌过夜后，加入饱和NaHCO₃，用DCM萃取溶 液，合并有机物，在MgSO₄上干燥并浓缩。通过用4至8％甲醇/含氨DCM 洗脱的色谱法(12g柱)的纯化提供实例1的标题化合物。¹H NMR(氯仿- d)δ：8.72(br.s.，1H)，7.70(br.s.，1H)，4.98-5.14(m，1H)，4.70-4.89(m，2H)， 3.80-4.18(m，5H)，3.25-3.75(m，8H)，3.07-3.24(m，2H)，2.53-2.89(m，1H)， 2.01-2.48(m，4H)，1.39-1.88(m，5H)。对于C23H30F3N3O4的计算值为： 470.2(M+1)；实测值为：470.2。

通过手性HPLC分离实例1获得4种产物，实例2、实例3、实例4和 实例5。

实例2

((3aS，5S，6aR)-5-(((3S，4S)-3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢-2H-环戊并 [b]呋喃-3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮

¹H NMR(氯仿-d)δ：8.71(s，1H)，7.70(br.s.，1H)，5.05(d，J＝4.6Hz， 1H)，4.68-4.88(m，2H)，4.08(dd，J＝12.5，2.9Hz，1H)，3.81-4.04(m，4H)，3.66 (td，J＝8.8，6.8Hz，1H)，3.50-3.62(m，1H)，3.34-3.46(m，4H)，3.24-3.34(m， 2H)，3.14(br.s.，2H)，2.76(d，J＝9.5Hz，1H)，2.14-2.46(m，3H)，1.99-2.14(m， 1H)，1.45-1.86(m，5H)。对于C23H30F3N3O4的计算值为：470.2(M+1)； 实测值为：470.2。

实例3

((3aS，5S，6aR)-5-(((3R，4R)-3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢-2H-环戊并 [b]呋喃-3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮

¹H NMR(氯仿-d)δ：8.72(s，1H)，7.70(br.s.，1H)，5.06(d，J＝4.6Hz， 1H)，4.78(br.s.，2H)，4.05(dd，J＝12.6，4.0Hz，1H)，3.84-4.02(m，4H)，3.65(td， J＝8.9，7.0Hz，1H)，3.55(dt，J＝9.7，5.0Hz，1H)，3.35-3.45(m，4H)，3.27-3.35 (m，2H)，3.14(br.s.，2H)，2.75-2.85(m，1H)，2.35(br.s.，1H)，2.24(dd，J＝13.0， 5.4Hz，2H)，2.00-2.15(m，1H)，1.59-1.85(m，4H)，1.48(ddd，J＝13.2，10.8， 4.9Hz，1H)。对于C23H30F3N3O4的计算值为：470.2(M+1)；实测值为： 470.2。

实例4

((3aS，5S，6aR)-5-(((3S，4R)-3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢-2H-环戊并 [b]呋喃-3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮(甲氧基吡喃 环的相对立体化学是反式的，绝对立体化学是未知的，但与实例5的相 反)

¹H NMR(氯仿-d)δ：8.72(s，1H)，7.70(br.s.，1H)，5.01(d，J＝4.6Hz， 1H)，4.78(br.s.，2H)，4.04-4.16(m，1H)，3.81-4.04(m，4H)，3.49-3.70(m， 2H)，3.27-3.44(m，4H)，3.15(t，J＝5.3Hz，2H)，2.96-3.09(m，2H)，2.59(br.s.， 1H)，2.19-2.44(m，3H)，2.00-2.13(m，1H)，1.95(dt，J＝13.4，2.1Hz，1H)，1.62 -1.87(m，2H)，1.57(ddd，J＝13.4，10.9，5.0Hz，1H)，1.38-1.51(m，1H)。对于 C23H30F3N3O4的计算值为：470.2(M+1)；实测值为：470.2。

实例5

((3aS，5S，6aR)-5-(((3R，4S)-3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢-2H-环戊并 [b]呋喃-3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮 (甲氧基吡喃环的相对立体化学是反式的，绝对立体化学是未知的，但与 实例4的相反)

¹H NMR(氯仿-d)δ：8.72(s，1H)，7.69(br.s.，1H)，5.06(d，J＝4.6Hz， 1H)，4.67-4.93(m，2H)，4.10(d，J＝7.1Hz，1H)，3.79-4.04(m，4H)，3.48-3.69 (m，2H)，3.29-3.42(m，4H)，3.14(br.s.，2H)，2.96-3.10(m，2H)，2.59-2.72(m， 1H)，2.21-2.43(m，3H)，2.02-2.15(m，1H)，1.98(d，J＝24.5Hz，1H)，1.57- 1.81(m，2H)，1.30-1.48(m，2H)。对于C23H30F3N3O4的计算值为：470.2 (M+1)；实测值为：470.2。

实例6

((3aS，5S，6aR)-5-((四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢-2H-环戊并[b]呋喃-3a-基)(3- (三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮

遵循实例1，步骤H中所述的操作，由实例1，步骤G的产物和四氢- 4H-吡喃-4-酮的反应制备标题化合物。

¹H NMR(氯仿-d)δ：8.72(br.s.，1H)，7.70(br.s.，1H)，5.04(d，J＝ 4.6Hz，1H)，4.78(br.s.，2H)，3.95(s，2H)，3.97(s，3H)，3.53-3.75(m，2H)，3.28 -3.49(m，2H)，3.14(br.s.，2H)，2.62-2.81(m，1H)，2.29(dd，J＝12.8，5.5Hz， 3H)，1.99-2.17(m，1H)，1.60-1.92(m，3H)，1.18-1.57(m，5H)。对于 C22H28F3N3O3的计算值为：440.2(M+1)；实测值为：440.2。

实例7

((3aS，5S，6aR)-5-((3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢-2H-环戊并[b]呋喃- 3a-基)(7-(三氟甲基)-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-基)甲酮

遵循实例1，步骤C中所述的操作，并且随后遵循实例1步骤D直到 H，由实例1，步骤B的产物和7-(三氟甲基)-1，2，3，4-四氢异喹啉的反应制备 标题化合物。

¹H NMR(氯仿-d)δ：7.45(d，J＝7.6Hz，2H)，7.23-7.31(m，1H)，4.99- 5.10(m，1H)，4.72(br.s.，2H)，4.02-4.16(m，1H)，3.70-4.02(m，4H)，3.47- 3.59(m，1H)，3.22-3.46(m，6H)，2.86-3.09(m，3H)，2.77(br.s.，1H)，2.13- 2.44(m，3H)，1.99-2.11(m，1H)，1.35-1.88(m，5H)。对于C24H31F3N2O4 的计算值为：470.2(M+1)；实测值为：470.2。

实例8

((3aS，5S，6aR)-5-((四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢-2H-环戊并[b]呋喃-3a-基)(7- (三氟甲基)-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-基)甲酮

遵循实例1，步骤C中所述的操作，遵循步骤D直到G，并且随后使 用四氢-4H-吡喃-4-酮遵循实例1，步骤H中所述的操作，由实例1步骤B 的产物和7-(三氟甲基)-1，2，3，4-四氢异喹啉的反应制备标题化合物。

JNJ46713953，¹H NMR(氯仿-d)δ：7.31-7.50(m，2H)，7.26-7.29(m， 1H)，5.05(d，J＝4.6Hz，1H)，4.72(br.s.，2H)，3.90-4.05(m，3H)，3.70-3.85(m， 2H)，3.52-3.70(m，2H)，3.30-3.45(m，2H)，2.95(br.s.，2H)，2.70(br.s.，1H)， 2.18-2.44(m，3H)，2.00-2.12(m，1H)，1.60-1.89(m，2H)，1.23-1.53(m， 5H)。对于C23H29F3N2O3的计算值为：439.2(M+1)；实测值为：439.2。

实例9

((3aS，5S，6aR)-5-((3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢-2H-环戊并[b]呋喃- 3a-基)(7-(三氟甲氧基)-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-基)甲酮

遵循实例1，步骤C中所述的操作，并且随后遵循实例1步骤D直到 H，由实例1步骤B的产物和7-(三氟甲氧基)-1，2，3，4-四氢异喹啉的反应制 备标题化合物。

对于C24H31F3N2O5的计算值为：485.2(M+1)；实测值为：485.2。

实例10

((3aS，5S，6aR)-2-环丙基-5-((3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢-2H-环戊 并[b]呋喃-3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮

步骤A

叔丁基((1S，4S)-4-(2-氧代乙基)-4-(3-(三氟甲基)-5，6，7，8-四氢-1，6-萘啶-6-羰基) 环戊-2-烯-1-基)氨基甲酸酯

在0℃下向在DCM(20mL)中的实例1，步骤D产物(417mg， 0.92mmol，1当量)溶液中加入戴斯-马丁氧化剂(427mg，1.01mmol，1.1 当量)。在1小时后，加入饱和碳酸氢钠和硫代硫酸钠，在10分钟后，用 DCM萃取水溶液，合并有机物，在MgSO₄上干燥并浓缩。通过用30至 60％EtOAc/庚烷洗脱的色谱法(12g柱)的纯化提供步骤A的标题化合 物。¹H NMR(氯仿-d)δ：9.74(s，1H)，8.70(s，1H)，7.72(s，1H)，6.31(dd，J＝ 5.6，1.7Hz，1H)，5.91(dd，J＝5.6，1.5Hz，1H)，5.01(d，J＝17.1Hz，1H)，4.65- 4.87(m，3H)，4.07-4.21(m，1H)，3.79-3.95(m，1H)，3.10(q，J＝5.6Hz，2H)， 3.03(d，J＝16.6Hz，1H)，2.63(dd，J＝13.6，7.2Hz，1H)，2.52(dd，J＝16.6，1.5Hz， 1H)，2.11(dd，J＝13.1，7.7Hz，1H)，1.44(s，9H)。对于C22H26F3N3O4的计算 值为：454.2(M+1)；实测值为：454.2。

步骤B

叔丁基((1S，4S)-4-(2-环丙基-2-羟乙基)-4-(3-(三氟甲基)-5，6，7，8-四氢-1，6-萘 啶-6-羰基)环戊-2-烯-1-基)氨基甲酸酯

在0℃下在Ar下经过30分钟，向在THF(5mL)中的环丙基溴化镁溶液 (6.88mL在THF中的0.5M溶液，3.44mmol，8当量)中，逐滴加入在 THF(17mL)中的步骤A产物(195mg，0.43mmol，1当量)溶液。在45分 钟后，加入饱和NH₄Cl，用乙酸乙酯萃取溶液，合并有机物，在MgSO₄上 干燥并浓缩。通过用30至100％EtOAc/庚烷洗脱的色谱法(12g柱)的纯 化提供作为非对映体混合物的步骤B的标题化合物。¹H NMR(氯仿-d) δ：8.70(br.s.，1H)，7.70(br.s.，1H)，6.11-6.42(m，1H)，5.77(t，J＝5.1Hz，1H)， 4.81(d，J＝12.2Hz，4H)，4.03(dt，J＝12.8，6.2Hz，1H)，3.81-3.98(m，1H)，3.59 -3.75(m，2H)，3.03-3.25(m，2H)，2.69-3.00(m，2H)，2.19-2.67(m，3H)，1.91 -2.18(m，3H)，1.55-1.88(m，5H)，1.42(s，9H)，0.88-0.99(m，1H)，0.42-0.56 (m，2H)，0.14-0.35(m，2H)。对于C25H32F3N3O4的计算值为：496.2 (M+1)；实测值为：496.2。

通过获得实例10，步骤B的产物并遵循从实例1，步骤E直到H的操 作，来制备实例10的标题化合物。

¹H NMR(氯仿-d)δ：8.72(s，1H)，7.69(br.s.，1H)，5.01-5.29(m，1H)， 4.65-4.90(m，2H)，3.74-4.15(m，5H)，3.70(dd，J＝11.0，2.9Hz，1H)，3.23- 3.55(m，7H)，3.14(br.s.，2H)，3.05(ddd，J＝10.0，8.2，6.0Hz，1H)，2.69-2.87 (m，1H)，2.36-2.52(m，1H)，2.06-2.36(m，3H)，1.66-1.97(m，2H)，1.33-1.52 (m，1H)，0.83-0.98(m，1H)，0.43-0.66(m，2H)，0.36(dt，J＝8.6，4.1Hz，1H)， 0.10-0.24(m，1H)。对于C26H34F3N3O4的计算值为：510.3(M+1)；实测 值为：510.3。

实例11

((3aS，5S，6aR)-2-乙基-5-((3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢-2H-环戊并 [b]呋喃-3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮

