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一种基于合成单链DNA文库快速高效组合进化DNA的方法

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本发明公开了一种基于合成单链DNA文库快速高效组合进化DNA的方法，属于基因工程技术领域。本发明先后或同时构建DNA单链突变体文库和双链突变体文库，将突变文库重组表达载体后转化宿主进行高通量筛选进化突变株。本发明采用此技术，成功对启动子、酶和代谢途径进行体外改造，获得了性质非常优异的突变株。本方法实现了基因的快速体外进化，操作简单，可用于调控序列如启动子、核糖体结合位点等基因的快速定向进化，特别适合于对基因内部引入丰富的突变多样性，进行快速定向进化。

著录项

公开/公告号CN104789556A

专利类型发明专利
公开/公告日2015-07-22

原文格式PDF
申请/专利权人江南大学;
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申请/专利号CN201510212925.7
发明设计人康振;陈坚;金鹏;堵国成;
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申请日2015-04-29
分类号
代理机构北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙);
代理人张勇
地址 214122 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号
入库时间 2023-12-18 10:02:35

法律信息

法律状态公告日

法律状态信息

法律状态
2019-02-26

发明专利申请公布后的驳回 IPC(主分类):C12N15/10 申请公布日:20150722 申请日:20150429

发明专利申请公布后的驳回
2015-08-19

实质审查的生效 IPC(主分类):C12N15/10 申请日:20150429

实质审查的生效
2015-07-22

公开

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外文文献

1. 一种基于合成单链DNA文库快速高效组合进化DNA的方法 [P] . 中国专利： CN104789556A . 2015-07-22
2. 一种基于合成单链DNA文库进化基因表达调控元件的方法 [P] . 中国专利： CN104789555A . 2015-07-22
3. A process for isolating and purifying vasopeptidase-inhibiting peptides with specificity for the angiotensin-converting enzyme carboxylic site secreted by snake venom glands (bpps), particularly jararaca bothrops, or endogenously produced (evasins) having vasodilatory and anti- hypertensive; process of determining the starch sequence of inhibitor peptides secreted by the snake venom (bpps) or endogenous (evasin) venom; The process of determining the amino acid sequence of bpps by deducting the cdna from precursors of these molecules expressed in snake tissues, specifically bothrops jararaca. process of determining the amino acid sequence of evasins by deducing cdna from precursors of these molecules expressed in snake tissues, specifically bothrops jararaca, process of amplifying cdna from pancreatic and / or snake brain cdna libraries, specifically bothrops jararaca ; solid phase synthesis process of vasopeptidase inhibiting peptides with vasodilating and antihypertensive action, vaso [P] . BR0101088A . 2003-03-18

机译：一种分离和纯化具有对蛇毒腺（bpps），特别是贾拉卡双峰植物分泌的或具有血管扩张和抗高血压作用的内源性（evasins）分泌的血管紧张素转化酶羧基位点具有特异性的血管肽酶抑制肽的方法;确定蛇毒（bpps）或内源性（evasin）毒液分泌的抑制剂肽的淀粉序列的过程;通过从蛇组织中表达的这些分子的前体中减去cdna来确定bpps氨基酸序列的过程，尤其是杂种植物。通过从在蛇组织中表达的这些分子的前体推导cdna来确定evasins氨基酸序列的过程，特别是在蛇和蛇脑cdna文库中扩增cdna的过程，尤其是在蛇和草cdna文库中;血管肽酶抑制肽具有血管舒张和降压作用的固相合成方法
4. resistance of plants to infection with a single stranded dna virus, a single stranded dna binding protein based compositions and procedures for their use. [P] . 德国专利： DE69928525D1 . 2005-12-29

机译：植物对单链dna病毒，基于单链dna结合蛋白的组合物感染的抗性及其使用方法。
5. Modified gene encoding a rna, protein, polypeptide or peptide, vector, methods for controlling the production of a protein, polypeptide or peptide from a gene, to modify a gene, to remove a 5'-cap structure and / or a 3'-pulley tail of a pre-mRNA or mRNA transcribed from a gene, for controlled production of a protein, polypeptide or peptide within a cell, of evolution and in vitro selection for the production of a ligand-bound RNA sequence of evolution and in vitro selection for the production of a ligand-dependent self-cleavable RNA sequence, synthetic DNA molecule, combination of ligand and modified gene, dna, and ligand-dependent self-cleaving synthetic RNA molecule [P] . BR0014632A . 2002-06-18

机译：编码RNA，蛋白质，多肽或肽的修饰基因，载体，控制基因中蛋白质，多肽或肽的产生，修饰基因，去除5'-帽结构和/或3'-的方法从基因转录的前mRNA或mRNA的滑轮尾，用于控制细胞内蛋白质，多肽或肽的产生，进化和体外选择，以产生配体结合的RNA进化和体外选择序列用于生产依赖配体的自切割RNA序列，合成DNA分子，配体和修饰基因的组合，dna和依赖配体的自切割合成RNA分子