遵循实例10，步骤B中所述的操作，并且随后获得该产物并遵循从实 例1，步骤E直到H的操作，由实例10，步骤A的产物和乙基溴化镁的反 应制备标题化合物。

¹H NMR(MeOD)δ：8.72(s，1H)，8.05(br.s.，1H)，4.94-5.13(m，1H)，4.70 -4.86(m，2H)，4.25(br.s.，1H)，3.76-4.14(m，4H)，3.62-3.75(m，1H)，3.35- 3.60(m，7H)，3.13(dd，J＝3.3，1.6Hz，2H)，2.33-2.75(m，3H)，1.69-2.10(m， 5H)，1.39-1.69(m，2H)，0.87-1.01(m，3H)。对于C25H34F3N3O4的计算值 为：498.3(M+1)；实测值为：498.2。

实例12

((3aS，5S，6aR)-5-((3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)-2-甲基六氢-2H-环戊并 [b]呋喃-3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮

遵循实例10，步骤B中所述的操作，并且随后获得该产物并遵循从实 例1，步骤E直到H的操作，由实例10，步骤A的产物和甲基溴化镁的反 应制备标题化合物。

¹H NMR(MeOD)δ：8.72(br.s.，1H)，8.05(br.s.，1H)，4.96-5.21(m，1H)， 4.70-4.87(m，2H)，4.21-4.36(m，1H)，3.77-4.18(m，5H)，3.32-3.62(m，7H)， 3.00-3.23(m，2H)，2.32-2.76(m，3H)，1.68-2.06(m，5H)，1.16-1.29(m， 3H)。对于C24H32F3N3O4的计算值为：484.2(M+1)；实测值为：484.2。

实例13

((3aS，5S，6aR)-5-((3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)-2-丙基六氢-2H-环戊并 [b]呋喃-3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮

遵循实例10，步骤B中所述的操作，并且随后获得该产物并遵循从实 例1，步骤E直到H的操作，由实例10，步骤A的产物和丙基溴化镁的反 应制备标题化合物。

对于C26H36F3N3O4的计算值为：512.3(M+1)；实测值为：512.2。

实例14

((3aS，5S，6aR)-2-异丁基-5-((3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢-2H-环戊 并[b]呋喃-3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮

遵循实例10，步骤B中所述的操作，并且随后获得该产物并遵循从实 例1，步骤E直到H的操作，由实例10，步骤A的产物和异丁基溴化镁的 反应制备标题化合物。

对于C27H38F3N3O4的计算值为：526.3(M+1)；实测值为：526.3。

实例15

((3aS，5S，6aR)-2-环己基-5-((3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢-2H-环戊 并[b]呋喃-3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮

遵循实例10，步骤B中所述的操作，并且随后获得该产物并遵循从实 例1，步骤E直到H的操作，由实例10，步骤A的产物和环己基溴化镁的 反应制备标题化合物。

¹H NMR(氯仿-d)δ：8.71(br.s.，1H)，7.69(br.s.，1H)，4.98-5.21(m， 1H)，4.65-4.94(m，2H)，3.68-4.17(m，5H)，3.23-3.64(m，8H)，3.13(br.s.， 2H)，2.69-2.86(m，1H)，1.86-2.35(m，6H)，1.32-1.79(m，8H)，1.10-1.30(m， 3H)，0.86-1.06(m，2H)。对于C29H40F3N3O4的计算值为：552.3(M+1)； 实测值为：553.2。

实例16

((3aS，5S，6aR)-5-((3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)-2-苯基六氢-2H-环戊并 [b]呋喃-3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮

遵循实例10，步骤B中所述的操作，并且随后获得该产物并遵循从实 例1，步骤E直到H的操作，由实例10，步骤A的产物和苯基溴化镁的反 应制备标题化合物。

对于C29H34F3N3O4的计算值为：546.3(M+1)；实测值为：546.3。

实例17

((3aS，5S，6aR)-5-((3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基) 六氢-2H-环戊并[b]呋喃-3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲 酮

步骤A

叔丁基((1S，4S)-4-(2-羟基-2-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)乙基)-4-(3-(三氟甲基)- 5，6，7，8-四氢-1，6-萘啶-6-羰基)环戊-2-烯-1-基)氨基甲酸酯

在-78℃下在Ar下向在THF(8mL)中的1-甲基吡唑(0.165mmol， 1.98mmol，3当量)溶液中加入n-BuLi(0.77mL在己烷中的2.5M溶液， 1.92mmol，2.9当量)，并且将溶液搅拌1小时。随后经过5分钟加入在 THF(8mL)中的实例10，步骤A(300mg，0.66mmol，1当量)溶液。在1 小时后，加入饱和NH₄Cl，用乙酸乙酯萃取溶液，合并有机物，在MgSO₄上干燥并浓缩。通过用50至100％EtOAc/庚烷到5至10％甲醇/DCM洗脱 的色谱法(12g柱)的纯化提供作为非对映体混合物的步骤A的标题化合 物。¹H NMR(氯仿-d)δ：8.70(s，1H)，7.62-7.80(m，1H)，7.33(d，J＝8.8Hz， 1H)，6.19-6.49(m，1H)，6.09(br.s.，1H)，5.87(dd，J＝17.9，5.6Hz，1H)，4.54- 5.03(m，5H)，3.74-3.96(m，4H)，3.48(s，1H)，2.90-3.23(m，2H)，2.46-2.87 (m，2H)，2.06-2.39(m，2H)，1.73-1.98(m，1H)，1.43(br.s.，9H)。对于 C27H34F3N5O4的计算值为：558.2(M+23)；实测值为：558.2。

通过获得实例17，步骤A的产物并遵循从实例1，步骤E直到H的操 作，来制备实例17的标题化合物。

¹H NMR(氯仿-d)δ：8.73(br.s.，1H)，7.72(br.s.，1H)，7.32-7.48(m， 1H)，5.90-6.28(m，1H)，5.08-5.36(m，1H)，4.64-4.98(m，2H)，3.76-4.17(m， 7H)，3.50-3.74(m，1H)，3.23-3.50(m，6H)，3.16(br.s.，2H)，2.66-2.86(m， 1H)，2.15-2.64(m，4H)，1.96-2.05(m，1H)，1.42-1.91(m，3H)。对于 C27H34F3N5O4的计算值为：550.3(M+1)；实测值为：550.2。

实例18

((3aS，5S，6aR)-5-((3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)-2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基) 六氢-2H-环戊并[b]呋喃-3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲 酮

遵循实例17，步骤A中所述的操作，并且随后获得该产物并遵循从实 例1，步骤E直到H中所述的操作，由实例10，步骤A的产物和1-甲基咪 唑的反应制备标题化合物。

对于C27H34F3N5O4的计算值为：550.3(M+1)；实测值为：550.2。

实例19

((3aS，5S，6aR)-5-((3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)-2-(噻唑-2-基)六氢-2H- 环戊并[b]呋喃-3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮

遵循实例17，步骤A中所述的操作，并且随后获得该产物并遵循从实 例1，步骤E直到H中所述的操作，由实例10，步骤A的产物和噻唑的反 应制备标题化合物。

对于C26H31F3N4O4S的计算值为：553.3(M+1)；实测值为：553.3。

实例20

((3aS，5S，6aR)-5-((3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)-2，2-二甲基六氢-2H-环 戊并[b]呋喃-3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮

步骤A

2-((1S，4S)-4-((叔丁氧羰基)氨基)-1-(3-(三氟甲基)-5，6，7，8-四氢-1，6-萘啶-6-羰 基)环戊-2-烯-1-基)乙酸

在0℃下向在丙酮(10mL)中的实例1，步骤D产物(508mg， 1.12mmol，1当量)溶液中加入琼斯氧化溶液(0.46mL，1.23mmol，1.1当 量)。在2小时后，加入水，用乙酸乙酯萃取水溶液，合并有机物，在 MgSO₄上干燥并浓缩，以提供未纯化在下一步中使用的步骤A的产物。对 于C22H26F3N3O5的计算值为：492.2(M+23)；实测值为：492.1。

步骤B

甲基2-((1S，4S)-4-((叔丁氧羰基)氨基)-1-(3-(三氟甲基)-5，6，7，8-四氢-1，6-萘啶- 6-羰基)环戊-2-烯-1-基)乙酸酯

在0℃下向在甲醇(20mL)中的步骤A产物(436mg，0.84mmol，1当 量)溶液中加入三甲基甲硅烷基重氮甲烷(5mL在己烷中的2M溶液， 10mmol，11.9当量)，直至黄色持续。使黄色溶液浓缩。通过用40至 80％EtOAc/庚烷洗脱的色谱法(24g柱)的纯化提供步骤B的产物。¹H  NMR(氯仿-d)δ：8.70(s，1H)，7.69(s，1H)，6.37(d，J＝5.4Hz，1H)，5.87(d，J ＝5.4Hz，1H)，4.98(d，J＝17.4Hz，1H)，4.63-4.83(m，3H)，4.07-4.20(m，1H)， 3.79-3.93(m，1H)，3.64(s，3H)，3.08-3.19(m，2H)，3.04(d，J＝15.9Hz，1H)， 2.62(dd，J＝13.4，7.1Hz，1H)，2.46(d，J＝15.7Hz，1H)，2.01-2.12(m，1H)，1.43 (s，9H)。对于C23H28F3N3O5的计算值为：506.2(M+23)；实测值为： 506.2。

步骤C

叔丁基((1S，4S)-4-(2-羟基-2-甲基丙基)-4-(3-(三氟甲基)-5，6，7，8-四氢-1，6-萘 啶-6-羰基)环戊-2-烯-1-基)氨基甲酸酯

在0℃下在Ar下经过30分钟，向在THF(6mL)中的甲基氯化镁溶液 (2.62mL在THF中的3M溶液，7.86mmol，20当量)中，逐滴加入在 THF(6mL)中的步骤B产物(190mg，0.39mmol，1当量)溶液。在30分 钟后，加入饱和NH₄Cl，用乙酸乙酯萃取溶液，合并有机物，在MgSO₄上 干燥并浓缩。通过用40至100％EtOAc/庚烷洗脱的色谱法(12g柱)的纯 化提供步骤C的产物。¹H NMR(氯仿-d)δ：8.70(s，1H)，7.69(s，1H)，6.47 (d，J＝5.4Hz，1H)，5.75(dd，J＝5.6，1.5Hz，1H)，4.60-4.96(m，4H)，4.05(d，J＝ 13.7Hz，1H)，3.89(dt，J＝13.3，6.4Hz，1H)，3.07-3.19(m，2H)，2.54(dd，J＝ 12.6，6.5Hz，1H)，2.10-2.27(m，2H)，1.80-1.96(m，2H)，1.35-1.49(m，9H)， 1.26(s，3H)，1.22(s，3H)。对于C24H32F3N3O4的计算值为：506.2 (M+23)；实测值为：506.2。

通过获得步骤C的产物并遵循从实例1，步骤E直到H中所述的操 作，来制备实例20的标题化合物。

¹H NMR(氯仿-d)δ：8.72(br.s.，1H)，7.69(br.s.，1H)，5.16-5.27(m， 1H)，4.78(br.s.，2H)，4.01-4.13(m，1H)，3.75-3.99(m，4H)，3.53-3.67(m， 1H)，3.22-3.48(m，6H)，3.12(br.s.，2H)，2.79(d，J＝10.0Hz，1H)，2.09-2.40 (m，3H)，1.84-2.00(m，2H)，1.68-1.78(m，2H)，1.42-1.53(m，1H)，1.34(s， 3H)，1.16(s，3H)。对于C25H34F3N3O4的计算值为：498.2(M+1)；实测值 为：498.2。

实例21

(3aS，5S，6aR)-5-((3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)-3a-(3-(三氟甲基)-5，6，7，8- 四氢-1，6-萘啶-6-羰基)六氢-2H-环戊并[b]呋喃-2-酮

通过获得实例20，步骤A的产物并遵循从实例1，步骤E直到H中所 述的操作，来制备实例21的标题化合物。

¹H NMR(氯仿-d)δ：8.74(br.s.，1H)，7.71(br.s.，1H)，5.70(d，J＝ 4.2Hz，1H)，4.55-4.88(m，2H)，4.08(d，J＝11.7Hz，1H)，3.93(d，J＝11.5Hz， 1H)，3.80(br.s.，1H)，3.47-3.61(m，2H)，3.24-3.46(m，5H)，3.15(br.s.，2H)， 3.03(d，J＝14.2Hz，1H)，2.83(br.s.，2H)，2.23-2.47(m，2H)，1.53-1.76(m， 6H)。对于C23H28F3N3O5的计算值为：484.2(M+1)；实测值为：484.2。

实例22

((3aR，5S，6aR)-5-((3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢-2H-环戊并[b]噻吩- 3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮

步骤A

S-(2-((1S，4S)-4-((叔丁氧羰基)氨基)-1-(3-(三氟甲基)-5，6，7，8-四氢-1，6-萘啶-6- 羰基)环戊-2-烯-1-基)乙基)硫代乙酸酯

在室温下在Ar下向在THF(40mL)中的实例1，步骤D产物 (1950mg，3.98mmol，1当量)溶液中加入三苯基膦(2.09g，7.96mmol， 2当量)、偶氮二甲酸二异丙酯(1.55mL，7.96mmol，2当量)和硫代乙酸 (0.59mL，7.96mmol，2当量)。在2小时后，加入水和饱和NaHCO₃，用 醚萃取水溶液，合并有机物，在MgSO₄上干燥并浓缩。通过用30至60％ EtOAc/庚烷洗脱的色谱法(80g柱)的纯化提供步骤A的产物。¹H NMR (氯仿-d)δ：8.71(s，1H)，7.71(s，1H)，6.21(dd，J＝5.6，1.7Hz，1H)，5.80(dd， J＝5.6，2.0Hz，1H)，4.75-4.94(m，3H)，4.64-4.75(m，1H)，3.96-4.07(m，1H)， 3.86-3.96(m，1H)，3.14(t，J＝5.7Hz，2H)，2.69-2.79(m，2H)，2.65(dd，J＝ 13.4，8.1Hz，1H)，2.27(s，3H)，1.95-2.13(m，2H)，1.81-1.94(m，1H)，1.44(s， 9H)。对于C24H30F3N3O4S的计算值为：536.2(M+23)；实测值为： 536.2。

步骤B

叔丁基((1S，4S)-4-(2-巯乙基)-4-(3-(三氟甲基)-5，6，7，8-四氢-1，6-萘啶-6-羰基) 环戊-2-烯-1-基)氨基甲酸酯

在室温下在Ar下向在甲醇(100mL)中的步骤A产物(1.74g， 3.39mmol，1当量)溶液(除气的)中加入0.2N NaOH(85mL，85mmol， 5当量)，所述NaOH通过在添加前使Ar鼓泡经过该溶液进行除气。在2 小时后，使甲醇浓缩，加入6N HCl直至溶液为酸性，用DCM萃取水溶 液，合并有机层，在MgSO₄上干燥并浓缩，以提供未纯化在下一步中使用 的步骤B的产物。对于C22H28F3N3O3S的计算值为：494.2(M+23)；实测 值为：494.1。

步骤C

叔丁基((3aR，5S，6aR)-3a-(3-(三氟甲基)-5，6，7，8-四氢-1，6-萘啶-6-羰基)六氢- 2H-环戊并[b]噻吩-5-基)氨基甲酸酯

在室温下在Ar下向在苯(300mL)中的步骤B产物(1.25g，2.65mmol， 1当量)溶液(除气的)中加入AIBN(435mg，2.65mmol，1当量)，并 且使溶液加热至85℃共3天，随后浓缩。通过用25至60至100％EtOAc/ 庚烷洗脱的色谱法(40g柱)的纯化提供步骤C的产物。¹H NMR(氯仿- d)δ：8.72(s，1H)，7.69(s，1H)，4.65-4.90(m，3H)，4.23-4.60(m，2H)，3.87- 4.06(m，2H)，3.10-3.16(m，2H)，2.99-3.09(m，1H)，2.87-2.98(m，1H)，1.95- 2.38(m，6H)，1.40(s，9H)。对于C22H28F3N3O3S的计算值为：494.2 (M+23)；实测值为：494.1。

通过获得实例22，步骤C的产物并遵循实例1，步骤G和H中所述的 操作，来制备实例22的标题化合物。

¹H NMR(氯仿-d)δ：8.71(s，1H)，7.69(s，1H)，4.73-4.93(m，2H)，4.67 (br.s.，1H)，4.04-4.17(m，1H)，3.94(t，J＝5.9Hz，3H)，3.61-3.77(m，1H)，3.36 -3.47(m，4H)，3.26-3.36(m，2H)，3.06-3.19(m，2H)，2.80-3.05(m，3H)，2.31 (br.s.，2H)，2.05-2.21(m，3H)，1.83-1.99(m，1H)，1.60-1.83(m，2H)。对于 C23H30F3N3O3S的计算值为：486.2(M+1)；实测值为：486.2。

实例23

((3aS，5S，6aR)-5-(((3S，4S)-3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢-2H-环戊并 [b]呋喃-3a-基)(4-(4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)甲酮

步骤A

叔丁基((5S，7S)-1-氧代-2-氧杂螺[4.4]壬-8-烯-7-基)氨基甲酸酯

向具有顶置式空气搅拌器、2-L添加漏斗和氮入口的12-L三颈圆底烧 瓶中装入实例1，步骤A的产物(1149g，2.875摩尔，1当量)和THF (5.75L)。向添加漏斗中装入TBAF(1M在THF中的溶液，2.875L，2.875 摩尔，1当量)，并且经过～1小时逐滴加入该溶液。使温度从17增加到21 ℃，并且反应在结束时为透明橙色。将反应在室温下搅拌1小时，通过 TLC和HPLC判断反应何时完全。将反应倾入装入EtOAc(4L)的22-L分离 烧瓶，并且用卤水(2L)洗涤有机层。将有机层用另外的卤水(3×2L)洗涤， 并且弃去这些水性级分。加入庚烷(4L)，并且用水(3×2L)、卤水(2×2L)洗 涤有机层，并且通过NMR就n-Bu₄NX的去除检查澄清的有机层。使有机 层在45℃下蒸发至约750mL，当溶液变得混浊时，加入庚烷(800mL)，并 且导致白色固体的瞬间结晶。加入更多庚烷(300mL)，并且使混合物在40℃ 下在旋转蒸发仪(rotovap)浴上涡旋10分钟。将冰加入浴中，并且使悬浮液 在13℃下搅拌10分钟。固体在布氏漏斗上进行过滤，用庚烷(3×100mL) 洗涤并提供步骤A的产物。¹H NMR(氯仿-d)δ：6.02(dd，J＝5.4，2.4Hz， 1H)，5.77(d，J＝5.4Hz，1H)，5.21(d，J＝9.0Hz，1H)，4.91(t，J＝8.7Hz，1H)， 4.37(dd，J＝7.5，6.5Hz，2H)，2.21-2.39(m，3H)，2.07(dd，J＝13.8，2.6Hz，1H)， 1.44(s，9H)。对于C13H19NO4的计算值为：276.1(M+23)；实测值为： 276.1。

步骤B

叔丁基((1S，4S)-4-(2-羟乙基)-4-(羟基甲基)环戊-2-烯-1-基)氨基甲酸酯

在使用前用氮吹扫配备机械搅拌器、具有温度探头和氮入口的克莱森 (Claisen)适配器和N₂出口的5-L三颈圆底烧瓶2小时。加入步骤A的产物 (255.9g，1.01摩尔，1当量)和MeOH(2L)，并且使溶液在冰浴中冷却至 2℃。NaBH₄(75g，1.98摩尔，2当量)以～5相等份加入；在回到6℃之 前，使温度放热至17℃，这时加入下一份。添加花费～2.5小时，在末次添 加后通过HPLC判断反应完全。通过添加含水NH₄Cl(饱和的，1L)，在 7℃下淬灭反应，其中温度升高至约10℃。使白色混浊混合物在旋转蒸发下 浓缩至约1L(45℃浴)，这时导致具有一些液体的白色固体。将混合物用 水和EtOAc(各1L)稀释，转移至分液漏斗并且使层分离。用EtOAc(3× 250mL)萃取水层。将合并的有机物用卤水(125mL)洗涤，在MgSO₄上干 燥，通过硅藻土过滤，并且在55℃的浴温下蒸发，并且提供作为稠油的步 骤B产物。¹H NMR(氯仿-d)δ：5.74(s，2H)，4.65-4.95(m，2H)，3.70(t，J＝ 5.7Hz，2H)，3.40-3.57(m，2H)，2.76(br.s.，1H)，2.28(br.s.，1H)，2.19(dd，J＝ 13.4，8.8Hz，1H)，1.70(t，J＝5.7Hz，2H)，1.55(dd，J＝13.8，4.0Hz，1H)，1.44(s， 9H)。对于C13H23NO4的计算值为：280.2(M+23)；实测值为：280.2。

步骤C

叔丁基((3aR，5S，6S，6aS)-3a-(羟基甲基)-6-(苯基硒烷基)六氢-2H-环戊并[b]呋 喃-5-基)氨基甲酸酯

向配备机械搅拌器、具有氮入口和温度探头的克莱森适配器以及氮出 口的12-L三颈圆底烧瓶中装入步骤B产物(382g，1.26摩尔，1当量)和 CH₂Cl₂(6.5L)。加入N-(苯基硒)邻苯二甲酰亚胺(419g，1.39摩尔，1.1当 量)，随后通过刻度量筒直接加入BF₃醚化物(16mL，0.126摩尔，0.1当 量)。使反应从15℃稳定上升到24℃，并且在10分钟内，反应形成粉红 色沉淀物。十分钟后，反应变稠，具有白色沉淀物，并且温度开始降低。 反应通过HPLC进行检查，并且发现是完全的。反应通过硅藻土进行过滤 (去除邻苯二甲酰亚胺杂质)，将滤饼用CH₂Cl₂(750mL)洗涤直至滤液不 再是橙色。将滤液转移至分液漏斗，用含水NaOH(0.5M，2×1350mL)、 卤水(2×1L)洗涤，并且在Na₂SO₄上干燥有机层。[第二次处理用382g步骤 B产物在相同条件下进行，并且逐步建立并在该点时合并]。剩下约3L有机 物时，加入甲苯(3L，～4mL/g原材料)，并且继续蒸发。在甲苯添加后不 久，发生结晶。将20-L圆底烧瓶转移至加热罩，并且使内容物加热至80 ℃，直至固体溶解。将烧瓶转移回旋转蒸发器，参考材料用于接种结晶， 并且使烧瓶涡旋(不含热)直至产物开始结晶。将冰加入浴中，并且使烧 瓶的内容物在15℃(外部温度)下涡旋30分钟。将产物过滤，用冰冷的甲 苯洗涤并风干1小时，并且提供步骤C的产物。¹H NMR(氯仿-d)δ：7.49- 7.56(m，2H)，7.23-7.29(m，3H)，5.05(br.s.，1H)，4.46(br.s.，1H)，4.29(s，1H)， 3.86-3.97(m，2H)，3.57-3.69(m，3H)，1.98-2.08(m，1H)，1.86-1.97(m，2H)， 1.73-1.86(m，2H)，1.41(s，9H)。对于C19H27NO4Se的计算值为：436.1 (M+23)；实测值为：436.1。

步骤D

叔丁基((3aR，5S，6aR)-3a-(羟基甲基)六氢-2H-环戊并[b]呋喃-5-基)氨基甲酸酯

在使用前用氮吹扫配备机械搅拌器、加热罩、温度探头、氮入口和具 有氮出口的回流冷凝器的22-L四颈圆底烧瓶30分钟。加入步骤C的产物 (603.5g，1.46摩尔，1当量)、AIBN(241g，1.46摩尔，1当量)、三 (三甲基甲硅烷基)硅烷(910mL，2.93摩尔，2当量)和甲苯(16.3L)，并且 用氮吹扫通过悬浮液20分钟使悬浮液除气。使反应加热至80-83℃共1小 时，这个时间后将热关闭，并且使反应经过12-18小时冷却至室温。TLC 显示反应完全。将反应直接倾入BIOTAGE干燥5-kg柱内，所述柱用16L 在庚烷中的50％EtOAc洗脱，随后为32L EtOAc，并且提供金色稠油的步 骤D产物，所述金色稠油在静置时缓慢结晶。¹H NMR(氯仿-d)δ：4.64 (brd.s，1H)，4.07-4.25(m，2H)，3.89(ddd，J＝8.8，7.2，4.5Hz，1H)，3.53-3.67 (m，3H)，2.17(dd，J＝13.3，6.2Hz，1H)，1.98-2.06(m，1H)，1.86-1.97(m，1H)， 1.68-1.81(m，2H)，1.46-1.56(m，2H)，1.44(s，9H)。对于C13H23NO4的计 算值为：202.2(M-55)；实测值为：202.2。

步骤E

(3aS，5S，6aR)-5-((叔丁氧羰基)氨基)六氢-2H-环戊并[b]呋喃-3a-羧酸

用氮吹扫配备机械搅拌器、氮入口、具有氮出口的1-L添加漏斗、温 度探头和用于冷却的外部浴的22-L四颈圆底烧瓶过夜。加入步骤D产物 (426g，1.57摩尔)和丙酮(8.1L)的溶液，并且使烧瓶冷却至7℃，并且向 添加漏斗中装入琼斯试剂(710mL)。经过1小时20分钟逐滴加入氧化剂， 使温度保持在7-9℃之间。在加入前200mL后，形成使得搅拌非常困难的 绿色球。在加入约1/2氧化剂后，运行LCMS以跟踪反应。在添加结束时， 导致具有一点红色(过量琼斯)的橄榄绿色悬浮液。去除冰浴，使反应在 室温下搅拌1小时，在这个时间后判断反应完全。加入异丙醇(40mL)，将 反应搅拌25分钟，并且加入水(800mL)，所述水引起绿色块与丙酮/水层的 良好分离。使水/丙酮滗出并蒸发。使绿色块溶解于水(1.5L)中，转移至分液 漏斗并用CH₂Cl₂(1L)萃取。通过TLC检查水层，并且发现不含产物，因此 将水层弃去。保存有机萃取物用于以后合并。使绿色水/丙酮浓缩物蒸发至 约5-7L，直至溶液看起来混浊。将浓缩物转移至分液漏斗，并且用CH₂Cl₂(1×3L，3×1L)萃取，并且在每次萃取后就产物的存在检查水层。将合并的 萃取物用卤水(250mL)洗涤，所述洗涤引起可怕的乳状液。通过添加水和 EtOAc(～500mL)破坏乳状液。使有机层干燥(Na₂SO₄)，但不是非常有效， 因为一些水在过滤期间漏了进来。接近蒸发结束，蒸馏速率减慢，并且导 致黄色稠油。将MeCN(500mL)加入罐中，使旋转蒸发器浴加温至50℃， 并且用参考材料接种内容物。白色细小固体在10分钟左右内缓慢形成。接 种第二次完成，并且在50℃下继续涡旋另外10分钟。在视觉上检测到结 晶，使浴排出并用冰填充，并且使烧瓶在0℃下涡旋30分钟，导致浓稠的 白色固体。将固体过滤，用冰冷的MeCN(2×100mL)洗涤并使固体风干过 夜。步骤E的产物作为白色、自由流动的固体分离。¹H NMR(MeOH)δ： 4.43(d，J＝5.4Hz，1H)，4.00-4.13(m，1H)，3.89-3.98(m，1H)，3.63(td，J＝9.1， 5.7Hz，1H)，2.54(ddd，J＝12.6，5.7，3.2Hz，1H)，1.93-2.13(m，3H)，1.74-1.87 (m，1H)，1.53-1.66(m，1H)，1.43(s，9H)。对于C13H21NO5的计算值为： 294.1(M+23)；实测值为：294.1。

步骤F

(苄基4-((3aS，5S，6aR)-5-((叔丁氧羰基)氨基)六氢-2H-环戊并[b]呋喃-3a-羰基) 哌嗪-1-羧酸酯

遵循来自实例1，步骤C的操作，由步骤E的产物和苄基哌嗪-1-羧酸 酯的反应制备步骤F的产物。对于C25H35N3O6的计算值为：496.2 (M+23)；实测值为：496.0。

步骤G

苄基4-((3aS，5S，6aR)-5-氨基六氢-2H-环戊并[b]呋喃-3a-羰基)哌嗪-1-羧酸酯

遵循来自实例1，步骤G的操作，由步骤F的产物的反应制备步骤G 的产物。对于C20H27N3O4的计算值为：374.2(M+1)；实测值为：374.2。

步骤H

苄基4-((3aS，5S，6aR)-5-(((3S，4S)-3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢-2H- 环戊并[b]呋喃-3a-羰基)哌嗪-1-羧酸酯

遵循实例1中所述的操作，由步骤G的产物和(R)-3-甲氧基二氢-2H-吡 喃-4(3H)-酮(中间体1)的反应制备步骤H的产物。对于C26H37N3O6的 计算值为：488.3(M+1)；实测值为：488.1。

步骤I

((3aS，5S，6aR)-5-(((3S，4S)-3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢-2H-环戊并 [b]呋喃-3a-基)(哌嗪-1-基)甲酮

使在乙醇(10mL)中的步骤H产物(405mg，0.83mmol，1当量)和5％ Pd/C(100mg)溶液在室温下在氢气球下放置过夜。将悬浮液通过硅藻土过 滤，用甲醇洗涤，并且将滤液浓缩，以获得作为胶质的步骤I产物。对于 C18H31N3O4的计算值为：354.2(M+1)；实测值为：354.2。

步骤J

((3aS，5S，6aR)-5-(((3S，4S)-3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢-2H-环戊并 [b]呋喃-3a-基)(4-(4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)哌嗪-1-基)甲酮

在Ar下使在小瓶中的10∶1二烷/DMSO(1mL)的混合物中的步骤I产 物(40mg，0.11mmol，1当量)、DIEA(0.06mL，0.34mmol，3当量)和 2-氯-4-(三氟甲基)嘧啶(0.04mL，0.34mmol，3当量)溶液加热至100℃过 夜。加入水，用DCM萃取溶液，合并有机物，在MgSO₄上干燥并浓缩。 通过用5至10％MeOH/DCM洗脱的色谱法(4g柱)的纯化提供实例23的 标题化合物。¹H NMR(氯仿-d)δ：8.53(d，J＝4.6Hz，1H)，6.83(d，J＝ 4.9Hz，1H)，5.05(d，J＝4.4Hz，1H)，4.10(dd，J＝12.3，2.8Hz，1H)，3.51-4.00 (m，13H)，3.36-3.47(m，4H)，3.25-3.36(m，2H)，2.78(dt，J＝10.2，3.8Hz，1H)， 2.34(ddd，J＝12.3，6.7，3.3Hz，1H)，2.20(dt，J＝13.0，6.6Hz，2H)，2.01(dt，J＝ 12.3，8.3Hz，1H)，1.45-1.90(m，4H)。对于C23H32F3N5O4的计算值为： 500.2(M+1)；实测值为：500.3。

实例24

((3aS，5S，6aR)-5-(((3S，4S)-3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢-2H-环戊并 [b]呋喃-3a-基)(4-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)哌嗪-1-基)甲酮

通过遵循实例23，步骤J中所述的操作，获得实例23步骤I的产物并 与2-氯-6-(三氟甲基)吡啶反应，来制备实例24的标题化合物。¹H NMR (氯仿-d)δ：7.63(t，J＝8.1Hz，1H)，7.01(d，J＝7.3Hz，1H)，6.81(d，J＝8.6Hz， 1H)，5.05(d，J＝4.4Hz，1H)，4.09(dd，J＝12.3，3.1Hz，1H)，3.96(qd，J＝7.8， 3.5Hz，2H)，3.47-3.88(m，10H)，3.37-3.47(m，4H)，3.26-3.37(m，2H)，2.78 (dt，J＝10.2，3.6Hz，1H)，2.34(ddd，J＝12.2，6.7，3.4Hz，1H)，2.13-2.27(m，2H)， 2.01(dt，J＝12.3，8.5Hz，1H)，1.60-1.88(m，4H)，1.54(ddd，J＝13.1，10.9， 4.8Hz，1H)。对于C24H33F3N4O4的计算值为：499.3(M+1)；实测值为： 499.4。

实施例25

((3aS，5S，6aR)-5-(((3S，4S)-3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢-2H-环戊并 [b]呋喃-3a-基)((1S，4S)-5-(4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)-2，5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2- 基)甲酮

通过遵循实例23，步骤F中所述的操作，并且随后遵循实例23，步骤 G直到J中所述的操作，获得实例23，步骤E的产物并与(1S，4S)-N-Cbz- 2，5-二氮杂-双环[2.2.1]庚烷反应，来制备实例25的标题化合物。¹H NMR (氯仿-d)δ：8.50(d，J＝4.4Hz，1H)，6.83(d，J＝4.6Hz，1H)，4.70-5.20(m， 3H)，4.07(t，J＝10.1Hz，1H)，3.83-4.00(m，2H)，3.50-3.79(m，5H)，3.22- 3.48(m，7H)，2.79(d，J＝9.5Hz，1H)，1.82-2.30(m，7H)，1.40-1.82(m，4H)。 对于C24H32F3N5O4的计算值为：512.2(M+1)；实测值为：512.3。

实例26

((3aS，5S，6aR)-5-(((3S，4S)-3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢-2H-环戊并 [b]呋喃-3a-基)((1S，4S)-5-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2，5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2- 基)甲酮

通过遵循实例23，步骤F中所述的操作，随后遵循实例23，步骤G 直到I中所述的操作，获得实例23，步骤E的产物并与(1S，4S)-N-Cbz-2，5- 二氮杂-双环[2.2.1]庚烷反应，并且随后遵循实例23，步骤J中所述的操 作，使该产物与2-氯-6-(三氟甲基)吡啶反应，来制备实例26的标题化合 物。¹H NMR(氯仿-d)δ：7.56(t，J＝7.9Hz，1H)，6.94(dd，J＝7.0，3.5Hz， 1H)，6.40-6.57(m，1H)，4.65-5.18(m，3H)，4.05(d，J＝12.5Hz，1H)，3.82- 3.99(m，2H)，3.61-3.70(m，2H)，3.19-3.59(m，10H)，2.53-2.85(m，1H)，1.84 -2.29(m，7H)，1.44-1.78(m，4H)。对于C25H33F3N4O4的计算值为：511.3 (M+1)；实测值为：511.2。

实例27

((3aS，5S，6aR)-5-(((3S，4S)-3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢-2H-环戊并 [b]呋喃-3a-基)((1S，4S)-5-(2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)-2，5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2- 基)甲酮

通过遵循实例23，步骤F中所述的操作，随后遵循实例23，步骤G 直到I中所述的操作，获得实例23，步骤E的产物并与(1S，4S)-N-Cbz-2，5- 二氮杂-双环[2.2.1]庚烷反应，并且随后遵循实例23，步骤J中所述的操 作，使该产物与4-氯-2-(三氟甲基)嘧啶反应，来制备标题化合物。¹H NMR (氯仿-d)δ：8.27-8.43(m，1H)，6.24-6.60(m，1H)，5.25-5.48(m，1H)，4.50 -5.23(m，2H)，4.07(d，J＝12.2Hz，1H)，3.85-4.02(m，2H)，3.58-3.73(m，3H)， 3.23-3.56(m，9H)，2.55-2.91(m，1H)，1.86-2.35(m，7H)，1.35-1.82(m， 4H)。对于C24H32F3N5O4的计算值为：512.2(M+1)；实测值为：512.2。

实例28

((3aS，5S，6aR)-5-(((3S，4S)-3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢-2H-环戊并 [b]呋喃-3a-基)(4-(2-(三氟甲基)嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)甲酮

通过遵循实例23，步骤J中所述的操作，获得实例23，步骤I的产物 并与4-氯-2-(三氟甲基)嘧啶反应，来制备标题化合物。¹H NMR(氯仿-d) δ：8.37(d，J＝6.4Hz，1H)，6.63(d，J＝6.1Hz，1H)，5.04(d，J＝4.6Hz，1H)，4.10 (dd，J＝12.2，2.7Hz，1H)，3.90-4.02(m，2H)，3.47-3.90(m，10H)，3.36-3.46 (m，4H)，3.26-3.36(m，2H)，2.77(dt，J＝10.1，3.7Hz，1H)，2.32(ddd，J＝12.1， 6.7，3.4Hz，1H)，2.19(td，J＝12.8，6.2Hz，2H)，1.95-2.08(m，1H)，1.59-1.86 (m，4H)，1.54(ddd，J＝13.1，11.1，4.9Hz，1H)。对于C23H32F3N5O4的计算值 为：500.2(M+1)；实测值为：500.2。

实例29

((3aS，5S，6aR)-5-((3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢-2H-环戊并[b]呋喃- 3a-基)(3-(三氟甲氧基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮

遵循实例1，步骤C中所述的操作，并且随后遵循实例1，步骤G和 H中所述的操作，由实例23，步骤E的产物和3-(三氟甲氧基)-5，6，7，8-四氢- 1，6-萘啶的反应制备化合物。¹H NMR(氯仿-d)δ：8.40(br.s.，1H)，7.35(br. s.，1H)，5.05(t，J＝4.3Hz，1H)，4.74(br.s.，2H)，3.78-4.16(m，5H)，3.48-3.74 (m，2H)，3.24-3.46(m，6H)，3.08(br.s.，2H)，2.81(t，J＝9.3Hz，1H)，2.17-2.40 (m，3H)，1.91-2.12(m，3H)，1.53-1.88(m，3H)。对于C23H30F3N3O5的计 算值为：486.2(M+1)；实测值为：486.1。

实例30

((3aS，5S，6aR)-5-((3S，4S)-3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基氨基)六氢-2H-环戊并[b] 呋喃-3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮琥珀酸酯

步骤A

(1R，4S)-4-氨基环戊-2-烯基甲酸甲酯盐酸盐

使在MeOH(2.2L)中的(1S，4R)-2-氮杂双环[2.2.1]庚-5-烯-3-酮(725g， 6.64摩尔)溶液在冰浴中搅拌至0℃。经历2.25小时时段逐滴加入亚硫酰 氯(290mL，3.99摩尔)，同时使温度保持低于13℃。将反应在8℃下搅 拌2小时。加入乙酸异丙酯(16.3L)，并使浆搅拌1小时。将固体用布氏漏 斗过滤，用乙酸异丙酯(～1L)洗涤，并且允许固体风干过夜，以提供灰白色 固体。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ＝8.44(br.s.，3H)，5.99-6.16(m，1H)， 5.90(dt，J＝2.4，5.3Hz，1H)，4.17(br.s.，1H)，3.56-3.79(m，4H)，2.56(m，1H)， 1.84-2.04(m，1H)。

步骤B

(1R，4S)-4-(叔丁氧羰基氨基)环戊-2-烯基甲酸甲酯

使步骤A产物(551g，3.10摩尔)、CH₂Cl₂(15.5L)和二碳酸二叔丁酯 (684g，3.10摩尔)溶液伴随冰浴搅拌至2℃。经过1小时5分钟以不超过 3℃的速率加入三乙胺(435mL，3.12摩尔)。将反应搅拌2小时。将挥发 物蒸发，将粗产物悬浮于EtOAc和庚烷的混合物中，将固体通过硅胶过 滤，并且用在庚烷中的另外EtOAc洗涤。将有机物蒸发并提供作为褐色固 体的步骤B产物。¹H NMR(400MHz，)δ＝5.87(d，J＝6.4Hz，2H)，4.85-5.02 (m，1H)，4.72-4.85(m，1H)，3.72(s，3H)，3.47(m，1H)，2.51(d，J＝13.9Hz，1H)， 1.88(s，1H)，1.44(s，10H)。

步骤C

(1，1-二甲基乙基)(2-碘乙氧基)二甲基硅烷

使碘乙醇(2.68kg，15.4摩尔)、CH₂Cl₂(12L)和咪唑(1.556kg， 22.63摩尔)在冰浴中冷却。经历2小时时段将在CH₂Cl₂(2.5L)中的叔丁基 二甲基氯硅烷(2.536kg，16.32摩尔)溶液加入反应中。允许所得的白色悬 浮液经过18小时加温至室温。反应通过用水和卤水洗涤逐步建立)。使有 机层干燥(MgSO₄)，并且在减压下蒸发，以提供作为淡黄色油的步骤C产 物。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ＝3.75(t，J＝7.0Hz，2H)，3.11(t，J＝7.0Hz， 2H)，0.77-0.89(m，10H)，0.00(s，6H)。

步骤D

(1S，4S)-4-(叔丁氧羰基氨基)-1-(2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基)环戊-2- 烯基甲酸甲酯

经历2小时时段向在THF(1M，6.97L，6.97摩尔)中的-70℃ LiHMDS溶液中加入在THF(800mL)中的步骤B产物(763.5g，3.16摩尔) 溶液，同时使温度维持在或低于-68℃。将所得的溶液在-68℃下搅拌45分 钟。经历1小时50分钟时段加入在THF(800mL)中的步骤C产物 (1.267kg，4.426摩尔)溶液，同时维持在～-66℃的温度下。将反应在～-66 ℃下搅拌45分钟。使反应加温至-15℃，并且通过加入含水HCl和冰的混 合物逐步建立。将混合物用甲苯萃取，将有机层用水、盐水洗涤并在 MgSO₄上干燥。使有机层浓缩并使用在庚烷中的EtOAc混合物在硅胶上纯 化，以提供作为澄清油的步骤D产物。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)d＝ 5.69-5.86(m，2H)，4.79-4.93(m，1H)，4.68-4.80(m，1H)，3.67(s，3H)，3.53- 3.62(m，2H)，2.16-2.30(m，1H)，2.04-2.16(m，2H)，1.70-1.81(m，1H)，1.41 (s，9H)，0.78-0.91(m，13H)，0.00(s，6H)。

步骤E

叔丁基(5S，7S)-1-氧代-2-氧杂螺[4.4]壬-8-烯-7-基氨基甲酸酯

经过～1小时向步骤D产物(1149g，2.875摩尔)和THF(5.75L)的溶 液中加入TBAF(在THF中的1M，2.875L)。将反应在室温下搅拌1小 时，并用EtOAc稀释。将有机层用卤水洗涤，用庚烷稀释并将有机层进一 步用水和卤水洗涤。将有机层蒸发，将结晶产物过滤，并用庚烷洗涤，以 提供作为白色固体的步骤E产物。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)d＝5.86- 5.98(m，3H)，5.67(d，J＝5.4Hz，3H)，5.03-5.20(m，2H)，4.76-4.87(m，3H)， 4.28(t，J＝7.0Hz，5H)，2.08-2.31(m，8H)，1.99(d，J＝2.4Hz，3H)，1.34(s， 25H)。

步骤F

叔丁基((1S，4S)-4-(2-羟乙基)-4-(羟基甲基)环戊-2-烯-1-基)氨基甲酸酯

经过～2.5小时向冷却至2℃的步骤E产物(255.9g，1.01摩尔)和 MeOH(2L)溶液中加入NaBH₄(75g)。通过添加含水NH₄Cl将反应淬灭，在 减压下浓缩并用水和EtOAc稀释混合物。将层分离并用另外的EtOAc萃取 水层。将合并的有机物用卤水洗涤，干燥(MgSO₄)并蒸发，以获得作为稠油 的步骤F产物。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)d＝5.74(d，J＝2.0Hz，2H)，4.81 -4.92(m，1H)，4.67-4.79(m，1H)，3.71(t，J＝6.1Hz，2H)，3.50(d，J＝11.7Hz， 2H)，2.14-2.28(m，2H)，1.70(td，J＝1.6，6.2Hz，4H)，1.52-1.60(m，1H)，1.44 (s，9H)

步骤G

叔丁基(3aR，5S，6S，6aS)-6-溴-3a-(羟基甲基)六氢-2H-环戊并[b]呋喃-5-基氨基 甲酸酯

向在EtOAc(4L)中的步骤F产物(343.60g)的冷却溶液中加入N-溴琥珀 酰亚胺(237.60g)，随后在室温下搅拌18小时。向混合物中加入水(5mL)， 并且使反应加热至60℃共30分钟。将反应过滤，并且将滤液用含水硫代硫 酸钠洗涤直至有机层对于过氧化物为阴性。将有机层用含水Na₂CO₃(10％) 洗涤，干燥(Na₂SO₄)，并使反应在减压下浓缩。接近浓缩结束，加入庚烷 (1.2L)，并且通过过滤收集产物，以提供步骤G的产物。¹H NMR (400MHz，氯仿-d)δ＝4.78-4.91(m，1H)，4.41(br.s.，1H)，4.31(s，2H)，3.88 -3.98(m，1H)，3.61-3.77(m，3H)，2.08-2.24(m，1H)，1.82(m，2H)，1.60-1.70 (t，1H)，1.45(s，9H)

步骤H

叔丁基(3aR，5S，6aR)-3a-(羟基甲基)六氢-2H-环戊并[b]呋喃-5-基氨基甲酸酯

使在EtOAc(830mL)中的步骤G产物(83g，0.245摩尔)、10％碳载 钯(12.5g)、三乙胺(69mL，0.49摩尔，2当量)溶液在PAAR氢化器上以 40psi振荡3.5小时，直至压力保持恒定。将反应用硅藻土过滤，将滤饼用 EtOAc洗涤，并且将收集的滤液用含水HCl(1N)、卤水洗涤，干燥(Na₂SO₄) 并在减压下浓缩，以获得步骤H的产物。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)d＝ 4.60-4.73(m，1H)，4.06-4.24(m，3H)，3.84-3.93(m，1H)，3.52-3.67(m，4H)， 2.12-2.21(m，1H)，1.98-2.04(m，1H)，1.90(br.s.，3H)，1.70-1.78(m，1H)， 1.46-1.56(m，3H)，1.44(s，11H)。

步骤I

(3aS，5S，6aR)-5-(叔丁氧羰基氨基)六氢-2H-环戊并[b]呋喃-3a-羧酸

经过1小时20分钟向步骤H产物(426g，1.57摩尔)和丙酮(8.1L)的 冰冷溶液中加入琼斯试剂(710mL)。将所得的悬浮液在室温下搅拌1小时， 这之后加入异丙醇(40mL)，并且将反应在室温下搅拌25分钟。加入水，并 且将水/丙酮滗出并蒸发。将不溶性材料在水中分开溶解并用CH₂Cl₂萃取。 将绿色水/丙酮浓缩物用CH₂Cl₂萃取，并将合并的有机萃取物用卤水洗涤， 用水和EtOAc稀释，并且用Na₂SO₄干燥有机层。将有机层过滤，浓缩并由 MeCN结晶产物，并且通过过滤分离作为白色固体的步骤I产物。¹H NMR (400MHz，DMSO-d₆)d＝12.39-12.59(m，1H)，6.85-7.02(m，1H)，4.28(d，J＝ 5.4Hz，1H)，3.89-3.97(m，1H)，3.79-3.85(m，1H)，3.43-3.51(m，1H)，3.30- 3.36(m，1H)，2.35-2.42(m，1H)，1.90(d，J＝11.0Hz，3H)，1.59-1.70(m，1H)， 1.42-1.50(m，1H)，1.37(s，9H)。对于C13H21NO5的元素分析计算值为：C， 57.55；H，7.80；N，5.16。实测值为：C，57.34；H，8.18；N，5.08mp：147.4- 149.1℃

步骤J

叔丁基(3aS，5S，6aR)-3a-(3-(三氟甲基)-5，6，7，8-四氢-1，6-萘啶-6-羰基)六氢-2H- 环戊并[b]呋喃-5-基氨基甲酸酯

向在CH₂Cl₂中的步骤I产物(596.8g，1.91摩尔)溶液中加入EDC (98.5％纯，559g，2.87摩尔)和HOBt(449g，3.26摩尔)，并且使悬浮 液在室温下搅拌15分钟。通过经过45分钟的添加而加入3-(三氟甲基)- 5，6，7，8-四氢-1，6-萘啶-2HCl(790g，2.87摩尔)，随后为DIEA(1.7L， 9.65摩尔)。将反应在室温下搅拌20小时。反应在饱和含水NaHCO₃和 CH₂Cl₂之间分开。去除有机层，用水稀释水层，并且用CH₂Cl₂萃取水层。 将合并的有机物用1/2饱和卤水洗涤，在Na₂SO₄上干燥，并在减压下浓缩。 通过使用在庚烷中的EtOAc的色谱法纯化所得的粗产物，以提供作为浓稠 橙色泡沫的步骤J产物。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)d＝8.72(s，1H)，7.71 (s，1H)，5.00-5.08(m，1H)，4.77(br.s.，2H)，4.61-4.68(m，1H)，4.21-4.34(m， 1H)，3.96-4.05(m，1H)，3.85-3.93(m，2H)，3.71(s，1H)，3.13(br.s.，2H)，2.38 -2.48(m，1H)，2.28-2.33(m，1H)，2.20-2.26(m，1H)，2.09-2.17(m，1H)，1.75 -1.85(m，1H)，1.61-1.70(m，1H)，1.40(s，9H)。

步骤K

((3aS，5S，6aR)-5-氨基六氢-2H-环戊并[b]呋喃-3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢- 1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮二盐酸盐

使在MeOH(～1.25M，14.25L，17.81摩尔)中的步骤J产物(773g， 1.61摩尔)和HCl溶液加热至60℃，并且在剧烈鼓泡停止后，使反应在减 压下浓缩。加入异丙醇，将内容物蒸发至接近干燥，并且将庚烷加入烧瓶 中。将内容物过滤，用一些异丙醇/庚烷(随意)洗涤，并且使固体在空气 中干燥，随后在真空炉中干燥，以提供作为乳白色固体的步骤K产物。使 用1，2-二氯乙烷/含水3M NaOH将产物的小样品转换为游离碱的，用于通过 NMR和元素分析的进一步分析。对于C₁₇H₂₀F₃N₃O₂×1.6 H₂O的元素分析计 算值为：C，53.14；H，6.09；F，14.83；N，10.93；H₂O＝7.50。实测值为：C， 52.30；H，5.78；F，14.62；N，10.51；KF＝7.28。¹H NMR(400MHz，氯仿- d)δ＝8.72(s，1H)，7.70(br.s.，1H)，5.06(d，J＝4.9Hz，1H)，4.78(s，2H)，3.85- 4.03(m，3H)，3.71-3.75(m，2H)，3.59-3.70(m，2H)，3.08-3.19(m，2H)，2.24- 2.38(m，2H)，2.19(dd，J＝5.7，13.3Hz，1H)，2.08(br.s.，1H)，1.62-1.78(m， 1H)，1.46-1.57(m，1H)，1.42(br.s.，3H)

步骤L

((3aS，5S，6aR)-5-((3S，4S)-3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基氨基)六氢-2H-环戊并[b] 呋喃-3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮

向在1，2-二氯乙烷/CH₂Cl₂(～10L)中的步骤K产物(游离碱) (619.7g，1.74摩尔)混合物中加入乙酸(冰的，180mL)，并且将混合物 冷却至16℃。加入固体Na(OAc)₃BH(463g，2.18摩尔)，并且将悬浮液 搅拌5-10分钟。经过20分钟加入在1，2-二氯乙烷(1.75L)中的(R)-3-甲氧基 二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮(如中间体1中所述制备，213g，1.63摩尔)溶 液，并且将所得的混合物在室温下搅拌过夜。加入另外的乙酸、(R)-3-甲氧 基四氢-4H-吡喃-4-酮(28g)和Na(AcO)₃BH，直至TLC显示反应完全。用饱 和含水NaHCO₃淬灭反应，使有机层分离，并且用CH₂Cl₂反萃取水层。将 合并的有机层用卤水洗涤，干燥(Na₂SO₄)并在减压下蒸发。通过用在 CH₂Cl₂中的MeOH(7N NH₃)的色谱法实现纯化。使用庚烷/EtOH/异丙醇的 混合物，使用在chiralpak AD柱上的手性色谱法进一步纯化收集的富集异 构体，以提供步骤L的产物。

¹H NMR(氯仿-d)δ：8.72(s，1H)，7.70(br.s.，1H)，5.05(d，J＝4.6Hz， 1H)，4.70-4.87(m，2H)，4.09(dd，J＝12.5，2.7Hz，1H)，3.81-4.03(m，4H)，3.62 -3.71(m，1H)，3.50-3.62(m，1H)，3.35-3.46(m，4H)，3.24-3.35(m，2H)，3.14 (t，J＝4.9Hz，2H)，2.71-2.82(m，1H)，2.14-2.43(m，3H)，1.99-2.13(m，1H)， 1.46-1.86(m，5H)。对于C24H31F3N2O4的计算值为：470.2(M+1)；实测 值为：470.1。

步骤M

((3aS，5S，6aR)-5-((3S，4S)-3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基氨基)六氢-2H-环戊并[b] 呋喃-3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮琥珀酸酯

使在MeOH(6L)中的实例30，步骤L(608g，1.18摩尔)溶液加温至 40℃直至溶解时。加入琥珀酸(141.9g，1.20摩尔)，并且使悬浮液加温至 50℃，这促使所有一切溶解。加入Darco G-60活性炭(80g)并使内容物涡旋 20分钟。将混合物通过硅藻土过滤，用MeOH洗涤，并且使溶剂在减压下 蒸发，以提供作为无定形泡沫的标题化合物(即琥珀酸盐)。将所得的泡 沫在MIBK(5L，除气的)在回流下完全溶解，停止加热并允许溶液冷 却。将溶液在104℃下用结晶材料接种，如实例52中所述制备，并使溶液 经过4小时冷却至38℃。使悬浮液冷却至4℃，过滤，用冰冷的100mL  MIBK洗涤，并允许固体在正氮流(避光)下干燥过夜。在一些光铣后， 收集作为白色固体的步骤M产物。¹H NMR(400MHz，MeOD)δ＝8.72(s， 1H)，8.04-8.12(m，1H)，4.97(d，J＝4.4Hz，1H)，4.94(s，3H)，4.86(s，2H)，4.18 -4.28(m，1H)，3.98(d，J＝11.7Hz，4H)，3.74-3.88(m，1H)，3.62-3.73(m，1H)， 3.28-3.58(m，8H)，3.12-3.23(m，2H)，2.58-2.68(m，1H)，2.37-2.44(m，1H)， 2.28-2.36(m，1H)，1.88(m，4H)。对于C27H36F3N3O8x0.2H₂O的元素分析 计算值为：C，54.85；H，6.21；F，9.64；N，7.11；KF 0.61；实测值为：C， 55.17；H，6.07；F，9.99；N，7.11；KF，0.64。

实例31

((3aS，5S，6aR)-5-(4-苯基哌啶-1-基)六氢-2H-环戊并[b]呋喃-3a-基)(3-(三氟甲 基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮

步骤A

1-((3aS，5S，6aR)-3a-(3-(三氟甲基)-5，6，7，8-四氢-1，6-萘啶-6-羰基)六氢-2H-环戊 并[b]呋喃-5-基)哌啶-4-酮

经过1小时在60℃下向在甲醇(70mL)中的碳酸钠(2.2g，20.7mmol，5 当量)悬浮液中同时加入在甲醇(35mL)中的实例1，步骤G产物(1.77g， 4.14mmol，1当量)和在甲醇(35mL)中的1，5-二氯戊-3-酮(0.74g， 4.55mmol，1.1当量)溶液。在60℃下搅拌1小时后，使悬浮液冷却至室 温，加入水，将甲醇浓缩，并且用DCM萃取水溶液，在MgSO₄上干燥并 浓缩。通过用2至6％MeOH/DCM洗脱的色谱法的纯化提供步骤A的标题 化合物。对于C22H26F3N3O3的计算值为：438.2(M+1)；实测值为： 438.2。

步骤B

1-((3aS，5S，6aR)-3a-(3-(三氟甲基)-5，6，7，8-四氢-1，6-萘啶-6-羰基)六氢-2H-环戊 并[b]呋喃-5-基)-1，2，3，6-四氢吡啶-4-基三氟甲磺酸酯

在-78℃下在N₂下向在THF(30mL)中的步骤A产物(1.06g， 2.42mmol，1当量)中加入KHMDS(6.8mL在甲苯中的0.5M溶液， 3.39mmol，1.4当量)，溶液变成紫色。在15分钟后，加入在THF(10mL) 中的N-苯基-双(三氟甲烷磺酰亚胺)(1.21g，3.39mmol，1.4当量)溶液， 并且将黄色溶液在-78℃下搅拌1小时。加入饱和NH₄Cl，用乙酸乙酯萃取 水溶液，在MgSO₄上干燥并浓缩。通过用3至6％MeOH/DCM洗脱的柱 色谱法(80g)的纯化提供步骤B的标题化合物。对于C23H25F6N3O5S的计 算值为：570.1(M+1)；实测值为：570.0。

步骤C

((3aS，5S，6aR)-5-(4-苯基-5，6-二氢吡啶-1(2H)-基)六氢-2H-环戊并[b]呋喃-3a- 基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮

使在二甲氧基乙烷(1mL)中的步骤B产物(50mg，0.09mmol，1当 量)、苯硼酸(22mg，0.18mmol，2当量)、(Ph₃P)₄Pd(10mg， 0.009mmol，0.1当量)和2M Na₂CO₃(0.1mL)溶液在N2下在螺旋盖小瓶中 加温至80C过夜。使溶液冷却至室温并浓缩。通过用50至100％乙酸乙酯/ 庚烷洗脱的柱色谱法(4g)的纯化提供步骤C的标题化合物。对于 C28H30F3N3O2的计算值为：498.2(M+1)；实测值为：498.3。

步骤D

((3aS，5S，6aR)-5-(4-苯基哌啶-1-基)六氢-2H-环戊并[b]呋喃-3a-基)(3-(三氟甲 基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮

使在乙醇(3mL)中的步骤D产物(24mg，0.046mmol，1当量)和5％ Pd/C(20mg)悬浮液在氢气球下放置过夜。将溶液通过硅藻土过滤并浓缩。 通过用2至6％MeOH/DCM洗脱的柱色谱法(4g)的纯化提供标题化合物。 ¹H NMR(氯仿-d)δ：8.71(s，1H)，7.70(br.s.，1H)，7.27-7.33(m，2H)，7.15- 7.24(m，3H)，5.06(d，J＝4.5Hz，1H)，4.78(br.s.，2H)，4.02(td，J＝8.1，3.5Hz， 1H)，3.81-3.96(m，2H)，3.61-3.73(m，1H)，2.90-3.21(m，5H)，2.45-2.57(m， 1H)，2.22-2.32(m，2H)，2.08-2.15(m，3H)，1.99(br.s.，2H)，1.65-1.89(m， 5H)。对于C28H32F3N3O2的计算值为：500.2(M+1)；实测值为：500.3。

实例32

3-(1-((3aS，5S，6aR)-3a-(3-(三氟甲基)-5，6，7，8-四氢-1，6-萘啶-6-羰基)六氢-2H- 环戊并[b]呋喃-5-基)哌啶-4-基)苯甲酸

通过遵循实例31，步骤C中所述的操作，随后遵循实例31，步骤D 中所述的操作，获得实例31，步骤B的产物并与3-羧基苯硼酸反应，来制 备实例32的标题化合物。对于C29H32F3N3O4的计算值为：544.2 (M+1)；实测值为：544.0。

实例33

((3aS，5S，6aR)-5-(4-(3-甲氧基苯基)哌啶-1-基)六氢-2H-环戊并[b]呋喃-3a- 基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮

通过遵循实例31，步骤C中所述的操作，随后遵循实例31，步骤D 中所述的操作，获得实例31，步骤B的产物并与3-甲氧基苯硼酸反应，来 制备实例33的标题化合物。对于C29H34F3N3O3的计算值为：530.3 (M+1)；实测值为：530.3。

实例34

4-(1-((3aS，5S，6aR)-3a-(3-(三氟甲基)-5，6，7，8-四氢-1，6-萘啶-6-羰基)六氢-2H- 环戊并[b]呋喃-5-基)哌啶-4-基)苯甲酸

通过遵循实例31，步骤C中所述的操作，随后遵循实例31，步骤D 中所述的操作，获得实例31，步骤B的产物并与4-苄氧基羰基苯硼酸反 应，来制备实例34的标题化合物。¹H NMR(氯仿-d)δ：8.68(s，1H)，7.79 -7.88(m，J＝8.1Hz，2H)，7.60(br.s.，1H)，7.09-7.21(m，J＝8.6Hz，2H)，5.01 (d，J＝4.0Hz，1H)，4.67-4.78(m，1H)，4.51-4.67(m，1H)，4.02(br.s.，1H)， 3.63-3.96(m，3H)，3.34-3.54(m，3H)，3.23(d，J＝11.6Hz，1H)，3.09(br.s.， 1H)，2.56-2.70(m，2H)，2.27-2.50(m，5H)，1.84-2.20(m，6H)。对于 C29H32F3N3O4的计算值为：544.2(M+1)；实测值为：544.2。

实例35

((3aS，5S，6aR)-5-(((3S，4S)-3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢-2H-环戊并 [b]呋喃-3a-基)(6-(三氟甲基)-2H-苯并[e][1，3]嗪-3(4H)-基)甲酮

步骤A

叔丁基((3aS，5S，6aR)-3a-((2-(叔丁氧基)-5-(三氟甲基)苄基)氨基甲酰基)六氢- 2H-环戊并[b]呋喃-5-基)氨基甲酸酯

遵循来自实例1，步骤C的操作，由实例23，步骤E的产物和根据 ACS Med.Chem.Letters 2010，1，14中的操作制备的(2-(叔丁氧基)-5-(三氟甲 基)苯基)甲酰胺的反应制备步骤A的产物。对于C25H35F3N2O5的计算值 为：523.2(M+23)；实测值为：523.2。

步骤B

(3aS，5S，6aR)-5-氨基-N-(2-羟基-5-(三氟甲基)苄基)六氢-2H-环戊并[b]呋喃- 3a-甲酰胺二盐酸盐

使在甲醇(60mL)中的步骤A产物(11.07g，20.57mmol，1当量)溶液 和在甲醇中的HCl溶液(82mL 1.25M溶液，103mmol，5当量)加热至55 ℃共2.5天。使溶液浓缩以获得步骤B的产物。对于C16H19F3N2O3的计 算值为：345.1(M+1)；实测值为：345.3。

步骤C

(3aS，5S，6aR)-5-(1，3-二氧代异吲哚啉-2-基)-N-(2-羟基-5-(三氟甲基)苄基)六 氢-2H-环戊并[b]呋喃-3a-甲酰胺

使在氯仿(150mL)中的步骤B产物(8.58g，18.74mmol，1当量)、邻 苯二甲酸酐(5.55g，37.5mmol，2当量)和DIEA(11.3mL，55.6mmol， 3.5当量)溶液加热至70℃共2小时。使溶液冷却至室温，并加入羰基二咪 唑(2.24g 13.82mmol，3当量)，并且将溶液加热至60℃共2小时。将溶 液冷却至室温，加入1N HCl，用DCM萃取水溶液，合并有机物，在 MgSO4上干燥并浓缩。通过用30至60至80％EA/庚烷洗脱的色谱法 (200g柱)的纯化提供步骤C的产物。对于C24H21F3N2O5的计算值为： 474.1(M+1)；实测值为：475.1。

步骤D

2-((3aS，5S，6aR)-3a-(6-(三氟甲基)-3，4-二氢-2H-苯并[e][1，3]嗪-3-羰基)六氢- 2H-环戊并[b]呋喃-5-基)异吲哚啉-1，3-二酮

使在甲苯(300mL)中的步骤C产物(7.97g，15.5mmol，1当量)、多 聚甲醛(9.28g，310mmol，20当量)和对甲苯磺酸水合物(2.94g， 15.5mmol，1当量)溶液在配备迪安-斯脱克分水器的烧瓶中加热至130℃ 共18小时。使溶液冷却至室温并浓缩。通过用25至60至100％乙酸乙酯/ 庚烷洗脱的色谱法(200g柱)的纯化提供步骤D的产物。对于 C25H21F3N2O5的计算值为：487.1(M+1)；实测值为：487.2。

步骤E

((3aS，5S，6aR)-5-氨基六氢-2H-环戊并[b]呋喃-3a-基)(6-(三氟甲基)-2H-苯并 [e][1，3]嗪-3(4H)-基)甲酮

使在乙醇(60mL)中的步骤D产物(5.39g，11.1mmol，1当量)和肼 (7.1mL，222mmol，20当量)溶液在室温下搅拌18小时。将白色固体过 滤，用甲醇和DCM洗涤，并将滤液浓缩。加入饱和NaHCO₃，用DCM萃 取水溶液，合并有机物，在MgSO₄上干燥并浓缩，以提供步骤E的产物。 对于C17H19F3N2O3的计算值为：357.1(M+1)；实测值为：357.3。

步骤F

((3aS，5S，6aR)-5-(((3S，4S)-3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢-2H-环戊并 [b]呋喃-3a-基)(6-(三氟甲基)-2H-苯并[e][1，3]嗪-3(4H)-基)甲酮

遵循实例1，步骤H中所述的操作，由步骤E的产物和(R)-3-甲氧基二 氢-2H-吡喃-4(3H)-酮(中间体1)的反应制备标题化合物。¹H NMR(氯仿- d)δ：7.42(d，J＝8.6Hz，1H)，7.36(br.s.，1H)，6.95(d，J＝8.1Hz，1H)，5.43(br. s.，2H)，4.96-5.11(m，1H)，4.82(br.s.，2H)，3.84-4.15(m，3H)，3.68(d，J＝ 7.1Hz，1H)，3.55(br.s.，1H)，3.32-3.45(m，4H)，3.20-3.32(m，2H)，2.69-2.84 (m，1H)，2.39(br.s.，1H)，2.12-2.25(m，2H)，1.99-2.12(m，1H)，1.78-1.99(m， 1H)，1.46-1.78(m，4H)。对于C23H29F3N2O5的计算值为：471.2(M+1)； 实测值为：471.2。

实例36

((3aS，5S，6aR)-5-(((3R，4R)-3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢-2H-环戊并 [b]呋喃-3a-基)(6-(三氟甲基)-2H-苯并[e][1，3]嗪-3(4H)-基)甲酮

遵循实例1，步骤H中所述的操作，由步骤E的产物和(S)-3-甲氧基二 氢-2H-吡喃-4(3H)-酮的反应制备标题化合物。¹H NMR(氯仿-d)δ：7.42(d， J＝8.6Hz，1H)，7.36(br.s.，1H)，6.96(d，J＝8.6Hz，1H)，5.35-5.49(m，2H)， 5.05(d，J＝5.1Hz，1H)，4.74-4.90(m，2H)，4.05(dd，J＝12.6，3.5Hz，1H)，3.94 -4.01(m，1H)，3.91(dt，J＝11.4，3.7Hz，1H)，3.61-3.71(m，1H)，3.48-3.60(m， 1H)，3.24-3.41(m，6H)，2.78(dd，J＝6.3，3.8Hz，1H)，2.39(br.s.，1H)，2.19(td， J＝12.1，6.1Hz，2H)，2.05(dt，J＝12.3，8.3Hz，1H)，1.89(br.s.，1H)，1.43-1.75 (m，4H)。对于C23H29F3N2O5的计算值为：471.2(M+1)；实测值为： 471.2。

实例37

3-(1-((3aS，5S，6aR)-3a-(6-(三氟甲基)-3，4-二氢-2H-苯并[e][1，3]嗪-3-羰基)六 氢-2H-环戊并[b]呋喃-5-基)哌啶-4-基)苯甲酸

通过遵循实例31，步骤A和B中所述的操作，获得实例35，步骤E 的产物，随后遵循实例31，步骤C中所述的操作，使该产物与3-苄氧基羰 基苯硼酸反应，随后遵循实例31，步骤D中所述的操作，来制备实例37 的标题化合物。¹H NMR(氯仿-d)δ：8.04(s，1H)，7.78(d，J＝6.8Hz，1H)， 7.32-7.43(m，2H)，7.19-7.32(m，2H)，6.93(d，J＝8.3Hz，1H)，5.16-5.66(m， 2H)，5.06(d，J＝4.2Hz，1H)，4.96(d，J＝16.9Hz，1H)，4.72(d，J＝16.9Hz，1H)， 3.96-4.11(m，1H)，3.55-3.75(m，2H)，3.47(s，1H)，3.29-3.45(m，2H)，2.59- 2.80(m，2H)，2.35-2.59(m，5H)，2.30(dd，J＝12.8，5.7Hz，1H)，2.13-2.24(m， 1H)，1.99-2.13(m，2H)，1.92(d，J＝11.7Hz，1H)，1.82(d，J＝13.4Hz，1H)。对 于C29H31F3N2O5的计算值为：545.2(M+1)；实测值为：545.2。

实例38

((3aS，5S，6aR)-5-(4-苯基哌啶-1-基)六氢-2H-环戊并[b]呋喃-3a-基)(6-(三氟甲 基)-2H-苯并[e][1，3]嗪-3(4H)-基)甲酮

通过遵循实例31，步骤A直到D中所述的操作获得实例35，步骤E 的产物，来制备实例38的标题化合物。¹H NMR(氯仿-d)δ：7.42(d，J＝ 8.6Hz，1H)，7.37(br.s.，1H)，7.29(t，J＝7.5Hz，2H)，7.15-7.24(m，3H)，6.96(d， J＝8.6Hz，1H)，5.42(br.s.，2H)，5.03(d，J＝4.6Hz，1H)，4.69-4.95(m，2H)， 3.95-4.07(m，1H)，3.60-3.73(m，1H)，3.04(br.s.，3H)，2.32-2.56(m，2H)， 2.19-2.31(m，2H)，1.89-2.17(m，4H)，1.53-1.89(m，6H)。对于 C28H31F3N2O3的计算值为：501.2(M+1)；实测值为：501.2。

实例39

N，N-二甲基-3-(1-((3aS，5S，6aR)-3a-(6-(三氟甲基)-3，4-二氢-2H-苯并[e][1，3]嗪-3-羰基)六氢-2H-环戊并[b]呋喃-5-基)哌啶-4-基)苯甲酰胺

通过遵循实例31，步骤A和B中所述的操作，获得实例35，步骤E 的产物，随后遵循实例31，步骤C中所述的操作，使该产物与N，N-二甲基 苯甲酰胺-3-硼酸反应，随后遵循实例31，步骤D中所述的操作，来制备实 例39的标题化合物。对于C31H36F3N3O4的计算值为：572.3(M+1)；实 测值为：572.3。

实例40

((3aS，5S，6aR)-5-(((3S，4S)-3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)(甲基)氨基)六氢-2H- 环戊并[b]呋喃-3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮

通过遵循实例1，步骤H中所述的操作获得实例30的产物并与甲醛反 应，来制备实例40的标题化合物。¹H NMR(氯仿-d)δ：8.72(br.s.，1H)， 7.70(br.s.，1H)，5.03(d，J＝4.6Hz，1H)，4.67-4.92(m，2H)，4.15(d，J＝12.7Hz， 1H)，3.97-4.10(m，2H)，3.92(br.s.，2H)，3.55-3.71(m，2H)，3.33-3.53(m， 5H)，3.22(d，J＝12.7Hz，1H)，3.14(br.s.，2H)，2.64(d，J＝11.7Hz，1H)，2.22- 2.50(m，4H)，1.79-2.22(m，6H)，1.69(td，J＝12.5，4.9Hz，1H)，1.51(d，J＝ 12.0Hz，1H)。对于C24H32F3N3O4的计算值为：484.2(M+1)；实测值为： 484.2。

实例41

((3aS，5S，6aR)-5-((2-甲氧基乙基)((3S，4S)-3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基) 六氢-2H-环戊并[b]呋喃-3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲 酮

通过遵循实例1，步骤H中所述的操作，获得实例30的产物并与甲氧 基乙醛反应，来制备实例41的标题化合物。对于C26H36F3N3O5的计算值 为：528.3(M+1)；实测值为：528.3。

实例42

((3aS，5S，6aR)-5-(((3S，4S)-3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)(2，5，8，11-四氧十四烷- 14-基)氨基)六氢-2H-环戊并[b]呋喃-3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶- 6(5H)-基)甲酮

通过遵循实例1，步骤H中所述的操作，获得实例30的产物并与 4，7，10，13-四氧十四醛反应，来制备实例42的标题化合物。对于 C33H50F3N3O8的计算值为：674.4(M+1)；实测值为：674.4。

实例43

((3aS，5S，6aR)-5-((2-羟乙基)((3S，4S)-3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢- 2H-环戊并[b]呋喃-3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮

步骤A

((3aS，5S，6aR)-5-((2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)((3S，4S)-3-甲氧基四 氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢-2H-环戊并[b]呋喃-3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢- 1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮

通过遵循实例1，步骤H中所述的操作，获得实例30的产物并与叔丁 基二甲基硅氧烷基乙醛反应，来制备步骤A的标题化合物。对于 C31H48F3N3O5Si的计算值为：628.3(M+1)；实测值为：628.2。

步骤B

((3aS，5S，6aR)-5-((2-羟乙基)((3S，4S)-3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六氢- 2H-环戊并[b]呋喃-3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮

使在1N HCl(0.25mL)和二烷(5mL)中的步骤A产物(210mg， 0.33mmol，1当量)溶液加热至90℃共18小时，随后冷却至室温。加入饱 和NaHCO₃，用CH₂Cl₂萃取水溶液，在MgSO₄上干燥并浓缩。通过用3至 8％MeOH/DCM洗脱的色谱法(12g)的纯化提供实例43的标题化合物(67mg， 38％)。¹H NMR(氯仿-d)δ：8.72(br.s.，1H)，7.71(br.s.，1H)，4.96(d，J＝ 4.4Hz，1H)，4.80(br.s.，2H)，4.15(d，J＝12.7Hz，1H)，3.77-4.10(m，5H)，3.56- 3.70(m，1H)，3.30-3.52(m，7H)，3.23(d，J＝12.7Hz，1H)，3.14(br.s.，2H)，2.66 -2.90(m，3H)，2.39(br.s.，1H)，2.13-2.27(m，1H)，2.05(dd，J＝12.7，5.6Hz， 3H)，1.82(br.s.，1H)，1.68(td，J＝12.6，4.9Hz，1H)，1.42(br.s.，1H)。对于 C25H34F3N3O5的计算值为：514.3(M+1)；实测值为：514.3。

实例44

((3aS，5S，6aR)-5-((3-羟基丙基)((3S，4S)-3-甲氧基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基)六 氢-2H-环戊并[b]呋喃-3a-基)(3-(三氟甲基)-7，8-二氢-1，6-萘啶-6(5H)-基)甲酮

通过遵循实例43步骤A和B中所述的操作，获得实例30的产物并与 3-((叔丁基二甲基硅氧烷基)氧基)丙醛反应，来制备实例44的标题化合物。 ¹H NMR(氯仿-d)δ：8.72(s，1H)，7.72(s，1H)，4.97(d，J＝4.5Hz，1H)，4.69- 4.91(m，2H)，4.15(d，J＝12.6Hz，1H)，3.83-4.10(m，5H)，3.58-3.82(m，3H)， 3.33-3.47(m，5H)，3.25(d，J＝12.6Hz，1H)，3.14(br.s.，2H)，2.70-2.93(m， 3H)，2.36(br.s.，1H)，2.15-2.30(m，1H)，1.97-2.15(m，3H)，1.78-1.96(m， 1H)，1.35-1.77(m，4H)。对于C26H36F3N3O5的计算值为：528.3(M+1)； 实测值为：528.3。

实例45

体外生物学数据

使本发明化合物经受多种代表性的生物学测试。

这些测试的结果旨在以非限制性的方式说明本发明。

在THP-1细胞中的MCP-1受体结合测定法

人单核细胞细胞系THP-1细胞得自美国典型培养物中心(Manassas， Va.，USA)。THP-1细胞在补充有10％胎牛血清的RPMI-1640(RPMI：洛 斯维帕克纪念研究所培养基(Roswell Park Memorial Institute Medium)-细胞培 养生长培养基)中在潮湿5％CO₂大气中在37℃下生长。将细胞密度维持 在0.5×10⁶个细胞/mL之间。

在各种浓度的未标记的MCP-1(R&D Systems，Minneapolis，Minn.)) 或测试化合物的存在下，使THP-1细胞与0.5nM¹²⁵I标记的MCP-1 (Perkin-Elmer Life Sciences，Inc.Boston，Mass.)一起在30℃下在96孔板中 温育2小时。然后将细胞收获至滤板上，干燥，并将20μL的Microscint 20 加入至每孔中。板在TopCount NXT，微板闪烁和发光计数器(Microplate  Scintillation&Luminescence Counter)(Perkin-Elmer Life Sciences，Inc. Boston，Mass.)中进行计数。从所有值减去空白值(仅有缓冲液)并将药物 处理值与媒介物处理值进行比较。将1μM冷MCP-1用于非特异性结合。

表1列出了针对本发明的测试化合物获得的抑制MCP-1与CCR2结合 的IC₅₀值。当对于特定化合物未获得IC₅₀值时，抑制百分比以25μM的测 试浓度提供。

表1：MCP-1结合IC₅₀的抑制

实例15、29-31、33、35-37、39和40的化合物被认为具有小于约 50nM的CCR2结合，实例14、20、22和25的化合物被认为具有约50- 100nM的CCR2结合，实例17、26、38和43-44的化合物被认为具有约 100-200nM的CCR2结合，并且实例18、19、23、24、27、28、32、34、 41和42的化合物被认为具有大于约200nM的CCR2结合。

实例46

动物

使用注射到C57BL/6小鼠内的靶向129Sv/Evbrd胚胎干细胞克隆生成 小鼠CCR2敲除/人CCR2敲入小鼠。hCCR2转录物的表达通过在来自纯合 hCCR2敲入小鼠的脾脏和血液全RNA上进行的定量逆转录聚合酶链反应进 行确认。向C57BL/6遗传背景的回交继续进行到第八代。转基因小鼠在无 特异性病原体、温控的设施中饲养，所述设施维持12小时光照/12小时黑 暗的周期。小鼠自由接近水和食物。实验程序依据动物管理的机构标准来 执行，并由机构动物管理和使用委员会批准。

实例47

鼠体内细胞迁移测定法

动物以3、10和30mg/kg bid口服给予媒介物或CCR2拮抗剂。动物经 历麻醉和剖腹手术。将远侧小肠襻(loop)(5cm长)轻轻从腹腔取出至湿 润消毒纱布上。将合成的人MCP-1(1mg/100mL无菌PBS)或单独的PBS 逐滴施用至取出的肠襻的绒毛膜上。将缝线结置于肠系膜中以标记处理的 区域的末端。二十四小时后，处死动物，并移出该肠节段及相邻区域。沿 肠系膜边界打开组织，钉平并去除粘膜。剩余的肌肉层在100％EtOH中稍 作固定，然后使用Hanker-Yates试剂染色，以检测含有髓过氧化物酶的免 疫细胞。在以10mg/kg，一日两次经口施用时，如果与媒介物处理动物相比 细胞迁移的抑制达到30％，则认为化合物是有效的。

实例48

在小鼠中硫代乙醇酸酯诱导的腹膜炎

动物用媒介物或实例30的化合物以0、1、3和10mg/kg bid)经口给 予。一小时后，给动物腹腔内注射无菌硫代乙醇酸酯(25mL/kg，ip， Sigma)用于诱导腹膜炎。每天用媒介物或实例30经口处理动物两次。在 72小时时间点，用10mL的无菌盐水灌洗腹腔。使用显微镜进行腹腔灌洗 液中的总细胞计数，并在吉姆萨染色(Hema Tek 2000)后使用细胞离心涂片 器(cytospin)分析进行细胞区别。通过比较CCR2拮抗剂处理小鼠与媒介物 处理的小鼠的白细胞数的变化，来计算硫代乙醇酸酯诱导的腹膜炎的抑制 百分比。当实例30的化合物以1、3和10mg/kg p.o bid进行施用时，在72 小时在hCCR2KI小鼠中硫代乙醇酸酯诱导的细胞浸润分别被抑制51％、 67％和95％。实例30的效应证实为剂量依赖性的，具有在血浆中的ED₅₀1mg/kg p.o.bid和cmax EC₅₀97nM(最后一次剂量后0.5小时)。

实例49

MCP-1-诱导的单核细胞至小鼠气道的募集

用以3、10和30mg/kg一日两次经口服的媒介物或CCR2拮抗剂经口 处理动物。一小时后，将动物鼻内给予在无菌盐水中的4μg MCP-1。每天 用媒介物或CCR2拮抗剂经口处理动物两次。在48小时后，通过腹膜内注 射麻醉溶液(Sleepaway-戊巴比妥钠)对小鼠实施安乐死。使用1.4ml含有 3mM EDTA的冰冷PBS执行整个支气管肺泡灌洗(BAL)。使用显微镜执 行BAL灌洗液中的总细胞计数并在Giemsa染色(Hema Tek 2000)后利用 细胞离心涂片器分析执行细胞分化。通过比较化合物处理小鼠和媒介物处 理小鼠的总白细胞计数(包括单核细胞/巨噬细胞和淋巴细胞)的变化来计 算抑制百分比。如果抑制百分比达到30％，则认为化合物是有效的。

实例50

小鼠中高脂肪饮食诱导的肥胖症和胰岛素抗性

在处于7周龄的动物中通过大约60％卡里路源自脂肪的高脂饲料(D- 12492；Research Diets Inc.)诱导肥胖症，共10-12周。在7周龄之前，给动 物喂养标准颗粒饮食，其中5％的卡路里作为脂肪提供。肥胖动物通过体重 进行随机化。肥胖动物用媒介物或实例30的化合物以1、3和10mg/kg，po  bid进行经口处理。监测体重和食物摄入以及空腹血糖水平。通过NMR分 析器(Bruker MiniSpec)来测定体重指数。在禁食3小时的动物中执行胰岛素 耐受性测试。在腹膜内弹丸式注射重组人胰岛素(0.5U/kg)后，在注射前以 及在注射后15、30、45、60、90和120分钟，使用血糖仪测量血糖浓度。 在过夜(17小时)禁食后进行葡萄糖耐受性测试。在溶于水中的葡萄糖 (2.5g/kg)的口服剂量前以及在口服15、30、60、90、120分钟后测量血糖浓 度。通过完备的实验室动物监测系统监测能量消耗分析。在用媒介物或 CCR2拮抗剂处理50天后，通过CO₂窒息处死动物。通过比较化合物处理 的小鼠与媒介物处理的小鼠的体重变化，来计算体重减轻百分比。在32天 处理后，当分别以1、3和10mg/kg p.o.bid施用时，实例30的化合物使高 脂饮食诱导的体重减少4.94％(p＞0.05)、10.94％(p＜0.01)和15.7％(p＜ 0.01)。

实例51

过敏性哮喘的小鼠模型

通过在第0天和第5天腹膜内注射在100μL磷酸盐缓冲盐水(PBS) 中吸收至1mg的10μg鸡蛋清白蛋白(OVA)而使动物敏化。对照 动物接受PBS ip。在第12、16和20天，利用超声雾化器通过吸入0.5％ OVA气雾剂10分钟来攻击OVA免疫动物。对照动物以类似方式用PBS来 攻击。OVA敏化动物从第9-20天每天两次且在第21天每天一次(处死前 2小时)，以3、10、30mg/kg经口接受媒介物(0.5％甲基纤维素 (Methocel))或CCR2拮抗剂。每天一次经口服地塞米松(5mg/kg)和孟 鲁斯特(1mg/kg)。在第21天，在最后一次按剂量给服CCR2化合物后2 小时，利用Buxco全身体积描记术测量对气雾化乙酰甲胆碱的支气管反应 性。在第21天，处死动物。收集支气管肺泡罐洗液(1mL)，并对总细胞 进行计数。在Giemsa染色(Hema Tek 2000)后用细胞离心涂片器分析来 确定嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞的数量。通过将化 合物处理小鼠与媒介物处理小鼠相比来计算对总BAL白细胞计数(和嗜酸 性粒细胞计数)的抑制百分比。如果抑制百分比达到30％，则认为化合物 是有效的。

实例52

式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸盐的制备

通过使式(I)的化合物的无定形琥珀酸盐(无定形琥珀酸盐是实例30， 步骤M中所述的泡沫)在敞口DSC铝盘中以10℃/分钟的加热速率加热至 约140℃，随后以10℃/分钟的冷却速率冷却至30℃，来制备式(I)的化合物 的结晶琥珀酸盐。

图5示出了在上述实验期间测量的DSC热谱图。DSC热谱图显示在约 50℃下的第一吸热事件(理论上为无定形形式的去溶剂化结果)；在约138 ℃下具有最大值的放热事件，指示结晶；和在155℃下的后续吸热事件，指 示结晶固体的熔解。

图5还包括关于在上文描述的实例中使用的式(I-S)的化合物的无定形 琥珀酸盐的TGA热谱图，所述无定形琥珀酸盐显示在室温和约80℃之间的 约4.8％重量减轻；和在约172℃下开始的分解。

实例53

式(I-S)的化合物的结晶琥珀酸盐的制备

下述一般操作应用于筛选研究中，用于鉴定适合于式(I-S)的化合物的 结晶琥珀酸盐结晶的溶剂。由式(I-S)的化合物的无定形琥珀酸盐(无定形 琥珀酸盐是实例30，步骤M中所述的泡沫)制备式(I-S)的化合物的结晶琥 珀酸盐，由甲基异丁基酮结晶。(注：水、甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、乙 酸异丙酯、硝基甲烷、四氢呋喃、甲基乙基酮、二氯甲烷和甲苯不诱导结 晶)。

将式(I-S)的化合物的无定形琥珀酸盐(5-10mg)悬浮于1-2mL甲基异丁 基酮(MIBK)中。将所得的悬浮液在油浴中在回流条件下加热，悬浮液形成 澄清溶液，所述澄清溶液在冷却至室温后在环境条件下获得结晶固体。

允许从MIBK中分离的固体在环境条件下干燥，并且随后通过X射线 进行分析。从MIBK中分离的固体的pXRD图类似于热处理样品(如上文 实例52中制备)的pXRD图，指示在两种情况下产生相同结晶形式。

实例54：口服制剂-假想例实例

作为口服组合物的具体实施例，将100mg如实例53制备的化合物与 足量细分的乳糖一起配制，提供580至590mg总量以填充O号硬胶囊。

尽管上述说明书教导了本发明的原理，以示例为目的提供了实例，但 应该理解本发明的实施涵盖落入所附的权利要求及它们的等同形式的范围 内的所有通常的变型形式、改变形式和/或修改形式。